连栀矾溶液促进大鼠肛周脓肿创面愈合作用研究

目的：探讨连栀矾溶液促进大鼠感染肛周脓肿创面愈合的作用。方法：72只SD大鼠随机分成正常组、模型组、对照组,治疗组,给予药物干预后,观察创面愈合形态学和愈合率指标;并于第3、6、9、12 d取创面肉芽组织,比较分析治疗组和对照组的创面肉芽组织的组织病理和免疫生化病理学指标;同时采用酶联免疫检测技术检测对照组对大鼠血清中组胺（HIS）、5-羟色胺（5-HT）、前列腺素E2（PGE2）水平的影响。结果：连栀矾溶液可以促进创面愈合并缩短愈合时间,降低炎性反应;在创面愈合早期（6~9d）,促进新生毛细血管和成纤维细胞的生成（P〈0.05）;同时可明显降低大鼠血清中HIS、5-HT的水平（P〈0.05）。结论：连栀矾溶液明显促进大鼠肛周脓肿创面愈合,其作用机制与他明显促进创面肉芽组织中新生毛细血管、成纤维细胞生成以及有效降低大鼠血清中HIS、5-HT等炎症因子的水平相关。

连栀矾溶液HPLC指纹图谱研究

目的:建立中药复方制剂连栀矾溶液的HPLC指纹图谱,为该制剂的质量控制提供参考。方法:采用Phenomenex luna C_(18)色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),以0. 1%三乙胺0. 2%磷酸水溶液-甲醇-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为1. 0 ml·min^(-1),检测波长为230 nm,柱温为30℃,建立连栀矾溶液HPLC指纹图谱,运用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)软件对10批制剂进行相似度评价,通过对照品保留时间及光谱图的比对,对连栀矾溶液中4种化学成分进行指认,通过连栀矾溶液组方单味药和复方的HPLC比较,初步分析复方中化学成分的来源和归属。结果:建立的连栀矾溶液HPLC指纹图谱专属性、精密度、重复性和稳定性均良好; 10批连栀矾溶液指纹图谱与对照指纹图谱相似度值在0. 994～1. 000,相似度良好;与组方单位药材对比,连栀矾溶液指纹图谱中大部分色谱峰来源于黄连。结论:建立的连栀矾溶液HPLC指纹图谱能全面反映连栀矾溶液中多组分的整体特征,可用于连栀矾溶液的质量控制。

连栀矾溶液纱条促进肛周脓肿术后创面愈合疗效观察

目的观察连栀矾溶液纱条对肛裂肛周脓肿术后促进创面愈合的疗效。方法将肛周脓肿术后患者随机分成治疗组和对照组各80例。治疗组采用连栀矾溶液纱条敷于创面,每天便后换药1次;对照组采用凡士林纱条敷于创面,每天便后换药1次,对创面表皮生长速度与创面愈合时间进行对比观察研究。结果治疗组与对照组在创面表皮生长速度和愈合时间方面差异有统计学意义(P<0.01)。结论连栀矾溶液纱条对肛周脓肿术后患者能明显加快创面表皮生长,促进创面愈合,缩短愈合时间。

发酵工艺对连栀矾溶液活性成分及体外抑菌活性的影响

目的:研究发酵前后连栀矾溶液活性成分及体外抑菌活性的变化情况。方法:采用HPLC法测定连栀矾溶液发酵前后活性成分的变化情况;采用肉汤稀释法,以庆大霉素为阳性对照,检测连栀矾溶液发酵前后以及发酵后不同部位对变形杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性和最低抑菌浓度(MIC)。结果:发酵后连栀矾溶液部分色谱峰的峰面积发生显著变化,并有新的色谱峰生成;发酵后的连栀矾溶液抑菌活性明显增强,其苯和氯仿萃取样品几乎无抑菌活性,碱沉部分对3种菌有不同程度的抑菌活性,90%乙醇醇沉部分对金色葡萄球菌具有一定的抑制作用。结论:发酵工艺可显著提高连栀矾溶液的抑菌活性;发酵过程中连栀矾溶液中部分活性成分之间发生相互转化,并生成新的成分,其可能是发酵后抑菌活性增强的物质基础。

