连翘叶茶对肝癌细胞增殖和迁移功能的影响及其作用机制

【目的】探究连翘叶茶粗提物及其主要成分连翘苷和连翘酯苷A对肝癌细胞LM3增殖和迁移功能的影响及其作用机制。【方法】利用水提法提取连翘叶绿茶和红茶,HPLC方法检测连翘绿茶和连翘红茶中有效成分连翘苷、连翘酯苷A的含量。采用CCK8实验,探究两种连翘叶茶粗提物、连翘苷和连翘酯苷A对肝癌细胞LM3增殖的影响;利用两种连翘叶茶粗提物、连翘苷和连翘酯苷A培养肝癌细胞LM3,通过细胞划痕实验,观察24、48、72、96 h细胞迁移情况,检测两种连翘叶茶粗提物、连翘苷和连翘酯苷A对肝癌细胞LM3迁移的影响;使用RT-PCR技术,检测增殖迁移相关基因Ki-67、Erk、PI3K和mTOR的表达,揭示连翘叶茶粗提物及其主要成分连翘苷和连翘酯苷A影响肝癌细胞增殖迁移功能的分子机制。【结果】连翘叶绿茶和红茶粗提物、连翘苷均显著抑制肝癌细胞LM3的增殖和迁移,连翘酯苷A显著抑制肝癌细胞LM3的迁移。其中,连翘绿茶粗提物在低、中和高浓度,培养时间24、48、72 h,均可明显抑制肝癌细胞增殖和迁移。连翘红茶粗提物随着浓度升高对LM3细胞增殖和迁移的抑制效果不断增强,在高浓度72 h抑制效果最佳。RT-PCR结果分析,其主要作用机制可能是通过降低Ki-67基因表达量来实现的。【结论】连翘叶绿茶和连翘叶红茶粗提物及连翘苷和连翘酯苷A均能够通过降低Ki-67表达抑制肝癌细胞LM3的增殖或迁移。

连翘叶提取物通过PXR/CYP17A1影响孕马血清促性腺激素在肝脏的代谢

【目的】研究连翘叶提取物(Forsythia suspensa leaves extract,FSLE)对孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)在肝脏中代谢的影响,改善在畜牧生产中因PMSG代谢缓慢而造成的氧化应激。【方法】采用半仿生酶醇法提取连翘叶有效成分,给予昆明雌鼠不同含量的FSLE进行动物体内试验;收集小鼠血清,进行酶联免疫吸附试验,检测各组小鼠血清中PMSG的质量浓度;采集小鼠肝脏组织,检测氧化应激指标谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、丙二醛和过氧化氢的水平;采用Western-blot检测小鼠肝脏组织孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)和细胞色素酶P45017A1(cytochrome P45017A1,CYP17A1)蛋白的表达水平。【结果】FSLE可显著降低小鼠血清中PMSG的质量浓度,且可以减缓PMSG代谢引起的氧化应激。Western-blot结果显示:FSLE可显著下调小鼠肝组织中PXR和CYP17A1蛋白的表达。【结论】连翘叶提取物可能是通过下调肝脏中PXR和CYP17A1的表达减缓PMSG代谢引起的氧化应激。

一测多评法同时测定连翘和连翘叶中多种成分

目的:建立同时测定连翘和连翘叶中绿原酸、芦丁、连翘酯苷B、连翘酯苷A、松脂醇-β-D-葡萄糖苷、连翘苷和连翘酯素7种成分的一测多评(QAMS)方法。方法:采用HPLC法,以连翘苷为内参物,分别建立连翘苷与其余6种成分的相对校正因子(RCF),并计算含量,实现一测多评;同时采用外标法测定该7种成分的含量,比较两种方法的差异,验证QAMS的准确性和可行性。结果:在不同实验条件下,RCF重现性良好,13批样品中该7种成分的一测多评值和外标法测定值无显著差异。结论:QAMS法可用于连翘和连翘叶的定量分析。

饲料用连翘叶不同提取物体外抗炎抑菌活性的比较研究

研究旨在比较饲料用连翘叶不同提取物的体外抗炎活性和抑菌活性。运用脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7研究连翘叶水提取物、连翘叶40%乙醇提取物和连翘叶80%乙醇提取物的体外抗炎活性,并通过抑菌试验对3种连翘叶提取物进行了体外抑菌活性的比较研究。采用Griess法检测一氧化氮(NO)生成水平,酶联免疫分析法(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的生成水平。并使用纸片扩散法和微量肉汤倍比稀释法测定抑菌活性、最低抑菌浓度和最低杀菌浓度,结果表明:3种连翘叶提取物均能抑制NO、IL-1β、IL-6和TNF-α的生成,抗炎活性80%乙醇提取物>40%乙醇提取物>水提取物。抑菌活性40%乙醇提取物>水提取物>80%乙醇提取物,3种连翘叶提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强。饲料用连翘叶乙醇提取物具有较好的体外抗炎活性和抑菌作用,可作为新型饲料添加剂开发应用。

