茱萸丸调控TMA/FMO3/TMAO通路促进胆固醇逆向转运抗动脉粥样硬化

目的旨在研究茱萸丸对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成的影响及其相关机制。方法采用高脂饲料喂养雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠诱导动脉粥样硬化模型,造模周期为12周。造模成功的47只ApoE^(-/-)小鼠随机分成5组,即模型组10只,茱萸丸低、中、高剂量组各9只,阿托伐他汀钙组10只,以同周龄雄性C57BL/6J小鼠10只作为空白组。空白组与模型组予等体积无菌蒸馏水灌胃,茱萸丸低、中、高剂量组分别给予130.54、261.08、522.16 mg·kg^(-1)灌胃,阿托伐他汀钙组10.40 mg·kg^(-1)灌胃,每日1次,各组小鼠共灌胃12周。给药结束后,采用苏木精-伊红(HE)染色观测主动脉及肝脏病理变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、单核细胞趋化蛋-1(MCP-1)、血管细胞黏附分-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平;生化法检测肝脏总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;超高效液相色谱-质谱联用技术(UHPLC-MS/MS)检测血浆三甲胺(TMA)、氧化三甲胺(TMAO)含量;免疫荧光法检测小鼠肝脏中二甲基苯胺单加氧酶3(FMO3)蛋白的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测肝脏FMO3、腺苷三磷酸结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-B1)、ATP结合盒转运子G5抗体(ABCG5)、三磷酸腺苷结合盒转运体G8(ABCG8)和细胞色素P4507A1(CYP7A1)mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠HE染色可见主动脉内膜大面积增厚,肝脏脂肪变性及炎性浸润严重;血清中ox-LDL、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1升高;肝脏TC、TG、LDL-C升高;血浆中TMA、TMAO水平升高;以及肝脏中FMO3 mRNA与蛋白表达水平升高,ABCA1、SR-B1、ABCG5、ABCG8、CYP7A1 mRNA表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,茱萸丸低、中、高剂量组及阿托伐他汀钙组HE染色随着茱萸丸浓度的增加,斑块富集区域逐渐缩小,肝脏脂肪变性及炎性浸润降低;血清中ox-LDL、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1降低;肝脏TC、TG、LDL-C降低;血浆中TMA、TMAO水平降低;以及肝脏中FMO3 mRNA与蛋白表达水平降低,ABCA1、SR-B1、ABCG5、ABCG8、CYP7A1 mRNA表达水平降低(P<0.01或P<0.05)。结论茱萸丸对小鼠动脉粥样硬化斑块具有较好的治疗作用,其机制可能与调节TMA/FMO3/TMAO脂代谢通路,促进胆固醇的逆向转运和分解有关。

胆汁途径与非胆汁途径胆固醇逆向转运研究新进展

血浆中胆固醇水平升高是引起动脉粥样硬化(AS)及冠心病的主要危险因素。胆汁途径胆固醇逆向转运(RCT)是指外周组织以及巨噬细胞内胆固醇经脂蛋白运输到肝脏,以胆汁形式分泌,并最终通过粪便排出体外的过程。大量研究显示,除胆汁途径RCT之外,还存在非胆汁途径RCT来清除体内过多胆固醇,从而维持体内胆固醇的动态平衡。本文针对不同途径RCT以及各相关转运体、脂蛋白、受体等对RCT调节的最新进展做一综述,以期为胆石症和AS相关疾病的治疗提供新的理论依据和作用靶点。

