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间隙连接基因Cx32在肝细胞癌与肝炎中的表达意义分析
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作者 周任 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第22期2663-2664,共2页
目的探讨间隙连接基因Cx32在肝细胞癌与肝炎中的表达意义,为肝细胞癌的治疗提供参考。方法应用蛋白杂交和RT-PCR技术分别检测Cx32蛋白和Cx32mRNA在30例肝细胞癌组织、30例肝炎组织和30例正常肝组织中的表达水平。结果肝癌组织Cx32蛋白... 目的探讨间隙连接基因Cx32在肝细胞癌与肝炎中的表达意义,为肝细胞癌的治疗提供参考。方法应用蛋白杂交和RT-PCR技术分别检测Cx32蛋白和Cx32mRNA在30例肝细胞癌组织、30例肝炎组织和30例正常肝组织中的表达水平。结果肝癌组织Cx32蛋白杂交产物灰度值显著低于正常肝组织(P<0.01),并显著低于肝炎组织(P<0.05),而肝炎组织和正常肝组织中该蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。Cx32mRNA肝细胞癌组织、肝炎组织及正常肝脏中的表达含量类似,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Cx32基因作为抑癌基因,在肝癌组织中Cx32蛋白表达下调,可能是肝癌组织的重要机制之一,而Cx32蛋白缺失可能与Cx32基因在转录后的翻译或翻译后蛋白质的加工修饰过程异常相关。 展开更多
关键词 间隙连接基因 CX32 肝细胞癌 肝炎
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右美托咪定诱导家兔心动过缓窦房结缝隙连接基因蛋白Cx45和Cx31.9表达研究 被引量:3
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作者 田友芳 吴江 +2 位作者 宋伟 胡兵 姚猛飞 《中国药业》 CAS 2019年第11期37-39,共3页
目的探讨右美托咪定诱导家兔心动过缓是否与窦房结缝隙连接基因蛋白Cx45和Cx31.9表达变化有关。方法将36只8周龄健康家兔分为3组,各12只,均通过耳缘静脉注射构建家兔心动过缓模型。巴比妥钠麻醉后,进行心电图、血压监测。A组持续注射生... 目的探讨右美托咪定诱导家兔心动过缓是否与窦房结缝隙连接基因蛋白Cx45和Cx31.9表达变化有关。方法将36只8周龄健康家兔分为3组,各12只,均通过耳缘静脉注射构建家兔心动过缓模型。巴比妥钠麻醉后,进行心电图、血压监测。A组持续注射生理盐水15 mL/kg;B组注射右美托咪定20μg/kg负荷量10 min,10μg/(kg·h)持续注射50 min;C组注射右美托咪定80μg/kg负荷量10 min,40μg/(kg·h)持续注射50 min。观察3组家兔平均动脉压(MAP)和血液流变(HR)变化情况,记录数据后解剖,取出家兔心脏,分离窦房结组织,通过免疫组化和荧光定量PCR检测Cx45和Cx31.9的表达水平。结果Cx45 mRNA表达水平,A组高于B组,B组高于C组(P<0.05);Cx31.9 mRNA表达水平,B组高于A组(P<0.05),C组与B组无明显差异(P>0.05);Cx45和Cx31.9的蛋白表达变化趋势与mRNA一致。结论右美托咪定诱导家兔心动过缓,导致窦房结缝隙连接基因蛋白Cx45和Cx31.9表达升高。 展开更多
关键词 右美托咪定 心动过缓 窦房结缝隙连接基因 CX45 Cx31.9 家兔
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益生菌对肉鸡生长性能和小肠上皮紧密连接基因表达的影响
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作者 韩亚楠 张瀚露 +5 位作者 王军 张曼 李月勤 彭永帅 宋予震 张利卫 《饲料研究》 CAS 北大核心 2022年第20期33-37,共5页
试验旨在研究益生菌对肉鸡小肠黏膜屏障的影响。选取1日龄健康、初始体重相近的雄性肉鸡75只,随机分为5组,每组5只,每组3个重复。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ和Ⅳ组分别在基础日粮中添加益生菌A、益生菌B、益生菌C和益生菌D,Ⅴ组(对照组)肉鸡饲喂基... 试验旨在研究益生菌对肉鸡小肠黏膜屏障的影响。选取1日龄健康、初始体重相近的雄性肉鸡75只,随机分为5组,每组5只,每组3个重复。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ和Ⅳ组分别在基础日粮中添加益生菌A、益生菌B、益生菌C和益生菌D,Ⅴ组(对照组)肉鸡饲喂基础日粮。试验期42 d。采用RT-PCR方法检测肉鸡小肠上皮紧密连接Occludin和Claudin基因表达量。结果显示:添加益生菌对肉鸡的生长性能无影响。42日龄时,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肉鸡小肠上皮紧密连接Occludin和Claudin基因的相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,日粮中添加益生菌能够显著增强肉鸡肠黏膜屏障的免疫机能。 展开更多
