高盐度水体氰化物的连续流动分析-分光光度耦合法适用性探讨

采用连续流动分析-分光光度耦合法对大辽河高盐度水体氰化物测定的精密度、准确度进行验证,验证结果表明:当高盐度水体中氯化物浓度低于12800mg/L时,耦合方法下氰化物精密度和准确度均低于15%,加标回收率在81.5%~93.5%,满足SL 219—2013《水环境监测规范》对于水体氰化物测定的规范要求,可用于高盐度河流水体氰化物的快速、连续测定。研究成果对于沿海感潮河段高盐度水体氰化物应急和日常监测具有重要的参考意义。

草甘膦N-乙酰转移酶反应动力学研究

草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetytransferase,GAT)是一种能够通过转乙酰基的反应将草甘膦代谢为低毒物质乙酰草甘膦的酶,在抗除草剂转基因作物中具有潜在的应用价值。通过将地衣芽孢杆菌Ba-cillus licheniformis(Weigmann)Chester AB 94036中的草甘膦N-乙酰转移酶(glyphosate N-acetyltransferase,GAT)基因克隆到大肠杆菌中,获得含有重组质粒pGEX 6p-1-gat的重组菌株。对重组菌株进行诱导表达,经过GST亲和层析纯化,获得约17 ku的目的蛋白。通过酶标仪和连续分光光度分析法,对GAT蛋白进行了酶反应动力学测定。研究表明GAT的催化常数kcat为6.420 min-1,米氏常数KM为1.162 mmol/L,由此得出其催化效率kcat/KM为5.52 L/(mmol.min)。