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狂犬病毒CTN-1株在Vero细胞上的适应传代 被引量:2
1
作者 王宏伟 沈飞 +6 位作者 李慧君 李华 李春英 于伟 钱浩 鲁宏 窦志勇 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期38-40,共3页
以我国狂犬病固定毒人二倍体细胞适应株 (CTN - 1)作Vero细胞适应传代研究。显示CTN - 1株能较好适应Vero细胞 ,经 5代培养病毒滴度可达 7 5logLD5 0 /ml,且在 5~ 2 0代以内均稳定在 7 0logLD5 0 /ml左右 。
关键词 狂犬病毒 CTN-1株 VERO细胞 狂犬病疫苗 适应传代
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肾综合征出血热纯化疫苗候选毒株在Vero细胞上的适应传代及其免疫原性研究 被引量:4
2
作者 陈伟 薛采芳 +4 位作者 刘江秋 李忠义 范永星 徐璐 廖辉 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期129-132,共4页
目的 将肾综合征出血热纯化疫苗候选毒株适应于Vero细胞 ,并对其抗原性和免疫原性进行研究。方法 将汉滩病毒H82 0 7株和汉城病毒Y86 0 13株在Vero细胞上进行连续终末稀释传代 ,采用间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验和空斑减少中和试... 目的 将肾综合征出血热纯化疫苗候选毒株适应于Vero细胞 ,并对其抗原性和免疫原性进行研究。方法 将汉滩病毒H82 0 7株和汉城病毒Y86 0 13株在Vero细胞上进行连续终末稀释传代 ,采用间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验和空斑减少中和试验 ,研究传代后毒株的繁殖特性、病毒滴度、抗原量及免疫原性。结果 经过 5次终末稀释传代 ,两株病毒在Vero细胞上均显示出良好的适应性 ,从第六代开始病毒滴度稳定在 7 0LgTCID50 ml以上 ,第八代两毒株抗原量均已达到 1∶6 4 ,H82 0 7株抗原量继续升高 ,最高时达 1∶2 5 6。用两株病毒不同培养代次上清液制备的单价原液灭活疫苗免疫家兔二针 ,免疫血清对同型毒株的中和效价均达到 1∶10。结论 两株病毒已适应于Vero细胞 ,且具有病毒滴度高和免疫原性良好的特性 ,适合用作Vero细胞肾综合征出血热灭活纯化疫苗的候选毒株。 展开更多
关键词 肾综合征出血热 纯化疫苗 候选毒株 VERO细胞 适应传代 免疫原性 抗原性
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流行性乙型脑炎SA_(14)-14-2弱毒株在狗胎肾细胞传代适应的研究 被引量:4
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作者 王寿贵 俞永新 +3 位作者 郑庆纹 张大全 贾丽丽 李玉华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1992年第2期49-51,共3页
流行性乙型脑炎SA_(14)-14-2弱毒株经原代狗胎肾细胞连续传递4代以后,其病毒滴度稳定在7.5~8.0 log TCID_(50)/0.2ml。传代后的各代病毒(命名为 SA_(14)-14-2PDK-CD)对三周龄小鼠脑内无毒力、皮下无致病力、弱毒力稳定性和免疫原性等... 流行性乙型脑炎SA_(14)-14-2弱毒株经原代狗胎肾细胞连续传递4代以后,其病毒滴度稳定在7.5~8.0 log TCID_(50)/0.2ml。传代后的各代病毒(命名为 SA_(14)-14-2PDK-CD)对三周龄小鼠脑内无毒力、皮下无致病力、弱毒力稳定性和免疫原性等特性与原 SA_(14)-14-2 株相同。以该株病毒和原代狗肾细胞制备的活疫苗,经全面检定完全符合现行《乙型脑炎活疫苗规程》标准。 展开更多
关键词 乙脑14-2弱病毒 原代狗胎肾细胞 病毒传代适应 乙脑活疫苗
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肾综合征出血热病毒Z10株在Vero细胞上传代适应和增殖动态 被引量:2
4
作者 姚智慧 董关木 +3 位作者 俞永新 孔艳 刘文雪 安祺 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期23-24,共2页
目的为了肾综合征出血热病毒滴度达到规模化生产要求。方法将肾综合征出血热病毒 Z10 株在Vero细胞上传代适应,不同时间取样,测定病毒滴度。结果从第2代即可稳定达到高滴度。转瓶培养比静 止培养的病毒峰值出现的更早,第 4... 目的为了肾综合征出血热病毒滴度达到规模化生产要求。方法将肾综合征出血热病毒 Z10 株在Vero细胞上传代适应,不同时间取样,测定病毒滴度。结果从第2代即可稳定达到高滴度。转瓶培养比静 止培养的病毒峰值出现的更早,第 4 d即可达到108/ml以上,且可多次收液。结论初步确立了疫苗生产中病毒制 备工艺。 展开更多
关键词 肾综合征出血热病毒 Z10株 VERO细胞 传代适应