关键词 益生菌 肉鸡 十二指肠 空肠 回肠 紧密连接基因
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间隙连接基因Cx43表达对肺癌细胞体内成瘤生长的抑制 被引量:12
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作者 林仲翔 张志谦 王耐勤 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期253-255,共3页
目的探讨间隙连接基因表达和细胞通讯功能对肿瘤生长的抑制作用。方法以高转移性人肺癌PG细胞为材料,该细胞的间隙连接基因Cx43表达抑制,细胞通讯功能缺陷。用Cx43cDNA转染PG细胞,分离转染子克隆,与只转染空载体c... 目的探讨间隙连接基因表达和细胞通讯功能对肿瘤生长的抑制作用。方法以高转移性人肺癌PG细胞为材料,该细胞的间隙连接基因Cx43表达抑制,细胞通讯功能缺陷。用Cx43cDNA转染PG细胞,分离转染子克隆,与只转染空载体cDNA的对照组PG进行比较。用Northern分子杂交和染料传输方法检查间隙连接表达情况,并观察细胞在体外和裸鼠体内生长。结果空载体对照组与未转染组PG相似,Cx43mRNA无表达,通讯功能缺陷,细胞生长快,在软琼脂内集落形成率高(11.6%),植入裸鼠体内28天,平均瘤重3.47g。转染组细胞Cx43mRNA表达升高,通讯功能增强,细胞生长慢,在软琼脂内集落形成率和在裸鼠体内生长速度明显低于对照组,抑制率分别为90%和75%。结论间隙连接基因Cx43表达对肺癌细胞有抑瘤作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 间隙连接基因 CX43 基因表达
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大熊猫辅酶Q-细胞色素C氧化还原酶的辅酶Q连接蛋白基因cDNA的克隆及序列比较 被引量:18
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作者 侯万儒 陈瑜 +2 位作者 彭正松 吴夏 唐宗祥 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期190-194,共5页
In order to provide scientific material for promulgating the giant panda(Ailuropoda melanoleuca)nucleus gene inheritance characteristic,for the formulation gene protection countermeasure and to put resources to ration... In order to provide scientific material for promulgating the giant panda(Ailuropoda melanoleuca)nucleus gene inheritance characteristic,for the formulation gene protection countermeasure and to put resources to rational use,the expression sequence of ubiquinol-cytochrome c reductase complex ubiquinone-binding protein(QP-C)gene from the giant panda was analyzed.The result indicates that the cDNA sequence length is 335 bp and contains a 246-nucleotide open reading frame encoding 81 amino acid residues.The pI of the protein is 10.50 and its mole cular weight is 9.60×103 Da.Topology prediction shows