连翘叶速溶茶制备及多种功能成分分析

【目的】研究连翘叶速溶茶的制备工艺及功能成分,为连翘资源高附加值利用提供了理论依据和新的方法。【方法】以连翘叶速溶茶得率为指标,对连翘叶水提工艺进行优化;分别以阴干、炒制杀青、杀青发酵的连翘叶为原料,制备连翘叶速溶茶粉FSL-D、FSL-G、FSL-B,并分析其理化性质和功能成分。【结果】1)连翘叶速溶茶的最佳提取工艺为料液比1∶20.14 g·mL^(-1)、提取时间180 min、提取温度90℃,连翘叶速溶茶的平均得率为15.30%。2)FSL-D、FSL-G和FSL-B溶解时间分别为50.04、55.19和46.46 s,均达到了行业标准;FSL-B味道更好且不易结块。功能成分分析表明,3种速溶茶蛋白质含量均在11%以上,总酚含量为3.22%,总黄酮含量为4.44%,总糖含量为47.76%;其中FSLG中连翘脂苷A含量较高,为19.96%。3)连翘叶多糖的抗氧化试验结果表明,多糖分子量越大,抗氧化效果越好;红外光谱结果表明,抗氧化活性与O-H伸缩振动峰、C=O键的伸缩振动峰及-C-H弯曲振动峰活性减弱相关。【结论】以杀青发酵的连翘叶为原料,制备的连翘叶速溶茶(FSL-B)品质较好。

连翘叶中7种成分的抗氧化活性研究

试验旨在筛选出连翘叶抗氧化的主要药效物质,探讨其抗氧化的作用效果。采用化学法、过氧化氢诱导巨噬细胞RAW264.7损伤模型,以清除DPPH自由基、ABTS自由基、·O_(2)^(-)自由基和细胞抗氧化酶活力为指标,综合评价连翘叶中7种成分的抗氧化活性。结果显示,连翘叶中连翘酯苷A(FSA)、连翘酯苷B(FSB)、连翘酯苷H(FSH)和连翘酯苷I(FSI)成分对DPPH自由基、ABTS自由基、·O_(2)^(-)自由基均具有较好的清除能力。FSA、FSB、FSH和FSI可提高过氧化氢诱导的巨噬细胞RAW264.7中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,提高还原性谷胱甘肽(GSH)含量,降低丙二醛(MDA)含量,改善过氧化氢诱导的细胞氧化损伤。经热图分析及主成分分析,发现FSA、FSB、FSH、FSI 4种苯乙醇苷类成分与抗氧化能力呈正相关。研究表明,连翘叶中的FSA、FSB、FSH、FSI 4种苯乙醇苷类成分具有较好的抗氧化活性,是连翘叶发挥抗氧化活性的主要药效物质。

连翘叶发酵型饮料的研制及抗氧化活性研究

以连翘叶、白砂糖、阿拉伯胶为主要原料,制备连翘叶发酵型饮料。在单因素试验基础上,以感官评分为评价指标,采用二次通用旋转组合试验优化其发酵工艺,并考察其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除能力及还原力。结果表明,连翘叶发酵型饮料的最佳发酵工艺条件为白砂糖添加量5%,复合菌种(克鲁维毕赤酵母∶植物乳杆菌=1∶1)接种量0.04%,连翘叶粉添加量2.0%,阿拉伯胶添加量0.6%,发酵时间18 h。在此优化条件下,连翘叶发酵型饮料感官评分为(86.53±1.03)分,色香味俱佳,口感酸甜,无明显苦味,理化与微生物指标均符合相关国家标准。连翘叶发酵型饮料的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率及还原力(OD_(700 nm)值)分别为(90.57±2.63)%、(79.85±1.74)%、(0.736±0.04),表明其具有良好的抗氧化性。

连翘叶提取物和壳聚糖不同配比复配保鲜剂对冷藏猪肉的保鲜作用研究

[目的]探讨连翘叶提取物和壳聚糖复配保鲜剂对冷藏猪肉的保鲜作用。[方法]通过研究不同配比连翘叶提取物和壳聚糖制成的复配保鲜剂处理冷藏猪肉的颜色、pH、感官评分、菌落总数对数值和挥发性盐基氮含量的变化,确定连翘叶提取物和壳聚糖的最佳配比。[结果]对照组在冷藏7 d左右猪肉出现腐败变质。与对照组相比,各试验组肉样的pH、菌落总数对数值和挥发性盐基氮含量均明显降低,肉样货架期有所延长,其中以连翘叶提取物和壳聚糖浓度比为1∶2时保鲜效果最好。[结论]连翘叶提取物和壳聚糖复配保鲜剂对猪肉起到明显的保鲜作用。该研究结果可为今后连翘叶资源作为天然保鲜剂的开发提供一定的理论依据。

