迭鞘石斛抗肿瘤作用研究

体外培养SMMC-7721和HL-7702细胞,以不同浓度的迭鞘石斛多糖、醇提物、水提物作为药物组,并设生理盐水组作为阴性对照,5-Fu组作为阳性对照,MTT法分别测定处理24h、48h、72h后的吸光度值,计算药物对细胞生长的抑制率.荷瘤小鼠分别腹腔注射迭鞘石斛3种提取物,连续注射10d,d11眼眶静脉取血,测定血清中MDA含量及SOD活力变化.体外实验发现浓度为160μg/mL的迭鞘石斛多糖作用48h,对SMMC-7721细胞的生长抑制作用最强,且对HL-7702细胞的毒害作用较小.体内实验发现,迭鞘石斛多糖能显著增强荷瘤小鼠血清中SOD活力(P<0.01),降低MDA含量(P<0.01).研究表明,迭鞘石斛多糖是一种具有潜力的抗肿瘤天然药物.

迭鞘石斛的化学成分研究

从迭鞘石斛 (Dendrobiumchryseum)的茎中分离得到 8个单体化合物 ,它们的结构经波谱方法确定为香豆素 (coumarin ,1) ,2 ,5 二甲基 4 甲氧基菲 (moscatin ,2 ) ,4,4′ 二羟基 3,3′ ,5 三甲氧基二苄(moscatilin ,3) ,2 ,4 二羟基 3,6 二甲基苯甲酸甲酯 (2 ,4 dihydroxy 3,6 dimethylmethylbenzoate ,4) ,反式对羟基肉桂酸三十烷酯 (defuscin ,5 ) ,3 甲氧基 4 羟基反式肉桂酸二十八烷酯 (n octacosylferulate ,6 ) ,β 谷甾醇(β sitosterol,7) ,胡萝卜甙 (daucosterol,8)。

正交设计优选迭鞘石斛多糖提取工艺

目的优化迭鞘石斛多糖的提取工艺。方法以苯酚-硫酸比色法测定的多糖的含量为指标,通过正交设计L9(34)优化迭鞘石斛多糖的提取工艺。结果迭鞘石斛多糖的最佳提取工艺为A3B2C3,即300mL水,回流3次,每次1.5h。结论加水量、回流时间、回流次数均对样品提取多糖的含量有显著性影响,其影响的程度依次为回流次数>回流时间>加水量。

迭鞘石斛的不同溶剂提取物对小肠运动的影响研究

目的确定迭鞘石斛具有促进小肠运动作用的有效部位。方法迭鞘石斛有机溶剂系统分离的提取部位对促进小肠运动作用的影响。结果迭鞘石斛的醋酸乙酯部位具有促进小鼠小肠运动作用,与空白对照组比较有显著差异。结论迭鞘石斛的醋酸乙酯部位为促进小肠运动作用的有效部位。

迭鞘石斛的生药鉴定

对中药石斛之一种迭鞘石斛Dendrobium denneanum Kerr.进行生药性状、显微组织特征鉴定,井比较了其与金钗石斛的薄层层析图谱。

迭鞘石斛提取物对四种致病菌的抑制作用

研究迭鞘石斛提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌及沙门菌四种致病菌的抑制作用。采用96孔板微量肉汤稀释法以及平板培养法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌和杀菌作用均较佳,MIC和MBC浓度均为12.5mg/mL;而水提取物则对小肠结肠炎耶尔森菌表现出较强的抑制作用,MIC为6.3mg/mL,MBC为50.0mg/mL。迭鞘石斛提取物的抗菌作用值得进一步开发利用。

迭鞘石斛的化学成分研究

自兰科石斛属（Dendrobium）植物迭鞘石斛Dendrobium chryseum Rolfe中分得5个化合物，根据UV、IR、^1H NMR及^13C NMR确定其为β－谷甾醇，2，6－二甲氧基苯醌，鼓槌联苄，毛兰菲及鼓槌石斛素。这五种化合物均首次从该植物中分得。

RP-HPLC法测定迭鞘石斛中香豆素的含量

目的：建立RP-HPLC法测定迭鞘石斛中香豆素含量的方法。方法：采用Diamonsil（钻石）C18（200mm×4.6mm,5μm）色谱柱,甲醇-水（30∶70）为流动相,流速为1.0ml.min-1,检测波长274nm。结果：香豆素线性范围为0.1~0.6μg（r=0.9998,n=6）,平均回收率为101.47%（RSD=1.32%,n=3）。结论：该法快速简便、结果可靠、精密度好、灵敏度高、可作为迭鞘石斛中香豆素含量测定的方法及质量控制。

