星形胶质细胞中连接蛋白43在肌萎缩侧索硬化中促发运动神经元毒性

肌萎缩侧索硬化(ALS)是一种神经退行性疾病,其特征是中枢神经系统中运动神经元的进行性丧失。星形胶质细胞在ALS的疾病进程中起重要作用。星形胶质细胞通过缝隙连接蛋白家族,如连接蛋白(Connexin,Cx)互相连接。Cx43是中枢神经系统中保持稳态的主要星形胶质细胞连接蛋白。在病理状态下,连接蛋白的表达和功能发生改变。本文发现,在ALS中Cx43异常增高是星形胶质细胞介导的毒性作用机制之一。笔者观察到,在ALS SOD1^(G93A)小鼠模型的疾病进程中,Cx43表达进行性增高。尤其是,在ALS患者的运动皮质和脊髓也能检测到Cx43增高。从SOD1^(G93A)小鼠中分离的星形胶质细胞,与人诱导多能干细胞衍生的星形胶质细胞一样,都检测到Cx43蛋白增高,且为独立于神经元共培养的内源性现象。与对照的星形胶质细胞过表达的野生型SOD1(SOD1^(WT))相比,SOD1^(G93A)星形胶质细胞中增高的Cx43表达可产生重要的功能性影响。本文发现,SOD1^(G93A)星形胶质细胞表现出缝隙连接偶联增强,半通道介导活动升高,细胞内钙离子水平上升。最后,本文检测Cx43蛋白表达升高对MN生存的影响,发现应用pan-Cx43阻滞剂和Cx43半通道阻滞剂均对与SOD1^(G93A)星形胶质细胞共培养的MNs有神经保护作用。这些新发现展示出未被认知的Cx43在ALS相关的运动神经元丢失中所起作用。

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障精细结构AQP4、Cx43的影响

目的研究左归降糖解郁方(黄芪、贯叶连翘、姜黄、熟地黄、山茱萸等)对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障精细结构水通道蛋白AQP4和缝隙连接蛋白Cx43表达的影响。方法采用高脂乳剂灌胃、尾静脉注射链脲佐菌素、28 d慢性应激联合的方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为5组:模型组,阳性药(二甲双胍+盐酸氟西汀)组,左归降糖解郁方高、中、低剂量组,以正常大鼠为空白组,灌胃给药4周。给药后,采用Morris水迷宫测试大鼠空间学习能力,HE染色法观察海马组织病理学,免疫组化法检测海马血脑屏障精细结构AQP4和Cx43表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),海马细胞存在明显损伤,AQP4和Cx43表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,阳性药组和左归降糖解郁方高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短,差异有显著统计学意义(P<0.01),海马细胞形态趋于正常,且AQP4和Cx43表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠的治疗作用可能与调控海马血脑屏障精细结构AQP4和Cx43表达有关。

益水生新饮对自发性高血压大鼠TGF-β1 CTGF FN信号通路的影响

目的:观察益水生新饮对12周龄自发性高血压大鼠(SHR)肾脏组织中TGF-β1、CTGF、FN信号通路的影响,揭示益水生新饮对自发性高血压大鼠肾脏的保护及其作用靶点。方法:将50只12周龄雄性SHR大鼠随机分为:益水生新饮低剂量组[35.55 g/(kg·d)简称低剂量组]、益水生新饮中剂量组[71.10g/(kg·d)简称中剂量组]、益水生新饮高剂量组[142.20g/(kg·d)简称高剂量组]、苯那普利组[10mg/(kg·d)]、模型组,每组10只,模型组生理盐水灌胃,每天1次,共8周。8周后处死大鼠,检测各组大鼠肾组织中TGF—β1、CTGF、FN mRNA和蛋白的检测。观察各组大鼠肾脏病理改变和血压改变。结果:(1)与模型组相比,益水生新饮组和苯那普利组血压明显降低,差异有显著性(P<0.01),其中高剂量组与苯那普利组相比差异有显著性(P<0.01);(2)病理检查提示,与益水生新饮组和苯那普利组相比,模型组系膜细胞及基质增生病变明显加快。(3)与模型组相比,益水生新饮组及苯那普利组肾脏组织中TGF-β1、CTGF及FN表达均下调,差异有显著性(P<0.05,P<0.01),其中,益水生新饮高剂量组与苯那普利组相比,CTGF下调的差异有显著性(P<0.01)。结论:益水生新饮主要通过抑制肾脏中TGF-β1、CTGF及FN信号通路的表达,从而减轻SHR大鼠早期肾脏肾小球硬化和肾间质纤维化的程度,起到延缓高血压的进展和肾脏保护的作用。