these QP-C proteins contain a N-glycosylation site,a potential protein kinase C phosphorylation site and a Casein kinase II phosphorylation site.Comparing the cDNA sequence with amino acid sequence of giant panda’s QP-C gene and cDNA sequence with the amino acid sequence of other species’ QP-C gene shows high similarity.The similarity is 82.3% to 95.2% and 81.5% to 95.1%. 展开更多
关键词 大熊猫 RT-PCR 辅酶Q连接蛋白基因 克隆
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向日葵E3泛素连接酶基因的分析定位和表达鉴定 被引量:2
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作者 张艳芳 孙瑞芬 +3 位作者 郭树春 于海峰 乔慧蕾 李素萍 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期211-218,共8页
该研究利用前期获得的向日葵耐盐相关基因E3泛素连接酶基因序列(HERC2),构建瞬时表达载体Cam-35S-HERC2-GFP,采用基因枪法转化洋葱表皮细胞进行亚细胞定位;采用RT-PCR技术,分析盐胁迫下HERC2在耐盐品种P50和盐敏感品种P29根、下胚轴和... 该研究利用前期获得的向日葵耐盐相关基因E3泛素连接酶基因序列(HERC2),构建瞬时表达载体Cam-35S-HERC2-GFP,采用基因枪法转化洋葱表皮细胞进行亚细胞定位;采用RT-PCR技术,分析盐胁迫下HERC2在耐盐品种P50和盐敏感品种P29根、下胚轴和叶中的表达差异;构建HERC2植物表达载体pPZP221-HERC2,采用农杆菌介导法将HERC2导入烟草,进行耐盐功能验证。结果表明:(1)HERC2蛋白定位在细胞膜、细胞质和细胞核中。(2)受到NaCl胁迫后,HERC2基因在耐盐品种P50和盐敏感品种P29中均上调表达,但耐盐品种中的表达量较高。(3)HERC2基因的表达,能够提高转基因烟草的耐盐性。该研究结果为进一步解析向日葵对盐胁迫的响应机制,以及耐盐新品种的选育奠定了基础。 展开更多
关键词 向日葵 E3泛素连接基因HERC2 亚细胞定位 表达分析 耐盐功能验证
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间隙连接蛋白基因与遗传性聋的相关性研究 被引量:9
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作者 高为华 柯肖枚 +2 位作者 刘玉和 朱平 潘凯枫 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第6期344-348,共5页
目的 分析中国人无综合征耳聋的间隙连接蛋白 (Connexin31,Cx31)基因突变及突变频率和特性 ,从分子水平探讨该病的发病机理。方法 收集中国人 4 7例无综合征耳聋家系先证者 ,38例散发的无综合征耳聋患者以及 10 0例健康对照 ,应用聚... 目的 分析中国人无综合征耳聋的间隙连接蛋白 (Connexin31,Cx31)基因突变及突变频率和特性 ,从分子水平探讨该病的发病机理。方法 收集中国人 4 7例无综合征耳聋家系先证者 ,38例散发的无综合征耳聋患者以及 10 0例健康对照 ,应用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)扩增Cx31基因编码区片段 ,通过变性高效液相色谱法 (denaturinghigh performanceliquidchromatography ,DHPLC)筛查突变 ,经DNA测序证实突变。结果 Cx31基因编码区 798C→T杂合突变在耳聋患者和健康对照组发生率分别为 14 1% (12 / 85 )和 1% (1/ 10 0 ) ,两者间差异具有非常显著性意义 (P <0 0 1)。在一个常染色体显性无综合征耳聋家系中的 2例患者发现Cx31基因编码区 5 80G→A杂合突变 ,导致A194T的错义突变 ,家系中听力正常者及健康对照无此突变。在 1例散发无综合征耳聋患者Cx31基因的编码区 ,发现 2 5 0G→A杂合突变。此外 ,本科题组以往已经对本实验中的耳聋家系及散发耳聋患者和对照筛查了Cx2 6基因突变 ,并发现 2个家系存在Cx2 6基因突变。但本实验在这 2个Cx2 6基因突变引起的无综合征耳聋家系未筛查到Cx31基因突变。而Cx31基因突变者也不存在Cx2 6基因突变。结论 Cx31基因与无综合征耳聋相关 。 展开更多