迭鞘石斛的生药鉴别

目的:为鉴别和开发迭鞘石斛(Dendrobinm denneanum kerr.)提供参考依据。方法:运用性状、显微及薄层色谱的方法对该药材进行鉴别研究。结果:较为全面地报道了其性状、显微特征,供试品与迭鞘石斛对照药材在薄层色谱相应位置上,显相同颜色的荧光斑点。结论:研究结果可作为该药材的应用及其相关质量标准制定提供参考依据。

滨蒿内酯鉴别迭鞘石斛可行性的探讨

目的:探讨迭鞘石斛薄层鉴别方法的可行性。方法:以HPLC法DAD扫描确认迭鞘石斛中是否含有滨蒿内酯。结果:在迭鞘石斛薄层鉴别试验中,供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上有斑点,但斑点颜色与滨蒿内酯对照品的颜色有差异;在HPLC鉴别试验中,滨蒿内酯检测限为2.14 ng时,迭鞘石斛供试品中出现与滨蒿内酯相应的色谱峰,但它们色谱峰的光谱图不相同。结论:迭鞘石斛药材标准中以滨蒿内酯为对照品的鉴别方法值得商榷和完善。

迭鞘石斛质量标准研究

目的:建立迭鞘石斛的质量标准。方法:采用《中国药典》一部附录方法,测定杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分、重金属、砷盐、浸出物,建立薄层色谱鉴别方法。结果:杂质不得过2.0%,水分不得过12.0%,总灰分不得过4.0%,酸不溶性灰分不得过0.4%,重金属不得过10ppm,砷盐不得过2ppm,浸出物不得少于10.0%。薄层色谱鉴别专属性强,重现性好。结论:能有效评价迭鞘石斛的质量。

兰科专用控释肥对迭鞘石斛茎叶生长的影响初探

目的:研究兰科专用控释肥对迭鞘石斛茎叶生长的影响。方法:以迭鞘石斛品系"乐斛1号"为试验材料,采用盆栽试验,不施肥为对照处理,对施用兰科专用控释肥的迭鞘石斛植株进行茎叶相关生长量研究。结果:施加兰科专用控释肥显著促进了迭鞘石斛茎的生长却不能显著促进其叶的生长,其中茎长、茎粗、茎节数呈一致正向增长的趋势。与对照相比,施肥后的迭鞘石斛茎、叶相关性降低。结论:兰科专用控释肥的施用主要有利于迭鞘石斛茎的生长而对叶的生长影响表现不显著。迭鞘石斛通过调整其茎叶生物量的分配来优化养分的捕获。而决定迭鞘石斛经济产量的部位主要是茎,说明兰科专用控释肥在增加迭鞘石斛经济产量上起到一定效果。

迭鞘石斛所含多糖对小鼠免疫细胞影响的研究

[目的]研究迭鞘石斛(Dendrobinm chryseum Rolfe)所含多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的影响。[方法]分离提取小鼠脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,通过添加和不添加迭鞘石斛所含多糖进行体外培养,以MTT法检测这些免疫细胞增殖的变化情况。[结果]石斛多糖在中、高浓度时可极显著提高小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的增值(P﹤0.01),低浓度时没有增强作用。[结论]迭鞘石斛所含石斛多糖在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的增殖有增强作用,说明对小鼠具有免疫增强作用。

GC-MS/MS测定迭鞘石斛中3种农药的残留量

为迭鞘石斛农药残留量的检测及综合利用提供参考,以四川夹江迭鞘石斛中药材为材料,用乙腈提取样品液,经Cleanert TPH专用净化柱净化,用GC-MS/MS气质联用仪测定迭鞘石斛中联苯菊酯、甲氰菊酯和溴氰菊酯的农药残留含量。结果表明:当联苯菊酯、甲氰菊酯和溴氰菊酯的进样量为0.01~0.1ng时,色谱峰面积与进样量均有较好的线性关系;联苯聚酯、甲氰聚酯和溴氰聚酯的最低检出限(以进样量计)分别为8.228×10-4 ng、1.875×10-4 ng和6.676×10-4 ng,平均回收率分别为94.7%、94.7%和94.0%,检测结果的稳定性和重复性好,精密度和回收率高。GC-MS/MS检测方法简单快速,定量准确,适用于迭鞘石斛中联苯菊酯、甲氰菊酯和溴氰菊酯农药残留的同时检测。