手术病人血清C_3、C_4、CRP、Fn变化及其临床意义

57例腹腔肿瘤病人术后1周内．血清C3、C4浓度无明显变化，（反应蛋白）CRP浓度升高，纤维连接蛋白Fn浓度降低；1周后C3、C4浓度升高，CRP、Fn浓度恢复术前水平。若术后并发感染者上述变化更为明显，感染治愈后恢复；持续不恢复者预后差。说明术后上述指标，是CRP和Fn，对发现深部感染、脓毒血症预后判断有一定价值。

缺血后适应对非梗死相关动脉细胞凋亡及相关基因表达影响的研究

目的:观察缺血后适应对非梗死相关动脉组织细胞凋亡及其相关基因的影响。方法:制备兔高脂血症心肌缺血再灌注模型,实验动物随机分为三组(每组10只):A组:假手术组。B组:心肌缺血再灌注组。C组:心肌缺血后适应再灌注组。通过Tunel荧光染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测比较各组非梗死相关动脉组织细胞凋亡程度以及血管紧张素II 1型受体(ATl)、缝隙连接蛋内43 (Cx43)、P微管蛋白((3-tubulin)等相关基因的差异。结果:心肌缺血再灌注1周后,非梗死相关动脉出现动脉粥样硬化斑块。非梗死相关动脉组织Timel荧光染色分析显示,与假手术组相比,急性心肌缺血再灌注组的凋亡细胞增加[(8.14±2.05)%vs.(46.11±5.92)%,P<0.001]。与急性心肌缺血再灌注组相比,急性心肌缺血后适应再灌注组的凋亡细胞减少[(46. 11±5. 92)%vs.(28. 36±9. 41)%,P<0. 001 ]。非梗死相关动脉组织qRT-PCR检测显示,与假手术组相比,急性心肌缺血再灌注组的[AT1( 1.002± 0.068)vs.(30.576±1.760),P<0.01]、CX43(1.009±0. 133)(15. 171±1.736),P<0.01)、p-tubulin 基因[(1.003±0.083)vs.(1.361±0.042),P<0.01]上调。与急性心肌缺血再灌注组相比,急性心肌缺血后适应再灌注组[AT1(30.576±1.760)vs.(4.697±0.227),P<0.01]、CX43(15.171±1.736)vs.(2.267± 0.312),P<0.01]、p-tubulin 基因下调[(1.36±0.042)vs.(1.083±0.098),P<0.01]。结论:心肌缺血再灌注1周后,非梗死相关动脉出现动脉粥样硬化斑块,伴随凋亡细胞增加和AT1、CX43、P-tubulin基因上调。缺血后适应可减少非梗死相关动脉凋亡细胞数量并可使AT1、CX43、P-tubulin基因下调,从而抑制非梗死相关动脉病变进展。

丁氏溃结灌肠液对DSS诱导的溃疡性结肠炎大鼠肠道屏障的保护作用

目的:研究丁氏溃结灌肠液对葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)大鼠机械屏障、免疫屏障的影响,探讨其可能的作用机制。方法 :50只SD大鼠采用DSS法建立急性期溃疡性结肠炎模型,造模成功后随机分为5组,分别为模型组、美沙拉秦灌肠液组和溃结灌肠液低、中、高剂量组,每组10只,另取10只大鼠作为空白对照组,分别给予相应药物或生理盐水灌肠14d。末次给药结束后,各组大鼠禁食不禁水24h,麻醉,取结肠标本观察肠黏膜变化情况,蛋白质印迹(Western Blot)法检测大鼠结肠组织紧密连接蛋白(occludin)含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清免疫球蛋白A(Ig A)水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠occludin含量、Ig A水平显著降低(P<0.01);经美沙拉秦灌肠液和丁氏溃结灌肠液治疗后,大鼠结肠组织occludin含量、Ig A水平升高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),尤以美沙拉秦灌肠液与溃结灌肠液高、中剂量组升高更为明显,而溃结灌肠液中、高剂量组与美沙拉秦灌肠液组治疗后上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丁氏溃结灌肠液可以降低溃疡性结肠炎大鼠肠道通透性,对肠黏膜屏障有一定的保护作用,不同剂量的溃结灌肠液对肠黏膜屏障保护效果不同,中高剂量较低剂量组作用明显。