关键词 间隙连接蛋白基因 遗传性聋 基因突变 发病机理
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水稻泛素连接酶基因OsHUB2实时荧光定量PCR方法的建立 被引量:1
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作者 何炜 朱永生 +6 位作者 连玲 周平 蔡秋华 王颖姮 谢鸿光 张建福 谢华安 《福建农业学报》 CAS 2014年第7期641-645,共5页
在已获得水稻泛素连接酶基因OsHUB2过表达转基因植株的基础上,根据OsHUB2基因序列设计3对引物,分别为OsHUB2-1、OsHUB2-2、OsHUB2-3,通过RT-PCR筛选条带特异单一的引物,real time PCR(qRT-PCR)方法验证最适合检测OsHUB2的反应条件。结... 在已获得水稻泛素连接酶基因OsHUB2过表达转基因植株的基础上,根据OsHUB2基因序列设计3对引物,分别为OsHUB2-1、OsHUB2-2、OsHUB2-3,通过RT-PCR筛选条带特异单一的引物,real time PCR(qRT-PCR)方法验证最适合检测OsHUB2的反应条件。结果表明OsHUB2-F3R3扩增的PCR产物特异性最强,扩增曲线及熔解曲线等指标都在理想范围内,同时该引物能很好地区分对照及转基因材料,进而筛选出OsHUB2基因上调表达的转基因植株。Realtime体系的建立与优化为今后进一步研究水稻泛素连接酶基因OsHUB2的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 泛素连接基因 荧光定量PCR
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水牛缝隙连接蛋白43基因克隆及表达 被引量:2
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作者 林浪 龚云 +5 位作者 王梦 屈春凤 黄时海 雷小灿 石德顺 李湘萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期1-7,共7页
本研究克隆了水牛缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)基因序列,并运用生物信息学方法对其核苷酸序列的保守性和氨基酸的理化性质、蛋白质结构进行了系统分析,对Cx43基因在水牛不同组织和不同发育阶段卵泡中的表达差异进行了检测。结果表... 本研究克隆了水牛缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)基因序列,并运用生物信息学方法对其核苷酸序列的保守性和氨基酸的理化性质、蛋白质结构进行了系统分析,对Cx43基因在水牛不同组织和不同发育阶段卵泡中的表达差异进行了检测。结果表明,应用RT-PCR技术克隆获得了水牛Cx43基因序列,其中编码区全长1152 bp,编码383个氨基酸,蛋白质理论分子质量43.13 ku,等电点为8.88。多重序列比对结果显示,水牛Cx43核苷酸序列与牛、羊、猪、马和人相应序列的同源性分别为99%、98%、94%、93%和92%,系统进化树分析结果推测,Cx43基因在不同物种进化过程中具有高度保守性;对水牛Cx43蛋白的二级和三级结构分析发现,其具有缝隙连接蛋白的特有结构。定量RT-PCR结果显示,Cx43在水牛卵巢组织中相对表达量最高,睾丸、肾脏、心脏和皮肤次之,肝脏和大脑表达量较低。免疫组化结果发现,Cx43蛋白表达随卵泡发育时期的不同而变化,Cx43蛋白随卵泡发育表达逐渐增强。 展开更多
关键词 水牛 缝隙连接蛋白43基因 克隆 表达
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中国北方先天性白内障家系中缝隙连接蛋白基因突变的筛查 被引量:1
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作者 布娟 李宁东 +2 位作者 陈文生 张秀梅 赵堪兴 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第5期925-928,共4页
目的:在一中国人先天性白内障家系中进行缝隙连接蛋白基因(GJA3、GJA8)突变筛查。方法:通过聚合酶链反应(polymerasechainreac-tion,PCR)对一先天性白内障家系中的全部患者进行GJA3基因及GJA8基因外显子的扩增,扩增产物进行直接测序。结... 目的:在一中国人先天性白内障家系中进行缝隙连接蛋白基因(GJA3、GJA8)突变筛查。方法:通过聚合酶链反应(polymerasechainreac-tion,PCR)对一先天性白内障家系中的全部患者进行GJA3基因及GJA8基因外显子的扩增,扩增产物进行直接测序。结果:该家系GJA8基因的外显子及其邻近的内含子未发现任何突变。先证者GJA3基因外显子非编码区发现碱基CA的缺失。结论:缝隙连接蛋白基因为该先天性白内障家系的非致病性基因。 展开更多