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流行性乙型脑炎病毒在Vero细胞上传代适应的研究 被引量:4
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作者 石慧颖 丁志芬 常振彦 《中国病毒学》 CSCD 1995年第4期273-277,共5页
通过乙脑病毒P_3株以不同方式在鼠脑和Vcro细胞间传代适应的研究,培育出适于工业化大生产制备乙脑疫苗的生产毒种。其毒力可达7.0±0.5lgLD50/0.04ml,空斑滴度为7.5±0.5PFU/ml,免疫... 通过乙脑病毒P_3株以不同方式在鼠脑和Vcro细胞间传代适应的研究,培育出适于工业化大生产制备乙脑疫苗的生产毒种。其毒力可达7.0±0.5lgLD50/0.04ml,空斑滴度为7.5±0.5PFU/ml,免疫原性ID50值为0.000016-0.000023ml;在含有适量人白蛋白的199营养液内,该毒种于-30℃至少可稳定一年;与鼠脑组织毒种相比,传代细胞毒种的毒力、免疫原性及稳定性均与其相当。然而,后者不含脑组织,至少降低了一种过敏的危险。另外,细胞毒种的制备无需手工解剖鼠脑,易于控制外源因子污染,易于标准化。对于大规模生产疫苗、提高疫苗产量和质量,传代细胞毒种比鼠脑组织悬液毒种具有明显的优点。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 流行性 传代适应 VERO细胞
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流行性出血热病毒于原代地鼠肾细胞传代适应和适应株病毒的生物学性状研究 被引量:1
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作者 李淑兰 付增武 +2 位作者 郝富勇 惠连 黄永成 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期14-17,共4页
为提高流行性出血热病毒(简称EHFV)在金黄地鼠肾细胞(简称GHKC)的增殖力和原液的毒力满度,将6株乳鼠脑腔适应系毒株,在GHKC进行传代适应,各系毒株均传12代以上。适应后的毒株毒力满度明显升高而且稳定.适应株病毒ELISA、HA和RPH... 为提高流行性出血热病毒(简称EHFV)在金黄地鼠肾细胞(简称GHKC)的增殖力和原液的毒力满度,将6株乳鼠脑腔适应系毒株,在GHKC进行传代适应,各系毒株均传12代以上。适应后的毒株毒力满度明显升高而且稳定.适应株病毒ELISA、HA和RPHA抗原县均明显高于用乳鼠脑系毒株感染细胞。 展开更多
关键词 流行性出血热 病毒 原代地鼠肾细胞 传代适应
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狂犬病毒aG株在Vero细胞上传代适应研究 被引量:3
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作者 袁彦宝 郑淑媛 +3 位作者 李志强 代长海 顾丹阳 赵淑杰 《微生物学免疫学进展》 2009年第1期5-7,共3页
为研制有效、安全和稳定的Vero细胞狂犬病疫苗提供实验室基础资料。采用狂犬病固定毒4aG株在Vero细胞上进行传代适应,同时对该毒株在Vero细胞上的增殖条件,病毒液的回收方法进行研究。结果显示,狂犬病固定毒4aG株在Vero细胞上多次传代... 为研制有效、安全和稳定的Vero细胞狂犬病疫苗提供实验室基础资料。采用狂犬病固定毒4aG株在Vero细胞上进行传代适应,同时对该毒株在Vero细胞上的增殖条件,病毒液的回收方法进行研究。结果显示,狂犬病固定毒4aG株在Vero细胞上多次传代后获得一株Vero细胞适应株(4aG-V株),该毒株的毒力可达8.50 logLD50/ml,且具有很好的抗原性及免疫原性。结果表明,感染Vero细胞最适种毒比例为1∶103,病毒滴度随着时间的延长而增强到第12天后逐渐减弱,且采用低温冻融破碎法回收的病毒液滴度优于直接收液法。4aG-V株在Vero细胞上维持时间长,可连续收液,有望其生产高滴度的狂犬病毒液。 展开更多
关键词 VERO细胞 狂犬病固定毒4aG株 传代适应
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季节性流感病毒H1N1和H3N2在BALB/c小鼠中的传代适应与分子机理研究 被引量:2
8
作者 黄保英 王秀平 +2 位作者 谭文杰 王文玲 阮力 《生物技术通讯》 CAS 2015年第3期316-320,共5页
目的:建立季节性流感病毒H1N1和H3N2的BALB/c小鼠致死性动物模型,并探索其鼠肺适应的分子机理。方法:将季节性流感病毒A/Guangdong/51/2008(H1N1)(简称为H1N1-GDwt)和A/Anhui/137/2008(H3N2)(简称为H3N2-AHwt)分别滴鼻感染BALB/c小鼠,... 目的:建立季节性流感病毒H1N1和H3N2的BALB/c小鼠致死性动物模型,并探索其鼠肺适应的分子机理。方法:将季节性流感病毒A/Guangdong/51/2008(H1N1)(简称为H1N1-GDwt)和A/Anhui/137/2008(H3N2)(简称为H3N2-AHwt)分别滴鼻感染BALB/c小鼠,于病毒增殖高峰期制备肺组织悬液,连续传40代,并对野生型与鼠肺适应株在小鼠中的致死性与全基因组序列进行比较。结果:H3N2-AHwt感染BALB/c小鼠后各代次鼠肺悬液均未检测到病毒;而H1N1-GDwt感染小鼠后第4 d肺部病毒滴度达到高峰,病毒滴度随传代次数的增加而呈现"波浪型"升高,鼠肺适应株对BALB/c小鼠的致死性与致病性明显强于野生型病毒,全基因组序列分析发现鼠肺适应株在血凝素(HA)、酸性聚合酶(PA)、核蛋白(NP)及非结构蛋白(NS)中共发生了10个氨基酸突变。结论:H3N2-AHwt难以在BALB/c小鼠中有效复制与适应;而H1N1-GDwt能够在BALB/c小鼠中有效复制,其毒力可以通过连续鼠肺传代而提高,HA、PA、NP及NS蛋白的突变与其鼠肺适应密切相关。 展开更多