基于胆固醇逆向转运探讨脾虚对高脂血症的影响及时效关系

目的研究不同时间点脾虚对高脂血症大鼠胆固醇逆向转运相关蛋白表达的影响,探讨脾虚膏脂转输障碍的机制及时效性。方法实验分3个时间点(2周,10周,16周),其中2周为脾虚造模时间,第10周即高脂喂养8周,16周为高脂喂养14周,在2周、10周及16周末分别取材。脾虚组采用饮食不节加力竭游泳的复合方法造脾虚模型。正常对照组、脾虚组喂饲基础饲料,高脂组、脾虚高脂组喂饲高脂饲料,自由摄食,饮水不限。在2周末正常对照组和脾虚组各6只取材。在10周和16周末正常对照组、脾虚组、高脂组、脾虚高脂组各6只取材。全自动生化分析仪检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C含量;间苯三酚法检测大鼠D-木糖排泄率;碘-淀粉比色法检测血清淀粉酶活力;HE染色观察肝脏细胞形态变化;ELISA法检测血清PLTP、LCAT、CETP含量。结果脾虚造模2周后,与正常对照组相比,脾虚组大鼠尿D-木糖排泄率及AMS含量明显降低(P<0.01)。第10周末,与正常对照组相比,脾虚组和脾虚高脂组大鼠尿D-木糖排泄率及AMS含量明显降低(P<0.01)。与脾虚组相比,脾虚高脂组大鼠尿D-木糖排泄率及AMS含量有进一步下降趋势。第16周末,与正常对照组相比,脾虚高脂组大鼠尿D-木糖排泄率及AMS含量明显降低(P<0.01)。第10周末,正常对照组肝细胞核圆、大而居中,细胞索条理清晰,肝窦正常,与正常对照组相比,高脂组和脾虚高脂组大鼠血清TC、TG、LDL-C、PLTP、CETP含量明显升高,HDL-C、LCAT明显降低(P<0.05或P<0.01),肝细胞肿大变圆,脂肪空泡化明显,肝细胞形态异常,肝小叶结构破坏,肝索排列紊乱,胞浆疏松,部分细胞核挤向胞膜,与高脂组相比,脾虚高脂组大鼠血清TC、LDL-C、PLTP、CETP含量明显升高(P<0.05或P<0.01),TG有升高趋势,LCAT含量明显降低(P<0.05),HDL-C有下降趋势,大鼠肝脏组织泡沫化更为严重;第16周末,与正常对照组相比,高脂组和脾虚高脂组大鼠血清TC、TG、LDL-C、PLTP、CETP含量明显升高,HDL-C、LCAT明显降低(P<0.05或P<0.01),肝细胞结构破坏更为严重;与高脂组相比,脾虚高脂组大鼠血清PLTP、CETP含量明显升高(P<0.05),TC、TG、LDL-C含量有升高趋势,HDL-C有下降趋势。且随着造模时间的增加,大鼠血清TC、TG、LDL-C、PLTP、CETP含量有逐渐升高的趋势;HDL-C、LCAT含量有逐渐降低的趋势,肝脏细胞空泡化逐渐加重。结论在脾虚状态动态改变的前提下,脾虚状态可能通过影响RCT反应的相关蛋白的表达加重高脂血症大鼠血脂紊乱以及肝脏脂质沉积。

胆固醇逆向转运过程中新靶点及其药物的研究进展

血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)拮抗动脉粥样硬化(AS)的最主要机制在于参与胆固醇逆向转运(RCT)过程。近年来,将RCT过程中几个重要蛋白质和酶类,包括apoAⅠ,ABCA1,CETP等作为新的用药靶点进行了药物干预的尝试,在调节血脂和预防AS等方面取得了良好的效果,开创了治疗该类疾病的新局面,对下一步的疾病治疗具有重要的指导作用。

小凹及小凹蛋白1:胆固醇逆向转运与炎症应答的共同分子平台

脂质紊乱和炎症反应在动脉粥样硬化的发生发展中发挥了重要的作用。其中胆固醇的逆向转运能力是决定动脉粥样硬化进程与转归的关键。大量文献及研究结果显示,小凹以及小凹蛋白1既在荷脂细胞胆固醇流出中发挥转运中心和关键分子作用,也在炎症反应中发挥介导抗炎的信号转导作用。因此,小凹以及小凹蛋白1可能是荷脂细胞胆固醇逆向转运和炎症应答的共同分子平台。

