连翘提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响

目的:分析连翘(FS)提取物对小鼠淋巴结T细胞的体外活化与增殖的影响,初步探讨其免疫抑制作用机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)进行刺激,利用荧光标记的单克隆抗体(mAb)染色结合流式细胞术(FCM),检测小鼠T淋巴细胞的表达的活化抗原CD69、CD25、CD71的表达情况;以羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色,以FCM分析FS对淋巴细胞体外增殖的影响。结果:终浓度为40、80、160 mg/L的FS均对ConA刺激诱导的T细胞CD69、CD25和CD71的表达有降低作用(P<0.05)。CFDA-SE染色分析显示,上述浓度的FS对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖具有抑制作用(P<0.05)。结论:FS对ConA诱导的T细胞早、中、后期活化和体外增殖有抑制作用。

连翘提取物抑制内毒素诱导的炎症反应的实验研究

目的 :探讨连翘提取物抑制内毒素诱导的炎症反应的作用机理。方法 :(1)采用水提醇沉法制备连翘提取物 ,将连翘制剂倍比稀释后分别与一定量内毒素充分混合 ,采用基质显色法测内毒素浓度。(2)采用致病大肠杆菌制造大鼠腹膜炎模型 ,分别采用庆大霉素、连翘提取液及连翘 +庆大霉素进行治疗 ,观察各组动物血浆中IL_1、TNF_α水平及其肝组织TNF_α、IL_1mRNA原位杂交结果。结果 :连翘31.25g/L浓度以上时即有显著拮抗内毒素的作用。连翘组与连翘 +庆大霉素组血浆中IL_1、TNF_α水平和肝组织TNF_α、IL_1mRNA表达水平低于庆大霉素组和腹膜炎模型组 ,但该两组间无显著性差异。结论 :连翘具有明确的拮抗内毒素的作用且可显著抑制细菌内毒素诱发的炎性因子的过度表达 ,其效果明显优于单纯使用庆大霉素 。

贯叶连翘提取物对流感病毒感染小鼠肺中IFN-γ·TNF-α的影响

[目的]研究贯叶连翘提取物(HPE)对流感病毒感染小鼠肺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子的影响。[方法]以流感病毒滴鼻感染小鼠,分别灌胃给药(贯叶连翘提取物高剂量组100 mg/kg、低剂量组50 mg/kg和病毒唑组10 mg/kg),0.2ml/次,2次/d,5 d后摘眼球放血处死动物,摘出全肺,低温条件下制成肺匀浆,离心后取上清采用双抗体夹心ELISA法观察小鼠治疗前后肺组织中IFN-γ、TNF-α的变化。[结果]与模型对照组相比,贯叶连翘提取物流感病毒感染小鼠肺组织中TNF-α显著降低(P<0.05),IFN-γ极显著升高(P<0.01)。[结论]贯叶连翘提取物对机体抗感染免疫有一定调节作用。

连翘提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬和NO释放的影响

目的:分析连翘(FS)对小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和体外NO释放的影响。方法:无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞和羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记大肠杆菌DH5α,短期培养3h后流式细胞术(FCM)分析FS对腹腔巨噬细胞体外吞噬的影响。用LPS体外刺激活化腹腔巨噬细胞,Griess Reagent试剂盒检测并分析FS对巨噬细胞体外释放NO的影响。结果:FCM分析显示,终浓度为40、80、160mg/L的FS对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬具有明显的促进作用(P<0.05)。不同终质量浓度的FS对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞体外NO的释放均有抑制作用(P<0.05)。结论:FS可以促进小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和抑制NO体外的释放。

贯叶连翘提取物对慢性应激抑郁大鼠行为及脑内5-HT、NE表达的影响

目的 :研究贯叶连翘提取物对抑郁大鼠行为学及脑内 5 羟色胺 (5 HT)、去甲肾上腺素 (NE)表达的影响。方法 :采用大鼠慢性应激抑郁模型、灌胃给药、行为学及免疫组织化学方法。结果 :贯叶连翘提取物各剂量可显著增加慢性应激抑郁模型大鼠糖水摄入量 ,敞箱行为实验走格数与站立数 ,显著减少跳台逃避实验错误反应的停留期以及明显增强 5 HT、NE在大鼠脑内的表达。结论 :贯叶连翘提取物通过增强抑郁大鼠脑内NE和 5 HT表达 ,从而改善抑郁症状 。

