推拿退热六法对大肠杆菌内毒素致热幼兔外周环氧合酶2、前列腺素E2表达的影响

目的观察推拿退热六法对大肠杆菌内毒素致热幼兔的退热作用及外周作用机制。方法将24只幼兔随机分为盐水对照组、模型组、退热六法组,每组8只。模型组、退热六法组采用耳缘静脉大肠杆菌内毒素注射法制备发热模型。模型建立后60分钟,退热六法组给予退热六法干预:开天门、推坎宫、揉太阳、揉耳后高骨、清天河水、推脊。造模后每20分钟记录体温1次,连续测量温度180分钟。观察各组幼兔体温变化及血常规白细胞计数、中性粒细胞百分比,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测幼兔外周血、肝、肺组织前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)表达水平,采用免疫印迹法(Western Blot法)检测幼兔肝、肺组织环氧合酶2(cyclooxygenase,COX-2)表达水平。结果与盐水对照组相比,模型组幼兔体温升高(P<0.05),退热六法组幼兔体温升高明显低于模型组(P<0.05)。干预后120分钟,与盐水对照组相比,模型组幼兔血白细胞降低、中细粒细胞百分比显著升高(P<0.05)。退热六法组中性粒细胞百分比较模型组降低明显(P<0.05),白细胞降低无统计学意义(P>0.05)。ELISA结果显示,与盐水对照组比较,模型组外周血、肝、肺组织PGE2均显著上升(P<0.05)。退热六法组经干预后,各组织PGE2表达量均较模型组降低(P<0.05),其中外周血PGE2表达量较盐水对照组无统计学意义(P>0.05),肝、肺组织表达较盐水对照组差异显著(P<0.05)。Western Blot结果显示,模型组肝、肺组织COX-2蛋白表达增加,与盐水对照组相比具有统计学差异(P<0.05)。与模型组比较,退热六法组肝、肺组织COX-2表达水平显著下降(P<0.05)。结论推拿退热六法对大肠杆菌内毒素致热幼兔有良好的退热作用,其体温调节机制是通过下调血的中性粒细胞百分比,降低外周血、肝、肺PGE2表达水平,抑制肝、肺COX-2蛋白表达来调节机体抗炎免疫功能实现。

小儿推拿退热六法对脂多糖致热幼兔下丘脑的代谢组学研究

目的:探究小儿推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热疗效及退热机制。方法:将30只新西兰幼兔随机分为盐水组、模型组和推拿组。模型组和推拿组通过耳缘静脉注射LPS建立发热模型。推拿组在造模后1 h行退热六法(开天门、推坎宫、揉太阳、揉耳后高骨、清天河水、推脊)干预,实验过程中监测肛温。造模后3 h,取下丘脑进行液相色谱-质谱联用(LC-MS)非靶向代谢组学研究。结果:造模后2 h和3 h,推拿组肛温显著低于模型组(P<0.05)。代谢组学结果显示盐水组与模型组共有171个差异代谢物,富集到123条通路上;推拿组与模型组共有116个差异代谢物,富集到mTOR、PI3K-AKT、GABA能突触等77条通路上。结论:退热六法可降低发热幼兔体温,其退热机制可能与调节糖代谢、脂质代谢有关。

推拿退热六法对脂多糖致热幼兔下丘脑COX-2/PGE2/EP3信号通路的影响

目的观察推拿退热六法对脂多糖(LPS)致热幼兔的退热作用,并探究对下丘脑环氧化酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)/E-前列腺素类激素3受体(EP3)信号通路的影响。方法采用随机数字表法,将24只新西兰兔(2月龄)随机分为对照组、模型组和推拿六法组,每组8只。模型组、推拿六法组采用LPS(0.5 mg/L)耳缘静脉注射复制发热模型,注射体积1 mL/kg。LPS注射后1 h,推拿六法组采用推拿退热六法干预:开天门200次,2 min;推坎宫200次,2 min;揉太阳200次,2 min;耳后高骨揉24次掐3下,2 min;清天河水500次,5 min;推脊300次,5 min。在相同时段内模型组、对照组动物在相同部位涂抹等量的室温清水,抓握但不进行推拿手法干预。观察各组体温变化,LPS注射后每20 min记录肛温1次,连续测量180 min,计算最大体温变化值和体温反应指数(TRI)。ELISA法检测下丘脑PGE2、环磷酸腺苷(cAMP)表达水平,Western blotting检测下丘脑COX-2、EP3、cAMP蛋白表达水平,RT-PCR检测COX-2、EP3、cAMP的mRNA表达。结果与对照组比较,模型组肛温上升(P<0.01),推拿六法组推拿退热六法干预后幼兔肛温较模型组降低(P<0.01)。造模后60 min,模型组、推拿六法组最大体温变化值与TRI较对照组升高(P<0.01);造模后60 min,推拿六法组最大体温变化值与TRI较模型组差异无统计学意义;造模后180 min,模型组最大体温变化值与TRI升高(P<0.01),推拿六法组较模型组最大体温变化值与TRI降低(P<0.01)。ELISA结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑PGE2、cAMP表达量升高(P<0.01),推拿六法组PGE2、cAMP表达量较模型组降低(P<0.05,P<0.01)。Western blotting结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑COX-2、EP3、cAMP表达量升高(P<0.01),推拿六法组COX-2、EP3、cAMP表达量较模型组降低(P<0.05,P<0.01)。RT-PCR结果显示,与对照组相比,模型组下丘脑COX-2、EP3、cAMP mRNA表达量增加(P<0.01),推拿六法组下丘脑COX-2、EP3、cAMP mRNA表达均较模型组减少(P<0.01)。结论推拿退热六法对LPS致热幼兔有良好的退热作用,其作用机制之一与抑制致热原对下丘脑COX-2/PGE2/EP3信号通路的激活,减少体温中枢终端的正调节介质cAMP水平有关。