苦参生物碱的高速逆流色谱法制备研究——色谱参数和仪器参数的最佳化

应用新型的液液分配技术——高速逆流色谱法 (High Speed Counter- current Chromatography,HSCCC)对苦参生物碱类成分的分离制备进行探讨。选用氯仿 -磷酸 -磷酸钠缓冲液 (p H6 .2 0 )溶剂系统 ,经正交试验确定了HSCCC的最佳运行参数 ,将苦参粗提物分离得到 6个固态收集物 ,经 TL C4种不同展开系统证实其中有一个为单一组分。实验表明 ,HSCCC法是一种高效、简便的分离制备中草药有效成分纯品的新方法。

高速逆流色谱法分离茶叶中的生物碱

以氯仿－甲醇－磷酸二氢钠缓冲液（２３ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ５．６）（体积比４∶３∶２）为溶剂系统，上相为固定相，下相为移动相，从茶叶的总生物碱中分离出三个成分，其中一个是咖啡碱，一个是茶碱，另一个待定。将分离结果与ＴＬＣ分离结果相比较，证实了高速逆流色谱法的有效及实用性。

高速逆流色谱法分离β-谷甾醇和菜油甾醇的研究

利用高速逆流色谱法 ,并选用V(庚烷 )∶V(乙腈 )∶V(乙酸乙酯 ) =5∶5∶1溶剂体系 ,成功地分离了混合植物甾醇标准品中的 β 谷甾醇和菜油甾醇。经过HPLC检测 ,一次性分离可得到质量分数为 97%的 β 谷甾醇和质量分数为 91%的菜油甾醇产品 ,收率分别可达 5 6 %和 5 0 %。该方法简便、重现性好 ,可作为高纯度 β

高速逆流色谱法分离制备大豆异黄酮中的大豆苷和染料木苷

采用高速逆流色谱法分离纯化大豆异黄酮中的大豆苦和染料木昔。溶剂系统为乙酸乙酯一醋酸一水,体积比为5:1:10,上相为固定相,下相为流动相,逆流色谱仪转速为800r/mm,流速为1.5ml/min。所得大豆昔、染料木昔经高效液相色谱分析测定,纯度分别达到98.2%和99.2%(面积归一法)。

高速逆流色谱法分离附子中的15-a-羟基新乌碱

采用高速逆流色谱法对附子中的化学成分进行研究,分离得到了15 α 羟基新乌碱单体。溶剂系统为氯仿-甲醇-盐酸(0.3mol L)=4∶3∶2,上层为固定相,下层为流动相。流速1.8mL min,转速850r min。并对其结构进行了鉴定。

高速逆流色谱法对刺五加有效成分刺五加苷E的分离制备

采用高速逆流色谱法分离纯化刺五加粗品中的刺五加苷E。溶剂系统为氯仿 甲醇 异丙醇 水,体积比为5∶6∶1∶4,上相为固定相,下相为流动相,转速为800r/min,流速为2 0mL/min。所得刺五加苷E经高效液相色谱分析,测定纯度为98%(峰面积百分比)。这为其他苷类等极性物质的分离纯化提供了依据。

正交轴逆流色谱法分离标准蛋白质及实际样品

以m(质量分数为 12 .5 %的PEG80 0 0 )∶m(质量分数为 2 5 %的磷酸氢二钾 ) =1∶1或m(质量分数为 12 .5 %的PEG80 0 0 )∶m(质量分数为 30 %的磷酸氢二钾 ) =1∶1为溶剂系统 ,用下相作流动相 ,上相作固定相 ,操作时采用5 0 0r/min的转速和 6 0mL/h的流动相流速 ,考察了正交轴逆流色谱法对标准蛋白质及羊肚菌糖蛋白和枸杞糖肽的分离情况。将结果与高效液相色谱分离结果相比较 ,前者在分离度损失不大的基础上提高了进样量 ,证明了其用于制备的有效性 。

高速逆流色谱法在天然药物研究中的应用概况

高速逆流色谱法(HSCCC)是最近20多年发展起来的一项液-液分配色谱技术,由于其具有不需任何固态支撑的特点,在分离天然产物方面具有很多优势,因此被广泛应用。本文介绍了高速逆流色谱的原理和溶剂体系的选择,对其在天然产物分离中的应用以及进一步的发展前景进行论述。

芦荟甙和芦荟大黄素的高速逆流色谱法分离纯化

应用高速逆流色谱法从芦荟生药中一次性分离得到芦荟甙 (纯度 99.99% )和芦荟大黄素 (纯度 95 .83% ) ,分别达到定量和鉴别用化学对照品要求。

正交轴逆流色谱法对标准蛋白及中等分子量大豆肽的分离

本文报道分别以12.5%PEG8000 25%磷酸氢二钾(质量比1∶1)的溶剂系统,以及正丁醇∶三氟乙酸∶水(120∶1∶160,V/V)的溶剂系统,用下相作流动相,上相作固定相,采用500r/min的转速和1mL/min流动相流速对标准蛋白质及大豆肽进行分离。在分离度损失不大的基础上提高了进样量,证明了正交轴逆流色谱法用于制备的有效性。为采用正交轴逆流色谱法分离制备天然生物肽提供了可选择的方法。