关键词 先天性白内障 GJA3基因 GJA8基因 突变 先天性白内障 缝隙连接蛋白 基因突变 中国北方 家系 筛查 基因外显子 连接蛋白基因 聚合酶链反应
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缺失型Duchenne型肌营养不良症基因连接片段的BAC克隆和断裂点的分子结构特征 被引量:1
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作者 盛文利 陈江瑛 +1 位作者 曾进胜 黄如训 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期374-376,共3页
目的 分析缺失型Duchenne型肌营养不良症 (DMD)缺失热区第 46号外显子缺失后形成的连接片段的断裂点的分子结构特点 ,并分析分子结构特点与内含子高不稳定性及外显子缺失的关系。方法 多重引物PCR法鉴定第 46号外显子缺失的DMD患者 ,... 目的 分析缺失型Duchenne型肌营养不良症 (DMD)缺失热区第 46号外显子缺失后形成的连接片段的断裂点的分子结构特点 ,并分析分子结构特点与内含子高不稳定性及外显子缺失的关系。方法 多重引物PCR法鉴定第 46号外显子缺失的DMD患者 ,用BAC载体克隆第 46号外显子缺失后形成的连接片段 ,测定断裂点侧翼的核苷酸序列。结果 第 46号外显子缺失后 ,5’端断裂点位于 45号内含子的AT富含区内。 3’端断裂点位于 46号内含子MER1类重复序列内。连接片段有两个bp的连接同源序列ta ,局部无小的缺失、插入和碱基的置换。第 46号外显子缺失后连接片段的断裂点的二级结构分析示断裂点均位于单链发夹环的非匹配区。结论 第 46号外显子缺失后形成的连接片段 ,其断裂点的共同特征是均位于重复序列 ,这些重复序列形成的单链发夹结构 ,使DNA结构具有不稳定性 ,易于断裂并导致外显子缺失。 展开更多
关键词 缺失型Duchenne型肌营养不良症 基因连接片段 抗肌萎缩蛋白基因 分子结构 基因缺失 BAC克隆 断裂点
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不同妊娠时期人胎盘绒毛细胞连接蛋白基因表达的研究
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作者 张小慧 张建湘 +1 位作者 祝继明 李桂源 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期351-354,共4页
目的 探索妊娠不同时期人胎盘绒毛细胞连接蛋白基因表达的规律及其与细胞分化的关系。 方法 采用多种细胞连接蛋白基因 c DNA探针 ,通过 Northern印迹法 ,研究了不同妊娠时期胎盘绒毛细胞内 Cx基因的表达状态。 结果  1.Cx基因表... 目的 探索妊娠不同时期人胎盘绒毛细胞连接蛋白基因表达的规律及其与细胞分化的关系。 方法 采用多种细胞连接蛋白基因 c DNA探针 ,通过 Northern印迹法 ,研究了不同妊娠时期胎盘绒毛细胞内 Cx基因的表达状态。 结果  1.Cx基因表达有器官特异性 ,绒毛细胞中 Cx43、Cx32及 Cx40表达 ,而 Cx31.1、Cx33、Cx37、Cx46不表达 ;2 .在不同发育阶段的胎盘绒毛中 ,Cx43、Cx32、Cx40的表达水平与周龄呈各自特点的曲线关系 ;3.Cx基因的表达与绒毛细胞的分化及绒毛的形成过程基本一致。 结论 某些 Cx基因在调节绒毛细胞分化。 展开更多
关键词 连接蛋白基因 基因表达 妊娠期 胎盘 绒毛细胞
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非同源末端连接修复通路DNA-PKcs基因在胶质瘤中表达及其机制研究 被引量:1
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作者 庄志祥 沈丽琴 +1 位作者 张舒羽 邱鹏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期216-219,共4页