UHPLC/QTOF法下连翘提取物HPLC指纹图谱的建立

目的建立UHPLC/QTOF法下连翘提取物HPLC指纹图谱。方法采用液相-四级杆串联高分辨飞行时间质谱(UHPLC/QTOF)法进行成分鉴定,连翘提取物分析采用Zorbax SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)流动相乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱;柱温为30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长280 nm。结果 14批样品指纹图谱中有20个共有峰,相似度均大于0.95。并鉴定出9个峰,分别为连翘酯苷E、suspensaside C、咖啡酸、连翘酯苷、芦丁、异连翘酯苷A、连翘酯苷、连翘酚、连翘苷。结论该方法稳定、准确、重现性好,同时提供的信息较多,可用于连翘提取物的整体质量控制,对终产品痰热清注射液的质量控制具有重要意义。

贯叶连翘提取物缓释胶囊的制备工艺研究

目的:筛选贯叶连翘提取物缓释胶囊的最佳配方。方法:应用正交设计法考察不同因素水平(辅料)对贯叶连翘提取物缓释胶囊释放速度的影响。结果:所制备的缓释胶囊12 h内呈现良好的缓释特性。结论:制备该缓释胶囊的工艺简便,体外释药缓慢、平稳,符合设计要求。

贯叶连翘提取物的研究新进展

贯叶连翘提取物具有很高的药用价值,作为镇静剂、抗炎药、抗抑郁药、抗肿瘤药及爱滋病治疗药物具有广阔的应用前景,越来越受到人们的重视。介绍了贯叶连翘提取物的化学成分、提取分析方法、各成分的药理及功效,总结了提取物当前研究的最新水平,分析了未来研究的可行方向并提出关于药效机理研究的量子化学计算方法。

连翘提取物对肉仔鸡热应激下生长性能和抗氧化活性的影响

选用1日龄健康的爱拔益加肉公雏196只,平均体重为(38.8±1.3)g,研究连翘提取物(FSE)对热应激(32±1)℃环境下肉鸡生长性能和抗氧化能力的影响。将肉仔鸡随机分为3个处理,每个处理14个重复,每个重复6只鸡。日粮处理组,分别为空白对照组(NC),维生素C组(PC):基础日粮+维生素C200mg/kg;连翘提取物组(FSE):基础日粮+FSE100mg/kg。结果表明:试验前期各处理间生长性能没有显著性差异。试验后期FSE组与NC组相比日增重显著提高(P<0.05),并且饲料转化率提高。FSE组比NC组血液总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物歧化酶(SOD)含量显著提高(P<0.05),而丙二醛(MDA)水平下降。从试验全期看FSE组比NC组肝脏SOD含量显著提高(P<0.05)。说明FSE通过清除自由基途径,缓解活性氧对肠黏膜的损伤,改善营养物质消化率和生长性能,FSE有望成为高效天然抗氧化剂。

指纹图谱技术对贯叶连翘提取物制备工艺过程的评价

目的:建立贯叶连翘提取物(含金丝桃素类和黄酮类化合物)的指纹图谱分析方法,并对提取物制备工艺的有效性、稳定性以及抗氧化剂、药材采收部位对提取物质量的影响进行综合评价。方法:采用HPLC-UV-MS法测定了药材与提取物的指纹图谱,并对主要色谱峰进行定性定量分析。结果:在提取物指纹图谱中标示了10个特征峰,鉴定了其中8个色谱峰所代表的化学成分。采用的提取物制备工艺稳定性良好,可有效地富集金丝桃素类和黄酮类化合物;抗氧化剂的使用对提取物的质量影响不大,但药材采收部位则对其有显著影响。结论:该指纹图谱分析方法可为提取物的质量控制以及制备工艺的评价提供依据。