磷脂转运蛋白在高密度脂蛋白代谢和胆固醇逆向转运中的生物学作用

磷脂转运蛋白(PLTP)活性与糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化等疾病明显相关的作用机制主要与其参与脂蛋白代谢有关。其中最引人注目的是PLTP在高密度脂蛋白(HDL)代谢和胆固醇逆向转运(RCT)中发挥的复杂生物学作用。PLTP可否通过影响HDL和RCT而发挥对动脉粥样硬化的作用?本文通过近年的文献复习并结合我们的相关工作与读者一同寻找答案和线索。

运动与胆固醇逆向转运的研究

规律的运动不仅可预防心血管疾病的发生,还可降低心血管疾病的死亡率。规律运动对心血管疾病的作用,与运动改善高密度脂蛋白代谢有关。高密度脂蛋白是参与胆固醇逆向转运的主要物质。规律运动可通过增加胆固醇的流出、高密度脂蛋白的成熟、增加胆固醇的清除等作用改善脂代谢。

胆固醇流出调节蛋白与胆固醇逆向转运

高密度脂蛋白 (HDL)能从外周细胞摄取多余胆固醇并运输至肝脏排出 ,防止其在血管壁沉积。外周细胞内胆固醇流向HDL的机制一直是人们积极探索但尚未弄清的问题。新近发表在《NatureGenetics》上的三篇论文在这个环节上取得了重大突破 ,他们通过对Tangier病的研究 ,发现由ATP binding cassettetransporter 1基因编码的胆固醇流出调节蛋白 (cholesterol effluxregulatoryprotein)在该过程中起重要作用。该发现使人们对外周细胞胆固醇流出的认识有了实质性突破 ;为新药研制 ,动脉粥样硬化。

动脉粥样硬化患者高同型半胱氨酸血症与胆固醇逆向转运的关系

目的探讨高同型半胱氨酸(high homocysteine, HHcy)对动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)患者血脂和卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin cholesterol acyl transferase, LCAT)的影响。方法选取2018年9月~2019年6月诊断有颈动脉粥样硬化的185例患者作为研究对象。根据患者是否存在HHcy,分为HHcy组和对照组。测定同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)、血脂水平和LCAT浓度,分析Hcy水平与血脂水平及LCAT浓度的相关性。结果 HHcy组高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、载脂蛋白AⅠ(apolipoprotein AⅠ, ApoAⅠ)水平和LACT浓度显著低于对照组,差异均具有统计学意义(t=2.318,2.405,2.484,均P<0.05);HHcy组Hcy水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(t=11.266,P<0.001)。Hcy水平与HDL-C,ApoAⅠ水平和LCAT浓度均呈负相关(r=-0.197,P=0.008;r=-0.212,P=0.006;r=-0.221,P=0.005)。结论 HHcy是AS的一个独立危险因素。HHcy可能通过降低ApoAⅠ,HDL和LCAT水平,影响它们在胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport, RCT)中的作用,从而促进AS的发生与发展。

炎症调控胆固醇逆向转运的机制研究

胆固醇逆向转运（RCT）是促进细胞内胆固醇流出并转运至肝脏进行代谢的过程,其功能异常在动脉粥样硬化（As）的发生发展中起着关键作用。糖尿病、肥胖等慢性代谢性炎症疾病促进As的进展,而体内炎症、脂肪因子参与调控RCT是其重要的调控机制之一。本期专题收集的研究论文和综述探讨了糖基化终末产物Nε-羧甲基赖氨酸、核因子κB（NF-κB）、脂肪因子Visfatin等对细胞内胆固醇流出及介导RCT中关键蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体A1、Sortilin、酯酰辅酶A：胆固醇酰基转移酶（ACAT）等表达的影响,从不同角度阐释慢性代谢性炎症疾病调控RCT和心血管疾病发生发展的分子机制。