目的:研究DNA双链断裂损伤修复通路主要成员Ku70、Ku80、ERCC4、Lig4和DNA-PKcs基因在人脑胶质瘤中的mRNA表达及其与肿瘤发生的关系。方法:采用SYBR Green实时定量PCR技术检测36例人原发脑胶质瘤组织和12例正常脑组织中的Ku70、Ku80、ER... 目的:研究DNA双链断裂损伤修复通路主要成员Ku70、Ku80、ERCC4、Lig4和DNA-PKcs基因在人脑胶质瘤中的mRNA表达及其与肿瘤发生的关系。方法:采用SYBR Green实时定量PCR技术检测36例人原发脑胶质瘤组织和12例正常脑组织中的Ku70、Ku80、ERCC4、Lig4和DNA-PKcs的mRNA水平。用亚硫酸盐处理基因组DNA后,采用甲基化特异的聚合酶链式反应(MSP)检测正常脑组织和胶质瘤组织中DNA-PKcs基因的甲基化水平变化。结果:与正常脑组织相比,Ku70、Ku80、ERCC4、Lig4基因表达量在脑胶质瘤和正常脑组织中无显著性变化(P>0.05),DNA-PKcs基因在脑胶质瘤中表达显性著上调(P=0.002)。DNA-PKcs基因在脑胶质瘤组织中表达量随胶质瘤恶性程度升高而增加。DNA-PKcs基因启动子甲基化程度在正常组织中高于肿瘤组织,表明甲基化程度的减少是引起胶质瘤中DNA-PKcs基因表达增高的原因。结论:DNA-PKcs基因在人脑胶质瘤中较正常脑组织表达显著上调,并且表达与脑胶质瘤的恶性程度相关。DNA-PKcs基因甲基化程度的降低是引起胶质瘤中DNA-PKcs基因表达增高的原因。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 非同源末端连接修复DNA—PKcs基因 甲基化 实时荧光定量PCR
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连接蛋白基因与肿瘤研究进展 被引量:5
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作者 邱元正 《国外医学(耳鼻咽喉科学分册)》 1999年第5期290-293,共4页
由连接蛋白(connexin,Cx)构成的细胞间隙连接(gap junction)是多细胞动物最普遍、最奇特的一种细胞连接,它参与离子和其它小分子信号物质的转运。间隙连接细胞间通讯(gap junctioninter... 由连接蛋白(connexin,Cx)构成的细胞间隙连接(gap junction)是多细胞动物最普遍、最奇特的一种细胞连接,它参与离子和其它小分子信号物质的转运。间隙连接细胞间通讯(gap junctionintercellurarcommunication,GJIC)对细胞的生长、增殖和分化起重要调控作用,它的改变与肿瘤的发生密切相关。本文就连接蛋白基因在肿瘤中的表达与调控以及在肿瘤抑制、肿瘤转移、肿瘤防治等方面作一综述。 展开更多
关键词 肿瘤 连接蛋白基因 细胞间隙连接
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慢病毒载体介导人缝隙连接蛋白43基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
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作者 林世荣 陈良龙 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2008年第2期107-110,共4页
目的构建带有缝隙连接蛋白43基因的慢病毒载体,并实现该基因在大鼠骨髓间质干细胞中的表达。方法通过逆转录聚合酶链反应获得人缝隙连接蛋白43基因,利用infusion技术重组构建慢病毒载体质粒FUGW-缝隙连接蛋白43,在脂质体介导下与包装质... 目的构建带有缝隙连接蛋白43基因的慢病毒载体,并实现该基因在大鼠骨髓间质干细胞中的表达。方法通过逆转录聚合酶链反应获得人缝隙连接蛋白43基因,利用infusion技术重组构建慢病毒载体质粒FUGW-缝隙连接蛋白43,在脂质体介导下与包装质粒和包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒。所获慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后,在荧光显微镜下观察缝隙连接蛋白43蛋白表达情况。结果所获缝隙连接蛋白43基因经测序后与GeneBank报道序列完全一致;重组慢病毒载体质粒FUGW-缝隙连接蛋白43经鉴定正确;三质粒共转染293T细胞成功,收集、浓缩病毒后测定其滴度为1×1011TU/L;感染大鼠骨髓间充质干细胞后荧光显微镜观察到胞膜位置点线状荧光分布。结论成功构建带有缝隙连接蛋白43基因的慢病毒载体并实现在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达,为间充质干细胞移植治疗心肌梗死的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 内科学 慢病毒载体 缝隙连接蛋白43基因 绿色荧光蛋白 骨髓间充质干细胞
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细胞间隙连接蛋白43基因在斑马鱼牙齿早期发育中的表达 被引量:3