基于人呼吸道上皮细胞炎症模型的连翘提取物抗炎活性实验研究

通过复制LPS诱导的BEAS-2B炎症模型，探讨连翘提取物对炎症反应中炎性因子分泌的作用。采用MTT法检测BEAS-2B细胞活力，筛选连翘乙醇提取物（FSEE）、60%连翘酯苷A（60% FTA）、90%连翘酯苷A（90% FTA）最佳给药浓度；采用倒置显微镜观察连翘提取物对细胞作用后的细胞形态；采用Griess Reagent法检测细胞培养上清NO含量；流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）的水平。毒性试验结果表明，连翘提取物浓度小于128 μg/mL时，对BEAS-2B细胞没有产生毒性；浓度在128-256 μg/mL时，60% FTA与90% FTA均表现出对细胞的毒性。抗炎结果表明，在给药浓度设置为25、50、100 μg/mL时，三种提取物均表现出减少NO分泌的效果（P〈0.01），90% FTA组存在剂量依赖关系；三种提取物可显著降低LPS诱导的BEAS-2B细胞胞内活性氧的水平（P〈0.05），且呈量效关系。另外，FSEE、60% FTA、90% FTA组间的治疗效果也逐渐增强。由此得出，90% FTA为连翘提取物抗炎作用的主要活性部位，其抗炎活性成分可能为连翘酯苷A，这将为连翘抗炎活性的进一步研究提供基础。

贯叶连翘提取物对百草枯所致的急性肺微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨贯叶连翘提取物(HP)在百草枯(PQ)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(rPMVECs)急性损伤中的作用和对活性氧族物质(ROS)产生的影响。方法原代培养rPMVECs,分为PQ中毒组、HP干预组以及空白对照组。同时向PQ中毒组和HP干预组加入PQ溶液(0.1mmol/L)0.5h后开始计时,再向HP干预组分别添加三种不同浓度的HP溶液(250mg/L、10mg/L、1mg/L)。采用四氮唑盐(MTT)比色法观察不同时间点(3、12、24、48、72h)和不同浓度的HP对rPMVECs生长抑制率的影响,同时用分光光度比色法测定相应的细胞上清液中总超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果在0.1mmol/L的PQ诱导rPMVECs损伤后,随着HP浓度的增高和作用时间的增长,HP可明显减缓rPMVECs生长抑制率的升高;三种浓度的HP几乎在各个时间点均能明显减缓总SOD的活力的下降(P<0.05);72h时,三种浓度的HP均能明显减缓MDA含量的增加(P<0.05),而在其它时间点,三种浓度的HP几乎不能明显减缓MDA含量的增加。结论HP对PQ诱导的急性rPMVECs损伤具有保护作用。

近红外光谱技术在快速测定连翘提取物中连翘苷含量的应用

本文主要对近红外光谱技术在快速测定连翘提取物中连翘苷含量的应用进行了研究。利用近红外漫反射光谱法采集样品的近红外光谱,以HPLC分析值作为参考值,采用偏最小二乘法(PLS)建立连翘苷含量的定量校正模型,并用未知样品对该模型进行验证。所建模型的相关系数(R2)、校正均方差(RM-SEC)和内部交叉验证均方差(RMSECV)分别为0.9745、0.117和0.2392;经外部验证,预测相关系数(r2)和预测均方差(RMSEP)分别为0.9788和0.0776。结果表明该方法操作简便,无污染,结果准确可靠,可用于连翘提取物中连翘苷含量的快速测定。

高效液相色谱法测定贯叶连翘提取物中4种成分的含量

目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定贯叶连翘提取物中金丝桃素、金丝桃苷、芦丁和槲皮素含量的方法。方法色谱柱为C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；测定金丝桃苷、芦丁和槲皮素时，流动相为甲醇-乙睛-0.3%磷酸溶液，梯度洗脱，检测波长360 nm；测定金丝桃素时，流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液，检测波长580 nm。结果金丝桃苷，槲皮素，芦丁、金丝桃素线性范围分别为1.97-20.3μg·ml^-1（r=0.999 2），2.47-24.7μg·ml^-1（r=0.9991），2.25-22.5μg·ml^-1（r=0.9991），0.08-0.4μg·ml^-1（r=0.9995），方法回收率均不低于98%。结论该方法简便、准确、重复性好，可用作贯叶连翘提取物中此4种成分的含量测定。