同型半胱氨酸通过干扰胆固醇逆向转运促进巨噬细胞泡沫化

目的阐明同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对人类急性单核细胞白血病细胞株(THP-1)源性巨噬细胞泡沫化的影响;探讨肝X受体α(liver X receptorα,LXRα)在同型半胱氨酸所致脂代谢紊乱中的作用。方法以THP-1为研究对象,先后与佛波酯(phorbool-1-myristate-13-acetate,PMA)、氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)共同培养,成功复制泡沫细胞模型,分别加入50、100、200μmol·L-1的Hcy,培养24h,对照组不加入Hcy。利用油红O染色(oil red O,ORO)检测泡沫细胞中性脂滴蓄积情况;利用酶终点法测定细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、游离胆固醇(free cholesterol,FC)、胆固醇酯(cholesterol ester,CE)的含量,观察Hcy对巨噬细胞内脂质含量的影响;利用免疫细胞化学检测泡沫细胞LXRα蛋白表达,利用实时定量聚合酶链反应(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)测定LXRαmRNA表达,观察Hcy对巨噬细胞LXRα表达的影响。结果 ORO染色结果显示,与对照组比较,Hcy浓度越高巨噬细胞内胆固醇的聚集越明显;实验组(Hcy 50、100、200μmol·L^(-1))泡沫细胞计数阳性百分率均较对照组升高(P均<0.05),其中以Hcy 100μmol·L-1组升高明显;在不同浓度Hcy干预下,巨噬细胞内TC、FC及CE含量均高于对照组(P均<0.05);免疫细胞化学结果显示,实验组LXRα蛋白表达均低于对照组(P均<0.05),其中以Hcy 100μmol·L^(-1)组降低最为明显;RT-PCR结果显示,与对照组比较,实验组LXRαmRNA表达下调(P<0.05)。结论同型半胱氨酸能够引起THP-1源性巨噬细胞泡沫化程度增加,使LXRαmRNA低表达导致胆固醇逆向转运障碍是其引起脂代谢紊乱的可能机制之一。

胆固醇逆向转运与胆囊胆固醇息肉形成机制的研究回顾

近年来,随着影像诊断技术的发展,胆囊胆固醇息肉的发现率逐渐提高。本病在国内人群中发病率约为1.35%,占胆囊切除手术病例的5%左右,且有增加趋势。

胆固醇逆向转运关键蛋白介导药物和小分子调控脂代谢的机制研究

胆固醇逆向转运（RCT）异常导致脂代谢紊乱是动脉粥样硬化发病重要环节,探讨介导RCT的关键蛋白在脂代谢中的作用及调控机制对阐明动脉粥样硬化发病的分子机制具有重要意义。本期专题收集的论文探讨了利拉鲁肽、苦瓜素以及生长分化因子11对细胞胆固醇流出及介导RCT中关键蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）、ABCG1和B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响,分别从不同角度阐释RCT关键蛋白参与药物或小分子物质调控胆固醇流出的分子机制。

化痰活血法对ApoE(-/-)小鼠主动脉胆固醇逆向转运相关蛋白表达的影响

目的:观察化痰活血法对ApoE基因敲除[ApoE(-/-)]小鼠主动脉胆固醇逆转运(RCT)主要相关蛋白小凹蛋白-1(caveolin-1)、清道夫受体BI(SR-BI)的影响。方法:4～6周龄ApoE(-/-)小鼠高脂饲料喂养16周后,分为化痰组、活血组、化痰活血组、普伐他汀组和模型对照组;另5周龄正常C57BL/6J家系小鼠10只,高脂饲料喂养16周,设为正常对照组。化痰组灌服小陷胸汤加枳壳水提液2.5 mL/100 g体质量,活血组灌服芎芍胶囊0.05 g/100 g体质量,化痰活血组灌服小陷胸汤加枳壳水提液2.5 mL/100 g体质量+芎芍胶囊0.05 g/100 g体质量,普伐他汀组灌服普伐他汀0.3 mg/100 g体质量;模型对照组及正常对照组均灌服生理盐水1 mL/100 g体质量,连续给药16周。取主动脉常规石蜡切片光镜下观察,测量动脉面积及斑块面积;免疫组化观察caveolin-1、SR-BI表达。结果:在高脂刺激下,ApoE(-/-)小鼠主动脉caveolin-1及SR-BI表达均有所增加(P<0.01);普伐他汀组、化痰组、活血组及化痰活血组均可显著提高ApoE(-/-)小鼠主动脉caveolin-1及SR-BI的表达,组间比较显示化痰活血组caveolin-1及SR-BI表达显著高于单纯化痰组和活血组(P<0.05,P<0.01)。活血、化痰以及活血化痰三种治法均可显著减缓ApoE(-/-)小鼠主动脉粥样硬化病变程度,效果与普伐他汀相当。结论:活血、化痰或活血化痰法均可提高caveolin-1和SR-BI的表达,促进RCT过程,减少ApoE(-/-)小鼠主动脉粥样硬化斑块形成,其中活血化痰组在促进胆固醇逆向转运方面优于单纯活血组或化痰组。