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作者 徐智云 刘鑫 +1 位作者 黄兴 杨德琴 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期347-351,共5页
目的探讨细胞间隙连接蛋白43(cx43)基因在斑马鱼早期胚胎中的表达模式,为进一步研究其在牙齿发育过程中的功能奠定基础。方法提取受精后72 h的斑马鱼胚胎总RNA,逆转录合成c DNA,特异性扩增cx43基因片段,连接到PGEMT载体并判断连接方向,... 目的探讨细胞间隙连接蛋白43(cx43)基因在斑马鱼早期胚胎中的表达模式,为进一步研究其在牙齿发育过程中的功能奠定基础。方法提取受精后72 h的斑马鱼胚胎总RNA,逆转录合成c DNA,特异性扩增cx43基因片段,连接到PGEMT载体并判断连接方向,选择相应的RNA聚合酶体外转录,合成地高辛标记的cx43基因反义m RNA探针。运用全时相胚胎原位杂交技术检测斑马鱼胚胎发育早期cx43基因在牙齿发育部位的表达分布,茜素红染色法比较cx43原位杂交表达区域与咽齿解剖部位的关系。结果获得了cx43基因的反义m RNA探针。cx43基因在斑马鱼受精后各个时期咽弓牙齿相应部位均可见到强棕褐色阳性信号。受精后9 d时cx43原位杂交表达部位与咽齿解剖部位基本重叠一致。结论 cx43基因参与牙胚发育和矿化过程,且主要在矿化晚期发挥关键调控作用。 展开更多
关键词 细胞间隙连接蛋白43基因 原位杂交 斑马鱼
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CUG连接蛋白1基因在前列腺癌的表达及其功能研究 被引量:3
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作者 段宝民 逯锦涛 +2 位作者 王卫民 李兵 牛保华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期539-543,共5页
目的:探讨CUG连接蛋白1(CUG-Binding Protein 1,CUGBP1)基因在前列腺癌的表达及其蛋白功能。方法:用定量RT-PCR法在前列腺癌组织和癌旁组织中检测CUGBP的mRNA水平。Western blot法检测4种前列腺癌细胞株(22RV1,PC-3,DU145,LNCaP clone F... 目的:探讨CUG连接蛋白1(CUG-Binding Protein 1,CUGBP1)基因在前列腺癌的表达及其蛋白功能。方法:用定量RT-PCR法在前列腺癌组织和癌旁组织中检测CUGBP的mRNA水平。Western blot法检测4种前列腺癌细胞株(22RV1,PC-3,DU145,LNCaP clone FGC)中CUGBP1的表达。利用RNA干扰技术检测PC-3细胞在CUGBP1基因沉默后细胞的增殖与凋亡状态。利用定量RT-PCR法确定其下游调控基因的mRNA水平。结果:CUGBP1在PC-3和22RV1细胞株中高表达。CUGBP1的mRNA在前列腺癌组织中较癌旁组织显著增高。CUGBP1基因shRNA导致CUGBP1基因沉默后抑制了PC-3细胞株的增殖并诱导其凋亡;同时,使前列腺癌细胞在细胞周期上发生G1期阻滞。CUGBP1基因被干扰以后,PC-3细胞株中CDKN1A的mRNA水平发生明显上调,同时BCL2、PCNA、MCM2和MCM3基因的mRNA水平发生明显下调。结论:CUGBP1基因和前列腺癌相关。CUGBP1基因可能通过上调/下调下游基因来调节前列腺癌细胞的凋亡,改变细胞的增殖和细胞周期。 展开更多
关键词 前列腺癌 CUG连接蛋白1基因 增殖 凋亡
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产黄青霉苯乙酰CoA连接酶基因phl的克隆表达及其纯化酶的性质分析
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作者 崔超 杨金晓 +3 位作者 张春晓 王丽丽 陈小波 冯惠勇 《河北工业科技》 CAS 2011年第2期94-99,共6页
苯乙酸与CoA反应,生成苯乙酰CoA,利用RT-PCR方法成功地从产黄青霉中扩增得到1737 bp不含内含子的phl基因,并将其克隆到pET30a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中低温诱导表达。经SDS-PAGE检测分析,获得与预期大小(62.1 kDa)一致的... 苯乙酸与CoA反应,生成苯乙酰CoA,利用RT-PCR方法成功地从产黄青霉中扩增得到1737 bp不含内含子的phl基因,并将其克隆到pET30a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中低温诱导表达。经SDS-PAGE检测分析,获得与预期大小(62.1 kDa)一致的蛋白表达特异条带。通过Ni-NTA亲和层析柱纯化了重组酶,经检测苯乙酸的吸收,表明纯化酶对苯乙酸和CoA有明显的催化活性,酶活为1 680 U/mL。研究表明,纯化酶PCL最适宜温度为30℃,有一定的热稳定性,最适宜pH值为8.0,pH值为7.0~8.5时酶比较稳定。 展开更多