十堰地区连翘叶HPLC指纹图谱的建立及抗氧化抑菌谱效关系研究

试验旨在通过研究十堰地区不同产地连翘叶HPLC指纹图谱与抗氧化、抑菌活性之间的谱效关系,初步确定其抗氧化、抑菌活性物质基础,为其质量控制方法研究提供参考。试验构建十堰地区十个不同产地的连翘叶HPLC指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)确定共有峰。2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基(ABTS+)清除法测定抗氧化活性,牛津杯法测定连翘叶水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性;灰色关联度和主成分分析法相结合阐明指纹图谱中多成分和药效数据之间的谱效关系。结果显示,连翘叶水提物的指纹图谱确定了13个共有峰,灰色关联度法计算出12个共有峰与抗氧化和抑菌效果的关联度均大于0.6,主成分分析构建的主成分综合评分结果也与实际药理活性结果相符。研究表明,十堰地区连翘叶具备开发潜力,其中以化龙堰和青石村产地的质量最优。连翘叶的抗氧化和抑菌活性为多组分协同作用的结果,特征成分连翘酯苷A、连翘苷、芦丁为强关联药效基础物质,连翘叶水提物整体活性与这些特征成分含量呈正相关。

连翘叶内源酶转化木脂素苷产生木脂素苷元工艺研究

探究连翘叶木脂素苷类成分经生物转化产生木脂素苷元的较优发酵条件。利用HPLC法建立发酵叶中连翘脂素、松脂素、表松脂素、松脂素单甲基醚含量的测定方法;考察连翘叶内源粗酶液对木脂素苷的体外转化作用;在单因素实验的基础上,以木脂素苷元含量为指标,采用正交试验对连翘叶发酵转化工艺进行优化。结果表明连翘叶中存在水解木脂素苷类的酶;较优的工艺参数为发酵温度55℃,发酵湿度55%,发酵时间50 min。发酵后四种木脂素苷元总含量从0.33%增加至5.66%,约提高了17倍。该工艺条件可有效提高连翘叶中连翘脂素、松脂素、表松脂素、松脂素单甲基醚含量,为进一步从连翘叶中制备四种木脂素苷元提供了理论依据。

一测多评法同时测定连翘叶红茶中5种指标成分的含量

以连翘叶红茶为研究对象,建立一测多评法(QAMS)同时测定连翘叶红茶中芦丁、连翘酯苷A、槲皮素、连翘苷和连翘脂素5种指标成分的含量的方法,并进行方法学考察。采用高效液相色谱(HPLC)法,以连翘苷为内参物,计算其与芦丁、连翘酯苷A、槲皮素和连翘脂素的相对校正因子。比较一测多评法和外标法(ESM)测定5种指标成分检测结果的差异。结果表明,5种指标成分在各自质量浓度范围内线性关系良好(相关系数R均>0.999),其检出限为0.45~0.78μg/m L,定量限为1.49~2.59μg/m L,平均加标回收率为98.25%~99.63%,精密度、加标回收率、稳定性试验结果的相对标准偏差(RSD)均<3.0%,表明QAMS法精密度、准确度、稳定性良好。一测多评法(QAMS)和外标法(ESM)测定10批连翘叶红茶中5种成分含量结果之间无显著差异(P>0.05)。QAMS法适用于连翘叶红茶中5种指标成分的同时测定。

连翘叶成分及生物活性研究进展

连翘叶富含连翘苷、连翘脂苷A、连翘脂素、芦丁等化合物,具有抗病毒、抗氧化等功效,其中连翘酯苷等成分已证实对新型冠状病毒有抑制作用。随着新型冠状病毒肺炎疫情的爆发,连翘叶的开发引起了广泛关注。本文综述了连翘叶主要化学成分的提取工艺及药理功效,并阐述了连翘叶的未来研究方向及发展前景,为连翘叶在食品、功能食品、药品等领域的开发提供参考依据。