小分子药物调控胆固醇逆向转运机制的研究进展

本文从小分子药物调控胆固醇逆向转运机制的视角,介绍胆固醇逆向转运关键蛋白参与小分子药物调控胆固醇外流和脂质代谢机制的最新研究进展,探讨不同化学结构类型小分子药物对介导胆固醇逆向转运不同药靶蛋白表达的影响,从药理学的研究角度提供开展胆固醇逆向转运相关研究新的思维模式。

胆固醇逆向转运和动脉粥样硬化

以前的研究认为血浆中HDL始终与动脉粥样硬化代表的心血管事件呈负相关。近年来高水平HDL抗动脉粥样硬化的观点遭到质疑,临床实验中多种升高HDL药物均未显著减少心血管事件的发生,过量LDL仍是动脉粥样硬化的危险因素,但不再单纯强调升高HDL水平,而是将HDL控制在合理范围内。基础研究中HDL在胆固醇逆向转运过程中重要作用不容否定,本文将从HDL逆向转运和动脉粥样硬化的关系进行综述。

过氧化体增殖物激活型受体α的激活与胆固醇逆向转运

胆固醇逆向转运是周围细胞胆固醇转运至肝脏转化、清除的重要生理过程。研究证实 ,胆固醇逆向转运实际上是高密度脂蛋白在多种生物活性分子参与下 ,由新生前 β 高密度脂蛋白到成熟α 高密度脂蛋白递变的过程。过氧化体增殖物激活型受体α是一种核内受体转录因子 ,具有多种生物学效应 ,其激活后可影响决定高密度脂蛋白结构和功能的基因表达 ,从而调节胆固醇逆向转运过程。

妊娠期高脂血症孕妇高密度脂蛋白胆固醇逆向转运功能的变化

目的观察妊娠期高脂血症孕妇的高密度脂蛋白(HDL)胆固醇逆向转运功能的变化。方法选取21例妊娠期高脂血症孕妇、21例妊娠期正常孕妇,采用ELISA法检测其血清HDL胆固醇逆向转运功能指标腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、载脂蛋白A1(ApoA-1)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)、胆固醇酯转移蛋白(CETP),并进行对比分析。结果妊娠期高脂血症孕妇血清ABCA1、Apo A-1、LCAT、CETP水平分别为(1.19±0.68)ng/mL、(0.80±0.62)μg/mL、(0.92±0.30)μmol/L、(621.48±320.31)ng/mL,妊娠期正常孕妇血清ABCA1、ApoA-1、LCAT、CETP水平分别为(2.30±1.56)ng/mL、(2.18±1.78)μg/mL、(2.19±1.87)μmol/L、(968.94±714.97)ng/mL,两者各指标相比,P均<0.05。结论妊娠期高脂血症孕妇的HDL胆固醇逆向转运功能下降,是妊娠期高脂血症的发病机制,血清ABCA1、Apo A-1、LCAT、CETP可以作为妊娠期高脂血症的生物标志物。