关键词 季节性流感病毒 小鼠传代适应 分子机理
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5株猫杯状病毒中国分离株的细胞适应性及遗传进化分析 被引量:2
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作者 应瑛 王一鸣 +5 位作者 马剑钢 曹东梅 李响 高玉伟 杨松涛 胡桂学 《经济动物学报》 CAS 2016年第1期8-12,共5页
将CH-JL1、CH-JL2、CH-JL3、CH-JL4、CH-SH 5株猫杯状病毒中国分离株分别在F81细胞上连续传至15代。细胞传代前,测定病毒的细胞半数感染量(TCID_(50)),再以0.1 MOI的感染复数接种细胞。采用RTPCR方法扩增FCV各代次的ORF2基因片段并测序,... 将CH-JL1、CH-JL2、CH-JL3、CH-JL4、CH-SH 5株猫杯状病毒中国分离株分别在F81细胞上连续传至15代。细胞传代前,测定病毒的细胞半数感染量(TCID_(50)),再以0.1 MOI的感染复数接种细胞。采用RTPCR方法扩增FCV各代次的ORF2基因片段并测序,用DNASTAR和MEGA软件分析其氨基酸变异和遗传进化特点。试验结果显示,细胞适应传代后,FCV各代次毒株滴度逐渐稳定,均位于10^(-9)TCID_(50)/mL^10^(-10)。TCID_(50)/mL之间。ORF2基因测序表明,FCV传代后氨基酸变异位点包括CH—JL1的P57S和G494R、CH-JL3的S440L和N519D、CH—JL4的V614I、CH—SH的K448R。遗传进化分析表明CH—JL2和CH-JL3处于同一进化分支上,同源性为95.9%;CH-JL1和国内FB-NJ-13株、CH-SH和国内GD株分别在一个进化分支,CH-JL4和国外F65株遗传关系较近。5株猫杯状病毒在F81细胞传代后滴度较高,稳定性良好,为将来FCV疫苗株的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 F81细胞 适应传代
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Sabin2型脊髓灰质炎病毒适应人胚肺二倍体细胞不同代次病毒滴度与5′端非编码区变异关系
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作者 胡凝珠 瞿素 +2 位作者 刘国栋 姬秋彦 胡云章 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期65-68,共4页
To investigate the adaptation of poliovirus Sabin 2 in human embryonic lung diploid fibroblast(KMB17) and its relation to nucleotide mutations of 5′ noncoding region(5′NCR),the Sabin 2 vaccine virus was passaged... To investigate the adaptation of poliovirus Sabin 2 in human embryonic lung diploid fibroblast(KMB17) and its relation to nucleotide mutations of 5′ noncoding region(5′NCR),the Sabin 2 vaccine virus was passaged serially in KMB17 for seventeen passages.The infectious titers of Sabin 2 virus increased along with the passages,the highest titer reached 8.0 LgCCID50/ml at passage 13(P13).During passage,there were three nucleotide mutations appeared in 5′NCR,G changed to C at position 20,C to U at position 189 and G to A at position 481.The results showed that Sabin 2 poliovirus adapted well in KMB17 after 17 passages.The nucleotide mutation at position 481 that appeared from passage 3 on indicated the possibility of virulent reversion. 展开更多