关键词 苯乙酰CoA连接基因(phl) 基因克隆 表达 纯化 产黄青霉 RT-PCR
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毛竹4-香豆酸辅酶A连接酶基因家族鉴定及表达分析 被引量:8
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作者 杨克彬 单雪萌 +2 位作者 史晶晶 朱成磊 高志民 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期72-82,共11页
4-香豆酸:辅酶A连接酶(4-coumarate:CoA ligase,4CL)基因是植物木质素、类黄酮和其他次生代谢产物合成的关键基因之一。为探究毛竹(Phyllostachys edulis)4CL基因的分子特征和表达模式,利用生物信息学方法对毛竹4CL同源基因进行鉴定,并... 4-香豆酸:辅酶A连接酶(4-coumarate:CoA ligase,4CL)基因是植物木质素、类黄酮和其他次生代谢产物合成的关键基因之一。为探究毛竹(Phyllostachys edulis)4CL基因的分子特征和表达模式,利用生物信息学方法对毛竹4CL同源基因进行鉴定,并对其基因结构、保守结构域和系统进化等进行全面分析,应用实时荧光定量PCR(qPCR)技术对基因表达模式进行研究。结果表明,在毛竹中共鉴定出15个4CL同源基因(Pe4CL1~Pe4CL15),均含有内含子,数量为2~5个。Pe4CLs编码蛋白长度为520~671 aa,分子量为55~72 kDa。Pe4CLs均含有2个4CL家族高度保守的结构域,保守基序数量为6~10个,且均定位在过氧化酶体上。系统进化分析显示,毛竹、水稻、二穗短柄草、拟南芥、大豆和毛果杨的4CL家族成员分为2个亚家族(A和B),其中亚家族A又分为3个类型(TypeⅠ~TypeⅢ)。基于转录组数据的基因组织特异性表达分析发现,15个Pe4CLs在毛竹不同组织和不同生长时期中的表达量均存在明显差异。qPCR结果显示,除Pe4CL6的表达下调外,其他基因均随着竹笋高度增加呈上调趋势。组织化学染色结果表明,随着笋高度的增加,其木质化程度加深,与大多数Pe4CLs表达上调相一致。本研究为进一步探究毛竹中4CL的功能提供了参考依据。 展开更多
关键词 毛竹 4-香豆酸:辅酶A连接基因 表达分析 木质素
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黑龙江鲤肌肉发育中miRNA对间隙连接蛋白基因(Cx43)的调控
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作者 艾显辉 赵金艳 +3 位作者 于钊 闫学春 田丽红 梁洋 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期759-766,共8页
鲤鱼是世界上养殖最广泛的淡水鱼类之一,其肌肉具有高蛋白、低脂肪等特点,具有重要的经济价值。前期对鲤鱼肌肉特异的微小RNA(miRNA)文库分析发现,miR-1和miR-206在鲤鱼肌肉中均高水平存在,但其对鲤鱼肌肉发育的调节作用尚不完全清楚。... 鲤鱼是世界上养殖最广泛的淡水鱼类之一,其肌肉具有高蛋白、低脂肪等特点,具有重要的经济价值。前期对鲤鱼肌肉特异的微小RNA(miRNA)文库分析发现,miR-1和miR-206在鲤鱼肌肉中均高水平存在,但其对鲤鱼肌肉发育的调节作用尚不完全清楚。以黑龙江鲤为试验材料,通过生物信息学预测肌肉生长相关的间隙连接蛋白基因(Cx43)可能是miR-1和miR-206的靶基因。因此利用荧光素酶报告系统以及原位杂交等方法探究miR-1和miR-206对其的调控机制。试验结果表明,miR-1和miR-206均能下调Cx43启动子报告基因,其中miR-206作用更明显。整体原位杂交检测Cx43基因在鲤鱼胚胎期表达情况显示,鲤鱼受精6 h后Cx43基因开始表达,表达量随胚胎发育呈上升趋势,受精后24 h体节表达最高,此后逐渐降低,暗示Cx43基因在鲤鱼肌肉发育早期发挥重要作用。该研究为从分子生物学水平进行鲤鱼的遗传育种,优化黑龙江鲤品质,提高生产性能奠定基础。 展开更多
关键词 微小RNA-206/微小RNA-1 间隙连接蛋白基因Cx43 肌肉发育 基因分析
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