HPLC测定连栀矾溶液中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和盐酸小檗碱的含量

目的：建立快速测定连栀矾溶液中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和盐酸小檗碱含量的HPLC方法。方法：色谱柱为Chromstar TM C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为乙腈-含0.1%三乙胺和0.1%甲酸的水溶液（30：70,V/V）;检测波长345 nm,柱温30℃,流速0.8 m L﹒min-1。进样量20μL。结果：连栀矾溶液样品中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和盐酸小檗碱在12 min内达到分离,峰形尖锐对称。盐酸小檗碱在2.82-44.91μg﹒m L-1范围内线性关系良好,平均加样回收率为97.95%。七批次连栀矾溶液中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和盐酸小檗碱含量以盐酸小檗碱计,分别为0.126±0.019,0.167±0.029,0.140±0.018和0.618±0.079 mg﹒m L-1。结论：建立的HPLC方法高效、准确,经济,精密度好,灵敏度高,可用于连栀矾溶液中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和盐酸小檗碱的同时快速测定分析。

玄参汤口服合并连栀矾溶液灌肠治疗肛门坠胀临床观察

目的:观察玄参汤煎汤口服合并连栀矾溶液保留灌肠治疗肛门坠胀的临床疗效。方法:55例肛门坠胀患者予玄参汤煎汤口服合并连栀矾溶液保留灌肠进行综合治疗,观察临床疗效。结果:55例中,痊愈38例,有效15例,无效2例,有效率为96.36%。结论:玄参汤煎汤口服合并连栀矾溶液保留灌肠治疗肛门坠胀疗效显著。

连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎疗效观察

目的探讨连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎的临床疗效。方法选择2010年1月～2012年1月肛肠科慢性溃疡性直肠炎患者144例,随机分为A,B和C 3组,A组为治疗组48例,采用连栀矾溶液加锡类散保留灌肠;B组和C组为对照组,B组48例单独采用锡类散保留灌肠;C组48例,以庆大霉素、甲硝唑注射液保留灌肠。结果 A,B和C 3组临床治愈率分别为77.6%,55.8%和43.2%,总有效率分别为98.9%,71.1%和66.3%,治愈率和总有效率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎的临床疗效明显优于对照组B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎疗效显著。

连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎疗效观察

目的探讨连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎的临床疗效。方法 72例慢性溃疡性直肠炎患者随机分为治疗组和对照组,每组36例,治疗组采用连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗,对照组采用口服柳氮磺吡啶片,庆大霉素、甲硝唑保留灌肠治疗。结果治疗组和对照组临床治愈率分别为61.11%和44.44%,总有效率分别为86.11%和75%,两组病例治疗后治愈率、总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组在改善肛门坠胀感、黏液脓血便等主要临床症状方面优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎疗效显著,患者易于接受,值得临床推广应用。

连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎36例临床观察

目的:观察连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎的临床疗效。方法:72例慢性溃疡性直肠炎患者随机分为治疗组和对照组各36例,治疗组采用连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗,对照组采用口服柳氮磺吡啶片,庆大霉素、甲硝唑保留灌肠治疗。结果:治疗组和对照组临床治愈率分别为61.1%和44.4%,总有效率分别为86.1%和75.0%,两组比较,差异均有统计学意(P<0.05)。治疗组在改善肛门坠胀感、黏液脓血便等主要临床症状方面优于对照组(P<0.05)。结论:连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎疗效显著,患者易于接受。

超声刀疣体切除术联合连栀矾溶液坐浴治疗肛门尖锐湿疣34例临床体会

目的探讨超声刀疣体切除术联合连栀矾溶液坐浴治疗肛门尖锐湿疣的疗效。方法对34例肛门尖锐湿疣患者进行超声刀疣体切除术联合连栀矾溶液坐浴治疗的临床资料作回顾性分析。结果治愈率88.24%、好转率11.76%、复发率5.88%。结论正确选用超声刀疣体切除术联合连栀矾溶液坐浴治疗肛门尖锐湿疣具有治愈率高、出血少、疼痛轻、复发率低等优点。