关键词 Sabin2型脊髓灰质炎病毒 感染性滴度 5′端非编码区 人胚肺二倍体细胞 适应传代培养 变异
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汉坦病毒Vero细胞适应株的筛选及鉴定
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作者 管亚博 邢坤鹏 +6 位作者 刘晨阳 王颖 杜翔宇 陈娜娜 张朔 孙宏亮 李景良 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第7期779-787,共9页
目的 探讨汉坦病毒(Hantataan virus,HTNV)PS-6株经乳鼠鼠脑传代后在Vero细胞上的适应性,并筛选出适应Vero细胞的高滴度HTNV。方法 将HTNV PS-6株在乳鼠鼠脑内连续传代培养后,Vero细胞上连续传10代,观察细胞病变效应(cytopathic effect,... 目的 探讨汉坦病毒(Hantataan virus,HTNV)PS-6株经乳鼠鼠脑传代后在Vero细胞上的适应性,并筛选出适应Vero细胞的高滴度HTNV。方法 将HTNV PS-6株在乳鼠鼠脑内连续传代培养后,Vero细胞上连续传10代,观察细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),并采用蚀斑法检测病毒感染性滴度,滴度升高后,采用蚀斑克隆纯化筛选单克隆病毒并检测病毒滴度;分别以0.01、0.05、0.1 MOI感染Vero细胞后绘制病毒生长曲线;Reed-Muench法计算病毒LD50;Western blot法鉴定病毒特异性;透射电镜观察病毒大小及结构;与HTNV PS-6株全基因组核苷酸序列及氨基酸序列进行比较分析。将筛选出的Vero细胞适应株V-PS-6经腹腔注射10只BALB/c雌性小鼠,濒死时解剖,取心、肝、脾、肾、脑、肺、小肠、肌肉等组织进行免疫组化分析。结果 鼠脑传代毒株对Vero细胞具有较好适应性,初始病毒滴度为1.3 lgPFU/mL,随着传代次数增加,病毒滴度逐渐升高,稳定在7.5~7.9 lgPFU/mL;筛选出的适应株V-PS-6蚀斑边界清晰、圆润、肉眼可见,大小如针尖,LD_(50)为10-^(7.8),在相对分子质量约50 000处可见特异性蛋白条带,大小与适应前HTNV PS-6株相符;V-PS-6病毒直径为80~210 nm,与HTNV PS-6电镜结构未见明显差异,核苷酸序列同源性为99.39%,氨基酸序列同源性为98.85%;V-PS-6病毒明显分布在小鼠肾脏、肝脏、小肠、后腿肌肉及心脏中。结论 成功筛选出1株可较好适应Vero细胞的高滴度HTNV株,且具有良好的遗传稳定性,为后续HTNV Vero细胞疫苗的研发及相关机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 汉坦病毒 VERO细胞 适应传代 蚀斑法 病毒滴度
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猪瘟病毒2.1b基因亚亚型野毒株的体外细胞传代适应与全基因组序列分析 被引量:2
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作者 谢晓明 张莉 +4 位作者 吕宗吉 龚文杰 郭焕成 涂长春 王全凯 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期605-611,共7页
利用RT-PCR从广东某猪场疑似猪瘟(Classical swine fever,CSF)病例中检测出CSFV,并对扩增的E2全长基因进行了序列测定和系统进化分析。结果表明:引发该起猪瘟疫情的毒株属于CSFV 2.1b基因亚亚型,命名为GD176。为了进一步了解该毒株的复... 利用RT-PCR从广东某猪场疑似猪瘟(Classical swine fever,CSF)病例中检测出CSFV,并对扩增的E2全长基因进行了序列测定和系统进化分析。结果表明:引发该起猪瘟疫情的毒株属于CSFV 2.1b基因亚亚型,命名为GD176。为了进一步了解该毒株的复制特点,利用PK-15细胞对GD176进行了体外细胞适应性传代,并对获得的细胞适应毒GD176-F46进行了全基因组测序。结果表明:GD176通过在PK-15上不断传代,最终获得了高滴度的适应毒株,其滴度从第6代的102.61TCID50/m L提高至第46代的108.06TCID50/m L。病毒生长动力学结果显示,GD176-F46在感染后72 h病毒滴度达到最高值(108.17TCID50/m L)。为进一步分析GD176在细胞传代适应过程中的稳定性,对不同代次细胞毒的E2全长基因进行扩增和序列测定,结果发现:GD176-F0与GD176-F6、F10、F15、F20、F25、F30、F35、F40和F46的E2基因序列完全一致,这表明囊膜蛋白E2在病毒适应PK-15细胞过程中非常稳定。通过比对GD176和其他2.1亚型毒株各蛋白的氨基酸序列发现,不同毒株之间同源性最小的病毒蛋白是NS5A,低于病毒囊膜糖蛋白E2。获得了高度适应PK-15细胞的GD176细胞毒,为进行病毒毒力评价、复制和致病特性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 2.1b亚亚型 细胞适应传代 全基因组