严重腹部创伤患者的全肠外营养支持

严重腹部创伤患者３２例，平均腹部创伤指数（ＡＴＩ）达２０分，均接受全肠外营养（ＴＰＮ）支持，提供非蛋白质热能１３４～１７６ｋＪ·ｋｇ－１／ｄ，氮０．２１～０．３０ｇ·ｋｇ－１／ｄ。平均使用ＴＰＮ２６．５ｄ，其中胰十二指肠损伤患者应用ＴＰＮ１６ｄ，腹部...

胎纤蛋白与支原体胎盘炎关系研究

目的观察支原体宫颈炎孕妇宫颈分泌物中FFN变化,求证FFN对胎盘支原体炎的诊断价值。方法将受试者分成两组,宫颈支原体阳性组78例、正常孕妇组62例。对两组孕妇做宫颈分泌物(FFN)定性检查,分别计算阳性率;对两组孕妇做产后胎盘病理检验,分别计算支原体绒毛膜羊膜炎发生率;对宫颈支原体阳性组做产后胎膜支原体培养,计算支原体性胎盘炎的发生率。结果宫颈支原体感染与胎盘支原体炎,差异无显著性(P>0.05),宫颈分泌物FFN阳性,胎盘支原体炎发生率升高,差异有显著性(P<0.05)。结论 FFN检测可以预测胎盘支原体炎。

加味真武汤对肾间质纤维化大鼠TGF-β及FN表达的影响

目的:探讨加味真武汤对肾间质纤维化大鼠转化生长因子(TGF-β)及纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组及治疗组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)模型,术后7,14,21 d分别处死大鼠,测定肾脏指数、血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN);肾组织HE及Masson染色,观察肾脏病变;免疫组化法比较各组TGF-β及FN的表达。结果:术后随时间的延长,模型组和治疗组大鼠可见明显的肾间质纤维化改变,肾间质TGF-β,FN的表达明显高于假手术组(P<0.05)。治疗组大鼠肾间质纤维化程度及TGF-β,FN的表达均低于模型组(P<0.05)。结论:加味真武汤可降低UUO模型大鼠血Cr,BUN水平,抑制TGF-β表达,减少FN形成,对肾间质纤维化有积极的治疗意义。

福辛普利对高血压大鼠的心肌保护作用

目的:探讨高血压大鼠心肌组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和缝隙连接蛋白43(CX43)的表达,并运用福辛普利进行干预,研究其心肌保护作用。方法:32只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组(n=8)、假手术组(n=8)以及模型组(n=16),模型组以二肾一夹的方法建立,模型建立成功后,随机分为福辛普利治疗组(n=8)和模型对照组(n=8)。治疗组给予福辛普利按照10mg/(kg·d)剂量灌胃,空白对照组、假手术组以及模型对照组给予相同体积的生理盐水灌胃,每日1次。给药8周后,麻醉处死动物,称体重(BW)、心脏(HW)和左心室(含室间隔LVW)重量,计算HW/BW为心脏指数(mg/g),LVW/BW为左心室指数(mg/g),SP免疫组化法检测心室肌组织中IGF-1、缝隙连接蛋白43(CX43)的表达。结果:与空白对照组相比,假手术组血压、心脏指数、左心室指数、IGF-1蛋白表达率、CX43含量变化不明显,模型组则明显升高(P<0.05);与模型对照组相比,福辛普利治疗组上述指标则改善明显(P<0.05)。结论:肾血管性高血压大鼠心室肌组织IGF-1蛋白表达增多,CX43蛋白表达增多,心脏指数及左心室指数增大,运用血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利干预后,IGF-1蛋白表达率、CX43蛋白表达减少,心功能有所改善,提示福辛普利可能通过抑制IGF-1表达、降低CX43表达来改善心功能。