连栀矾溶液联合康复新液对41例肛漏术后换药的疗效观察

目的观察连栀矾溶液联合康复新液对肛漏术后换药创面愈合的疗效。方法将82例患者随机分成治疗组与对照组各41例。治疗组在拆除浮线前常规给予连栀矾溶液和康复新液冲洗切口,冲洗后切口置连栀矾溶液浸润的纱条填塞切口,对照组使用甲硝唑液常规冲洗切口,冲洗完后切口用盐水纱条填塞。结果治疗组伤口愈合时间(18±8.42)d,对照组伤口愈合时间(20±9.34)d,术后未见肛门失禁、肛门变形,术后半年复发率:治疗组为2.4%,对照组为3.6%,伤口愈合时间超过30 d者:对照组有2例,治疗组有1例(P<0.05)。结论采用连栀矾溶液联合康复新液治疗肛漏能明显促进创面生长与愈合,减轻患者痛苦,避免切口假性愈合,明显减少切口分泌物,缩短疗程。

连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎的效果分析

目的分析连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎的效果。方法慢性溃疡性直肠炎患者124例,随机分为对照组和研究组,对照组62例采用锡类散保留灌肠治疗,研究组62例采用连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗,比较两组临床疗效及临床症状改善情况。结果研究组总有效率90.33%,显著高于对照组70.97%,差异有统计学意义(P<0.05);研究组肛门坠胀感、黏液脓血便等症状改善情况均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论连栀矾溶液加锡类散保留灌肠治疗慢性溃疡性直肠炎疗效显著。

UPLC-MS/MS法测定连栀矾溶液中7种成分的含量

目的:建立超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)测定连栀矾溶液中盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、绿原酸、京尼平、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ7种成分含量的方法。方法:采用Waters HSS T3色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm);以含0.1%甲酸的乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为0.3 mL/min;柱温为35℃;采用正离子的多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果:连栀矾溶液中盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱在0.039～20 ng/mL范围内线性关系良好,绿原酸、京尼平、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ分别在0.490～1 000 ng/mL、1.950～1 000 ng/mL、0.490～500 ng/mL、0.490～500 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.9991),平均加样回收率为92.35%～103.92%,RSD均小于6%(n=6)。结论:该方法专属性强,灵敏度高,不同批次连栀矾溶液含有的生物碱无明显差异,但栀子中的相关成分差异较大,该研究结果可为连栀矾溶液的质量控制提供一定的依据。

直肠滴入连栀矾溶液加康复新液法治疗直肠炎型肛门坠胀的疗效研究

目的:研究用直肠滴入连栀矾溶液加康复新液法治疗直肠炎型肛门坠胀的临床疗效。方法:选取2017年1月至2019年3月期间成都肛肠专科医院收治的84例直肠炎型肛门坠胀患者为研究对象。按照用药方法的不同将其分为治疗组和对照组。采用直肠滴入甲硝唑注射液法对对照组患者进行治疗,采用直肠滴入连栀矾加康复新液法对治疗组患者进行治疗。治疗结束后,对比两组患者的临床疗效和肛门坠胀症状的改善情况。结果:与对照组患者相比,治疗组患者治疗的总有效率较高,治疗后其肛门坠胀症状的评分较低,P<0.05。结论:采用直肠滴入连栀矾溶液加康复新液法治疗直肠炎型肛门坠胀的效果确切,可显著减轻患者肛门坠胀的症状。

连栀矾溶液联合康复新溶液保留灌肠治疗溃疡性结肠炎临床疗效观察

目的:观察连栀矾溶液联合康复新溶液保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的临床疗效。方法:将84例溃疡性结肠炎患者按治疗方法的不同分为2组:治疗组和对照组,每组42例。2组均给予对症、支持和维持水电解质平衡等治疗,并口服美沙拉嗪治疗。在此基础上,治疗组采用连栀矾溶液联合康复新溶液保留灌肠。观察2组临床疗效及不良反应的情况。结果:治疗组完全缓解率、总有效率均明显高于对照组(P<0.05)。2组均未出现不良反应。结论:连栀矾溶液联合康复新溶液保留灌肠是治疗溃疡性结肠炎的有效方法。