连翘叶绿茶漱口水的制备工艺研究

以连翘叶绿茶为主要原料,制备一款具有抑菌作用的漱口水。通过水提法提取连翘叶绿茶的有效成分,采用滤纸片抑菌圈法考查绿茶提取液的添加量。以感官评价为指标,通过单因素试验和正交试验确定最佳配方。结果表明,最佳配方各组分添加量为连翘叶绿茶提取液10%,薄荷醇0.02%,柠檬酸0.05%,丙二醇5%,氯化钠0.1%,木糖醇0.05%,甘油10%。在此条件下,连翘叶绿茶漱口水的感官评分为90.7分,漱口水为澄清的淡黄色,具有连翘叶茶特有的清香,可有效清洁口腔、清新口气。

连翘叶茶提取物对高脂血症小鼠体重增长和心脏脂质过氧化的影响

用饲喂高脂饲料的方法建立小鼠高脂血症模型,测定高脂血症小鼠体重、心指数以及心肌SOD、POD活性和MDA含量来探讨连翘叶茶提取物(FSE)对高脂血症小鼠体重增长和心脏的影响。结果显示FSE可以延缓高脂血症小鼠体重增长率,降低高脂血症小鼠的心指数异常升高,提高高脂血症小鼠心肌POD活性和降低MDA的生成,对高脂血症小鼠心脏具有一定的保护作用。

连翘叶芽变“绿金”

“真没想到,原来一文不值的连翘叶芽加工成连翘青茶、红茶,竟成了俏销产品,一小提就能卖到200~1000元。”近日,河南省卢氏县双龙湾镇东虎岭村连翘种植户莫章文说。连翘果是连花清瘟胶囊、黄连上清片、双黄连等药品的必需原料,在新冠疫情防控中凸显较高的药用价值,市场价格一路攀高,但具有同等功效的连翘叶芽却不为人识。

连翘叶茶提取物对免疫低下小鼠肠道的保护作用及机理

本文探究了连翘叶茶提取物是否对免疫低下小鼠肠道有保护作用及作用机理,将25只小鼠随机分为五组,为对照组、模型组、实验甲组、实验乙组、实验丙组,其中对照组两周只进行生理盐水灌胃处理,模型组第一周进行生理盐水灌胃处理,第二周进行腹腔注射环磷酰胺,实验甲、乙、丙组第一周进行不同浓度的连翘叶茶提取物灌胃,第二周分别进行腹腔注射环磷酰胺,经过实验得出连翘叶茶提取物对免疫低下小鼠肠道有保护作用。

连翘叶的研究进展

连翘为"五大商药"之一,传统连翘以果实入药,近几年研究表明连翘叶的化学成分与果实有较好的一致性,有些有效分分含量甚至高于果实。本文通过查阅近几年文献,着重对连翘不同部位,连翘叶不同产地、不同生长周期以及连翘叶提取物的抗氧化、抗菌活性及其他药理活性进行综述。提示连翘叶的发展前景,为连翘叶发挥其价值提供参考。

河南、山西连翘叶黄酮类和三萜酸类化合物含量比较

为进一步对连翘叶中黄酮类化合物和三萜酸类主要活性成分含量进行分析,分别采用分光光度法和高效液相色谱法测定河南、山西连翘叶中总黄酮、芦丁、金丝桃苷、槲皮素、总三萜酸、齐墩果酸、熊果酸含量。结果表明:河南连翘叶中总黄酮、芦丁、金丝桃苷含量和槲皮素含量高于山西连翘叶中的含量,而山西连翘叶中总三萜酸、齐墩果酸含量和熊果酸含量高于河南连翘叶中的含量。连翘叶中黄酮类和三萜酸类的含量较高,结果为综合利用连翘叶资源提供参考依据。

连翘叶茶抗氧化抗衰老作用的实验研究

目的:研究连翘叶茶对小鼠的抗氧化及抗衰老作用。方法:小鼠分为4组,少龄对照组和高龄对照组用蒸馏水灌胃,给药组用连翘叶茶提取物分别以0.3 g/(kg·d)和0.9 g/(kg·d) 的剂量灌胃。测定小鼠心脏的SOD、MDA、POD,脑组织中的MAO-B、SOD、MDA, 线粒体中的MDA、MAO-B,以及肝指数、胸腺指数、脾指数等指标。结果:连翘叶茶可显著降低MDA、MAO-B水平,增强SOD、POD的活性。结论:连翘叶茶对小鼠有明显的抗氧化及抗衰老作用。

中药连翘及连翘叶中连翘苷含量的比较研究

用高效液相色谱法对不同产地的连翘叶、老翘、青翘中的连翘苷含量进行测定.结果表明:连翘叶中连翘苷含量比老翘高40倍以上,比青翘中连翘苷含量高2～4倍左右,不同产地的连翘叶、老翘及青翘中连翘苷的含量也有较明显的差别.