高速逆流色谱法分离当归挥发油中有效成分藁本内酯及其气相色谱-质谱法的分析和鉴别

提出了应用高速逆流色谱从当归挥发油中分离有效成分藁本内酯,探索这一分离条件的关键是两相溶剂体系的选择。根据分离目标物的极性以及选择两相溶剂应满足的3个条件((1)分层时间不超过30s;(2)对样品不引起分解;(3)目标成分的分配系数在0.5～2.0之间),经薄层色谱法及高效液相色谱法预选,最终从几种溶剂体系中筛选得到两相溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水(1+1+1+1)体系。采用这一溶剂体系,一次进样500mg当归挥发油,可达到目标组分与其他杂质完全分离,目标组分回收后得到48mg藁本内酯。对此分离所得组分经气相色谱-质谱法(GC-MS)分析,其纯度达到98.5%以上,GC-MS还对此组分进行结构鉴定,证明其确为藁本内酯。

高速逆流色谱法纯化糖厂混合汁浮渣中的黄酮类物质

通过溶剂萃取从糖厂混合汁浮渣中获得黄酮粗品,采用高速逆流色谱对黄酮粗品进行分离纯化,基于正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水(体积比1;0.6:0.6:1)溶剂体系的选用,经高效液相色谱法检测,可以从黄酮粗品中制备含量达90.60%的芦丁类似物。

高速逆流色谱法在中药有效成分分离中的应用

综述近几年来高速逆流色谱法在中药有效成分分离方面的研究进展。

高速逆流色谱法分离制备抱茎獐牙菜中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷

[目的]建立抱茎獐牙菜(Swertia franchetiana H.Smith)中分离制备龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的高速逆流色谱法。[方法]采用溶剂系统为氯仿∶甲醇∶水=4∶4∶2(V/V/V);上相为固定相,下相为流动相;上下相超声波脱气20min;转速850r/min;流动相流速2ml/min;检测波长254nm。所得产物用旋光仪测定其旋光度,计算其比旋光度,进行纯度鉴定。[结果]从100mg抱茎獐牙菜粗提物中得到龙胆苦苷14mg,獐牙菜苦苷27mg。测得龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的比旋光度[a]Dt分别为-196.3°和-126.6°,纯度较高。[结论]该研究可为用高速逆流色谱法大量制备龙胆苦苷和獐牙菜苦苷提供可行的方法。

高速逆流色谱法分离纯化甘草查尔酮甲和胀果香豆素甲

采用高速逆流色谱法,从胀果甘草的乙醇粗提物中分离纯化甘草查尔酮甲和胀果香豆素甲。甘草查尔酮甲和胀果香豆素甲的结构用1H-NMR、13C-NMR、UV、FTIR和EI-MS鉴定。纯度用HPLC方法测定,采用归一化计算。分离采用的溶剂系统为正己烷-氯仿-甲醇-水(5:6:3:2),上相做固定相,下相做流动相,流动相流速为1.8 mL／min,甘草查尔酮甲和胀果香豆素甲的纯度分别为95.0％和98.8％。纯化采用的溶剂系统为正己烷-氯仿-甲醇-水(1.5:6:3:2),上相做固定相,下相做流动相,流动相流速为1.5 mL／min。纯化后甘草查尔酮甲和胀果香豆素甲的纯度分别为99.1％和99.6％。该方法操作简单,费用低廉,重现性好,可做为高纯度甘草查尔酮甲和胀果香豆素甲化学对照品的制备分离方法。

高速逆流色谱法分离茶叶中的儿茶素

儿茶素是茶叶中主要的生理活性成分,由6种左右的单体组成.早期的茶儿茶素单体的制备方法主要有三种:(1)1959年L.Vuataz报道的纤维素柱色谱法;(2)1969年J.David报道的逆流分配法;(3)C.K.Wilkns报道的Sephedex LH—20柱色谱法.近期的儿茶素单体制备方法基本采用1989年“F.Yuyabe报道的 Sephedex—LH预分离一HPLC二次分离法.以上儿茶素单体的制备方法均因操作繁琐,耗时长或设备材料昂贵而无法转化为工业化生产.高速逆流色谱法是80年代发展起来的新技术,其特点是设备成本低,操作简单,分离效率高,且完全克服了使用固体吸附材料造成的样品不可逆吸附或降解等缺点.本实验就用高速逆流色谱技术实现茶儿茶素混合物的克量级分离制备作一探讨.

高速逆流色谱法分离和测定甾体激素

用自制的高速逆流色谱仪分离丙酸睾丸素和氢化可的松注射剂.以氯仿-甲醇-水为溶剂体系及优化的色谱条件,对样品组分作了有效的分离.以苯甲酸为内标,获得令人满意的定量结果,标准偏差个于0.8%.

高速逆流色谱法(HSCCC)分离制备香水莲花中的柚皮素

采用高速逆流色谱法对香水莲花中的黄酮类化合物进行了分离,溶剂系统为正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水(体积比1∶1.2∶2∶1),上层为固定相,下层为流动相,流速2.0 mL/min,转速830 r/min,检测波长280 nm,进样量300 mg,分离出80 mg化合物C,经HPLC测定纯度>98.6%,根据UV光谱、MS分析及1H-NMR、13C-NMR图谱分析结果,化合物C鉴定为柚皮素,该化合物为首次从该植物中分离得到,为香水莲花的开发应用提供了理论依据。

高速逆流色谱法分离纯化丁公藤中东莨菪内酯

目的探讨高速逆流色谱法(HSCCC)分离丁公藤中东莨菪内酯的可行性及工艺。方法用纯甲醇超声萃取三次,得到丁公藤粗提物,再用HSCCC技术分离得到高纯度的东莨菪内酯。结果正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统(体积比为3.0∶5.0∶3.5∶5.0)具有较好的分离效果;较佳工艺条件为:转速850 r/min、流动相流速2 mL/min和水浴温度25℃。结论采用HSCCC技术分离得到的东莨菪内酯样品经高效液相色谱法检测,纯度可达98.04%。