连栀矾溶液坐浴联合高频电刀治疗肛门尖锐湿疣临床观察

目的:观察连栀矾溶液坐浴联合高频电刀治疗治疗肛门尖锐湿疣的疗效。方法:将80例肛门尖锐湿疣患者随机分为治疗组和对照组。治疗组:高频电刀切除肛门尖锐湿疣后,连栀矾溶液坐浴1日1次,1次15分钟。对照组:高频电刀切除肛门尖锐湿疣后,温开水坐浴1日1次,1次15分钟。系统治疗两组相同。将术后肛门尖锐湿疣治愈率、肛门疼痛程度、伤口水肿程度、伤口愈合时间作为评价指标。结果:两组治愈率比较,差异无显著性意义(P>0.05),肛门疼痛程度、伤口水肿程度、伤口愈合时间比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:选用连栀矾溶液坐浴联合高频电刀治疗肛门尖锐湿疣具有肛门疼痛程度轻、伤口水肿程度轻、伤口愈合时间短等优点。

连栀矾溶液联合消肿止痛汤坐浴在痔术后应用中的疗效观察

目的:观察连栀矾溶液联合消肿止痛汤坐浴在痔术后应用中的临床疗效。方法:将150例符合条件的混合痔术后患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,各75例。治疗组,连栀矾溶液联合消肿止痛汤坐浴,1日1次,1次15分钟。对照组,消肿止痛汤坐浴,1日1次,1次15分钟。将术后第1、3、5、7天肛门疼痛程度、术后便秘、肛门水肿发生率及创面愈合时间作为评价指标。结果:两组患者在术后第1、3、5、7天肛门疼痛程度、便秘发生率、肛门水肿发生率、创面愈合时间比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:连栀矾溶液联合消肿止痛汤坐浴能有效缓解痔术后患者的疼痛,降低痔疮术后便秘、肛门水肿的发生率,缩短创面愈合时间,推荐使用。

连栀矾溶液不同储存条件下主要活性成分变化研究

目的考察连栀矾溶液在不同储存条件下其所含主要活性成分的含量变化情况,为连栀矾溶液的应用及质量提升提供参考。方法采用Eclipse Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长238 nm,柱温25℃。建立连栀矾溶液化学成分指纹图谱分析方法,用于测定分析其在密封及非密封储存条件下主要活性成分随时间的变化情况。结果所建立并采用的连栀矾溶液HPLC指纹图谱的精密度、稳定性、重复性和加样回收率均符合要求,可用于连栀矾溶液化学成分的分析。2种储存条件下不同时间点的样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度值均大于0.95;利用外标指认法及光谱特征分析共指认出连栀矾溶液中的9种活性成分,其中的生物碱类物质(包括非洲防己碱、表小檗碱、盐酸药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱)在2种储存条件下均无显著变化,但环烯醚萜类化合物京尼平龙胆双糖苷和栀子苷含量显著降低,京尼平含量在前3个月增加但超过3个月后其含量有所降低。推测京尼平龙胆双糖苷及栀子苷能被溶液中的酶转化为京尼平,而京尼平也可能会被微生物产生的其他酶所降解。结论连栀矾溶液在6个月的储存时间内,仍然存在成分的转化,这可能与储存过程中相关酶的作用有关。为提高每批次产品的质量一致性,建议可采用新的终点判断方法并在发酵炮制结束后对其采取酶的灭活和灭菌处理。