迭鞘石斛快繁育苗技术的研究

目的:寻找迭鞘石斛快繁育苗的有效途径。方法:采用组织培养和野生自然栖息的迭鞘石斛诱导高位腋芽萌发等途径进行探索。结果:在组织培养中,改良1/2MS培养基对原球茎形成效果最好,调整不同浓度的N、P、K及外源激素对诱导迭鞘石斛原球茎的增殖、生根、壮苗极为明显;外源激素对诱导迭鞘石斛的高位腋芽萌发效果不明显,高位芽萌发与茎株生理年龄和营养状况有关。结论:人工种植迭鞘石斛采用现代生物技术组培和腋芽繁殖是目前快繁育苗的最有效途径,不仅育苗量大、周期短,且生长快、成活率高,两条途径对于迭鞘石斛的产业化发展有重要意义。

三种川产人工栽培石斛的多糖含量测定

本论文采用比色法对产自乐山人工栽培的马鞭石斛(Dendrobiumchryanthum)、铁皮石斛(D.officinale)和迭鞘石斛(D.denneanum)中的多糖含量进行了测定,经测定其含量分别为:28.60%、17.53%和16.27%。其中马鞭石斛(D.chryanthum)中多糖含量高达28.60%,目前尚未见报道;铁皮石斛(D.officinale)和迭鞘石斛(D.denneanum)多糖含量略低于贵州产野生种。马鞭石斛(D.chryanthum)多糖含量的测定为进一步研究马鞭石斛多糖的作用奠定了基础。

迭鞘石斛中性多糖DDP1-1的体内免疫活性

建立S180肉瘤模型,考察了迭鞘石斛中性多糖的体内免疫活性.以不同浓度的多糖作为药物组,环磷酰胺为阳性对照,生理盐水为阴性对照.给药14d后处死并解剖小鼠,眼眶取血,计算抑瘤率和免疫指数,检测血清中TNF-α、IL-2和IFN-γ含量.结果显示不同浓度的多糖表现出不同的免疫活性,其中多糖低浓度组(1.25mg/mL)有较高的肿瘤抑制率和免疫指数(P<0.01),并促进和调节IL-2、IFN-γ、TNF-α在机体内分泌(P<0.01),协调改善机体免疫系统功能,达到治疗肿瘤的目的.

迭鞘石斛的化学成分

迭鞘石斛(Dendrobium denneanum)为川产石斛主流品种,在传统中医药中应用广泛,主要具有促进肠胃运动、抗肿瘤、增强机体免疫能力、扩张血管、抗氧化等药理作用.现从迭鞘石斛(Dendrobium denneanum)茎中分离得到4个化合物,其结构经波谱方法确定为鸟苷(1)、它乔糖苷(2)、vanilloloside(3)和9-β-D-allofuranulsylguanine(4).这4个化合物均为首次从迭鞘石斛中分离得到,其中它乔糖苷(2)和9-β-D-allofuranulsylguanine(4)为首次从该属分离得到.

川产迭鞘石斛中香豆素的分离鉴定及药材质量标准研究

目的:建立川产迭鞘石斛药材的质量标准。方法:对川产迭鞘石斛药材进行香豆素对照品的提取分离,并建立其薄层色谱(TLC)定性鉴别及高效液相色谱含量测定方法。结果:从药材中分离并鉴定出香豆素标准品。TLC鉴别斑点清晰;香豆素进样量在0.096～0.480μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,平均回收率为99.1%,RSD=1.44%(n=6)。结论:本试验结果可较全面反应川产迭鞘石斛的内在质量,并为有效评价迭鞘石斛药材的质量和开发川产迭鞘石斛资源提供依据。

超声波辅助技术提取迭鞘石斛多糖工艺研究

目的:采用超声波辅助技术提取迭鞘石斛多糖。方法:在单因素试验基础上,通过正交设计对提取工艺进行优化,主要考察因素为提取时间、温度和pH。结果:影响超声波辅助技术提取石斛多糖的主要因素为提取温度,优选方案为温度100℃、时间25min、pH7。结论:该方法简单,高效,具有良好的精密度和稳定性,重复性好,适合于迭鞘石斛多糖的提取。