连翘提取物含量测定及其对脓毒症大鼠死亡率的影响

目的：建立连翘提取物中连翘苷、连翘酯苷A的含量测定方法并研究其对脓毒症大鼠死亡率的影响。方法：采用高效液相梯度洗脱法测定连翘提取物中连翘苷、连翘酯苷A含量，选用PromosilC，。柱，流动相：乙腈一水，流速：1．0mL／min，进行梯度洗脱，检测波长：210rim；采用大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）模型，尾静脉注射连翘提取物，观测SD大鼠CLP术后48、72h死亡率及1周存活情况。结果：连翘酯苷A在32．55～195．3μg／范围内线性关系良好（r=0．9995），连翘苷在64．3～385．8μg/mL范围内线性关系良好（r=0．9995）。平均回收率连翘酯苷A为：99．24％，RSD=1．11％，连翘苷为：99．33％，RSD=1．58％；给予连翘提取物50％乙醇大孔树脂洗脱部位的CLP大鼠死亡率相对于其他各组均显著降低（P〈0．05）。结论：所建立的方法准确可靠，适合于测定连翘提取物中连翘苷、连翘酯苷A的含量；连翘提取物50％乙醇大孔洗脱部位是降低脓毒症大鼠死亡率的有效部位。

近红外光谱法在连翘提取物含量测定中的应用

利用近红外光谱法（NIR）快速测定连翘提取物中连翘苷含量。应用近红外光谱仪采集75份连翘提取物样品的近红外漫反射光谱,通过HPLC（high performance liquid chromatography）法测定各样品中连翘苷含量,结合偏最小二乘法建立了连翘苷含量的定量校正模型。结果显示,决定系数、校正均方差和预测均方差分别为0.973 1、0.119和0.110,表明该方法快速、简便、无损,结果准确可靠,为连翘提取物质量的快速评价和在线检测提供了参考和依据。

贯叶连翘提取物中金丝桃素的初步HPLC测定

采用 HPL C荧光检测法检测国产贯叶连翘提取物中的金丝桃素。色谱柱为 μ- Bondapak C1 8,流动相为 0 .0 5mol/ L磷酸盐缓冲液 ( p H 7.0 ) -甲醇 ( 3∶ 7)和水 -甲醇 ( 3∶ 7) ,荧光检测激发波长 Ex4 70 nm,发射波长 Em5 90 nm。

贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸抗疱疹病毒复方筛选

目的 :评价贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸复方抗疱疹病毒活性 ,有效复方在整体动物的安全性。方法 :(1 )采用细胞病变效应法 (CPE) ,测定贯叶连翘提取物与盐酸赖氨酸 3种复方 (分别以质量比 1∶1、1∶ 2和 2∶ 1配比 )对Vero细胞和 2BS细胞的细胞毒性 ,以及对单纯疱疹病毒I型 (HSV 1 )和水痘 带状疱疹病毒 (VZV)的抗病毒活性。 (2 )一次灌胃(ig)给予小鼠复方 (2∶ 1 ) ,观察 1 4d ,测定LD5 0 。结果 :贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸 3种复方体外对HSV 1和VZV表现不同程度的抗病毒活性 ,最小有效浓度(MIC)和半数有效浓度 (IC5 0 )范围分别为 9.7～1 9.5mg·L- 1和 6 .8～ 9.7mg·L- 1,测得复方 (2∶1 )单次小鼠ig的LD5 0 为 1 1 .7g·kg- 1,95 %置信区间为 6 .5～ 1 7.2g·kg- 1。结论 :贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸复方体外具有较好抗HSV I和VZV作用 ,2∶

白茅根和连翘提取物对保鲜草莓的研究

以白茅根、连翘提取物为保鲜剂,以常规保鲜剂为对照,通过测定草莓果实保鲜中的腐败率、失重率、维生素C、糖度、可滴定酸、红色素、抗氧化活性、感官嗜好评价等指标,研究其对草莓果实的保鲜效果。结果表明:经过白茅根、连翘提取物处理的草莓,其腐败速度降低、营养物质的消耗减少,显著延缓了草莓在贮藏期间的品质降低,且以白茅根冷水提取物对草莓的保鲜效果最佳。

贯叶连翘提取物对小鼠免疫性心肌炎的作用

目的:探讨贯叶连翘提取物对小鼠免疫性心肌炎的治疗作用。方法:猪心肌球蛋白免疫BALB/C小鼠,建立免疫性心肌炎模型。结果:贯叶连翘提取物能抑制小鼠脾脏组织,降低外周血T淋巴细胞CD4/CD8比例和血清肌球蛋白自身抗体滴度,减轻心肌内淋巴细胞浸润。结论:贯叶连翘提取物对小鼠免疫性心肌炎有治疗作用。