基于高通量测序和化学轮廓分析研究黄连在连栀矾溶液发酵炮制中的作用

目的探究黄连Coptidis Rhizoma在连栀矾溶液传统发酵炮制中的作用。方法按照连栀矾溶液传统配方比例,将其拆分为3组配方溶液:连栀矾组(黄连+栀子+白矾)、黄连组(黄连+白矾)和栀子组(栀子+白矾),采用HPLC分析比较3组溶液发酵前后的化学成分变化轮廓,采用Illumina Hiseq高通量测序技术测定并比较发酵溶液中微生物的群落特征。结果传统配方连栀矾经发酵后环烯醚萜类成分发生了较显著的变化(P<0.05),生物碱类成分未发生明显变化,拆分后的黄连组中生物碱类成分和栀子组中环烯醚萜类成分均没有发生明显变化。分别对各组发酵溶液进行测序,根据α多样性分析结果,3组发酵液中真菌多样性为连栀矾组<栀子组<黄连组,真菌的丰富度为栀子组<连栀矾组<黄连组;细菌多样性为连栀矾组<黄连组<栀子组,细菌的丰富度为连栀矾组<栀子组<黄连组。根据β多样性分析结果,3组溶液中的真菌和细菌的群落结构均有明显差异。根据微生物相对丰度分析可知,3组的优势真菌均为子囊菌门、担子菌门和罗兹菌门,不同组间丰度无明显差异;真菌优势属中的孢霉属的丰度在连栀矾组最高,显著高于另外2组(P<0.05),栀子组又显著高于黄连组(P<0.05);韦斯特壳属的丰度在连栀矾组中最低,显著低于黄连组和栀子组(P<0.05),后两者间丰度无明显差异。3组的优势细菌均为变形菌门、厚壁菌门、放线菌门和拟杆菌门,其中连栀矾组中变形菌门的丰度极显著低于黄连组和栀子组(P<0.01),厚壁菌门的丰度在连栀矾组中极显著高于黄连组和栀子组(P<0.01),放线菌门和拟杆菌门的丰度在3组发酵溶液的差异较小;细菌优势菌属中的乳杆菌属在连栀矾组中显著高于黄连组和栀子组(P<0.05),在黄连组中也显著高于栀子组(P<0.05),伯克氏菌属丰度在黄连组和栀子组中无显著差异,都显著高于连栀矾组中的丰度(P<0.05)。结论连栀矾溶液配方中的黄连能提高其中栀子的有效成分的发酵转化,并且是通过对发酵体系中的优势菌属的丰度进行调节而发挥作用的。进一步佐证了传统配方制剂的合理性和科学性。

基于高通量测序分析连栀矾溶液发酵炮制过程中真菌菌群多样性变化

目的探究传统连栀矾溶液发酵炮制过程中真菌菌群多样性和优势菌群,为科学发酵提供理论依据。方法采用Illumina HiSeq高通量测序技术测定不同发酵时间上下层连栀矾溶液中真菌ITS2区序列,应用QIIME、Mothur和R等软件整理和统计样品序列数目和操作分类单元(OTU)数量,分析样品中真菌菌群的组成、丰度、分布、alpha多样性、beta多样性,阐明炮制过程中真菌菌群结构、多样性及丰富度的动态变化。结果 4个不同的发酵时期共获得用于分析的有效序列数为207 068,稀疏曲线表明测序深度充分,OTUs的数量接近于饱和,能充分展示连栀矾溶液的真菌群落结构,其主要由子囊菌门(Ascomycota,74.21%)、担子菌门(Basidiomycota,7.31%)、罗兹菌门(Rozellomycota,2.62%)、接合菌门(Zygomycota,0.66%)和球囊菌门(Glomeromycota,0.01%)组成,优势菌门为子囊菌门。通过分析OTUs数量、chao1指数,ACE指数、Shannon指数,表明连栀矾溶液真菌菌群有较高的丰富度和多样性,并且在炮制过程中上下层总丰富度和多样性随发酵时间的增加逐渐增加,其中上层样品的丰富度、多样性逐渐增加,下层样品的丰富度、多样性先降低后增加,且上层样品的丰富度、多样性明显高于下层样品。结论以高通量测序技术分析连栀矾溶液发酵炮制过程中真菌菌群结构、多样性及丰富度的动态变化可为指导其科学发酵提供参考。