A型肉毒毒素关节腔注射对佐剂性关节炎疼痛大鼠背根神经节中降钙素基因相关肽表达的影响

目的观察A型肉毒毒素（BoNT-A）关节腔注射对佐剂性关节炎疼痛大鼠镇痛效果与背根神经节（DRG）中降钙素基因相关肽（CGRP）表达的关系，并检测其逆向轴浆运输的情况。 方法SD大鼠90只按随机数字表法分为A、B、C、D和E五组，每组18只大鼠。分组后A组注射50μL生理盐水作为对照组，而B、C、D、E组大鼠左后肢踝关节腔注射50μL完全弗氏佐剂（CFA）建立佐剂性关节炎疼痛模型作为模型组。建模3周关节炎疼痛模型逐渐稳定后，A组和B组大鼠关节腔内注射20μL生理盐水，而C、D和E组大鼠关节腔内注射不同剂量20μL的BoNT-A，即A组为对照组＋关节腔内注射20μL生理盐水；B组为模型组＋关节腔内注射20μL生理盐水；C组为模型组＋关节腔内注射1U的20μL BoNT-A；D组为模型组＋关节腔内注射3U的20μL BoNT-A；E组为模型组＋关节腔内注射10U的20μL BoNT-A 。分别于造模前、造模后1、5、14和21d和给药后1、3、5和14d，对各组大鼠进行机械痛阈和肌力评分测试；应用免疫印迹和免疫荧光法观察DRG中CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数变化，以及观察BoNT-A的水解产物裂解的突出相关蛋白-25kDa（cl-SNAP-25）是否存在于DRG中。 结果与A组相比，B、C、D、E组大鼠的机械痛阈值和肌力评分均显著降低（P〈0.001），大鼠DRG中的CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数均显著增加（P〈0.001）；与B组相比，BoNT-A注射5d后D组和E组大鼠的机械痛阈显著提高（P〈0.001），而14d后C组的机械痛阈亦显著提高（P〈0.01）；BoNT-A注射3d后,D组和E组大鼠DRG中的CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数显著降低（P〈0.01），C组14d后DRG中的CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数显著降低（P〈0.01）；D组与E组相比,机械痛阈、CGRP蛋白表达水平和阳性细胞数组间差异均无统计学意义（P〉0.05）；与B组相比，C组和D组肌力评分组间差异均无统计学意义（P〉0.05）；E组BoNT-A注射5d后，肌力评分显著下降（P〈0.001）；免疫荧光检测到DRG中存在cl-SNAP-25。 结论BoNT-A通过减少DRG中CGRP的表达，减轻关节炎疼痛且存在剂量依赖性；BoNT-A可以通过逆向轴浆运输到达DRG。