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日本从番鸭中分离出鹅细小病毒
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作者 黄安国 《畜牧兽医科技信息》 1995年第7期2-2,共1页
日本某番鸭饲养场暴发疾病,小番鸭呈现绒毛蓬松、脚软和高度的死亡率。用番鸭胚接种病料经几代盲传,从中分离出一种病毒,此病毒对氯仿、PH3.2和65℃加热30分钟有抵抗力。电镜观察到这种病毒呈二十面体立体对称、无囊膜、直径20—22nm。
关键词 鹅细小病毒 日本 立体对称 二十面体 成纤维细胞 死亡率 细胞病变 传代适应 鸭胚 细胞适应
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狂犬病固定毒Vero细胞适应株的建立 被引量:10
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作者 曾蓉芳 陈阿根 +1 位作者 张瑛 黄海武 《病毒学杂志》 CSCD 1990年第3期285-290,共6页
本文报道狂犬病毒Vero细胞适应株建株经过以及对适应株的抗原和免疫原性分析的情况,并推荐“RFD”和“Hs_3”适应株作为狂犬疫苗微载体培养系统的候选毒株。
关键词 狂犬固定毒 VERO细胞 适应传代
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Efficient Scheduling with Random Network Coding in Multi-Relay Wireless Network 被引量:1
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作者 丁良辉 毕琰 +2 位作者 孙大佳 杨峰 钱良 《Journal of Shanghai Jiaotong university(Science)》 EI 2014年第1期59-64,共6页
In this paper, we propose two novel efficient scheduling schemes with network coding in multi-relay wireless network to maximize the transmission efficiency. The first one uses adaptive forwarding with network coding(... In this paper, we propose two novel efficient scheduling schemes with network coding in multi-relay wireless network to maximize the transmission efficiency. The first one uses adaptive forwarding with network coding(AF-NC), in which each relay adaptively calculates the number of packets having innovative information according to the feedback from the sink. With AF-NC, duplicate packets are not sent, and the total number of time slots needed to complete transmission can be significantly reduced. The second scheme, named adaptive forwarding with network coding and retransmission(AFR-NC), combines AF-NC with automatic repeat request(ARQ) to guarantee reliable end-to-end communication with limited resource occupation. Numerical results show that compared with simple forwarding with network coding(F-NC), AF-NC has close successful delivery rate with dramatically less time slots, while AFR-NC achieves strict reliability with limited resource cost. 展开更多
关键词 random network coding SCHEDULING automatic repeat request (ARQ) multi-relay wireless networks
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