公众参与方式与社会转型中的“逆转型”现象——以Y市政府搬迁中的公众参与为例

以Y市政府搬迁为例,探讨了地方政府如何通过"动员式公众参与"的方法推动完成了迁市过程,也引发"社会逆转型"危机。与中国绝大多数地区经历的转型过程相反,Y市的社会转型呈现出了一种"逆转"的现象,即从以工业为主的现代社会形态向以农业生产加工为主体的农业社会转变。Y市案例提示我们,在制定公共政策方面需要实现彻底的转型,即从政治动员式公众参与向权利性公众参与的转型。这种转型的完成不仅需要公众公民意识的觉醒,更需要将社会政策、政策制定者和公众带入公共领域,实现社会学知识范式的转换。

F波尖端逆转型心房扑动一例

心房扑动F波于同一患者的不同时期尖端方向可发生变化,但在同次、同导联中F波发生逆转者较为少见,现将一例报导如下: 患者,男性,46岁。1985年11月4日门诊拟诊为病态窦房结综合征。来我科做心电图示:窦性心律,68次,频发房性旱搏,部分未下传(呈三联律),短阵性心房扑动。avF导联清晰可见第一个心搏为窦性搏动,P波直立,P～R间期:0.13秒;其后出现一系列规整的扑动波(F波),F波尖端向上,频率:250次,呈2:1～3:1房室传导;

试论鲁迅笔下的“逆转型”孤独者──兼谈创作主体的深层意识

本文认为，鲁迅知识分子题材小说中存在一类逆转型孤独者形象，他们在社会现实中处于先觉者和被压迫者的尴尬位置，有着无法避免的悲剧命运和悲凉心态。他们身上体现出一种“绝望的抗争”精神。“绝望”体现的是鲁迅思想的深刻和清理，“抗争”显示了鲁迅执着于现世和勇于自我牺牲的伟大人格。

假型逆转录病毒载体高效介导兔平滑肌细胞基因转染

目的构建假型逆转录病毒载体MuLV／VSV-G，并用于转染兔平滑肌细胞，为兔平滑肌细胞基因转染寻找一种高效的载体。方法构建含有报道基因lacZ的假型逆转录病毒载体MuLV／VSV—G，测定滴度，并转染兔平滑肌细胞，观察其转导效率。并与MuLV的转导效率进行比较。结果构建的MuLV／VSV-G载体，病毒滴度为6～7．8×10^6CFU，转染兔平滑肌细胞的效率是（92±12）％。而MuLV的转导效率为（24土5）％。结论成功构建了假型逆转录病毒载体MuLV／VSV-G载体，该载体作为一种高效的载体可用于兔平滑肌细胞基因转染。

艾滋病毒1型逆转录酶抑制剂的小鼠血清活性动态研究

目的:观察艾滋病毒1型逆转录酶(HIV-1RT)抑制剂在小鼠血清中的活性动态,探讨其在药效评价中的可应用性。方法:不同途径给予小鼠已知和未知HIV-1RT抑制剂后,在不同时间取血分离血清,体外测定血清抑制 HIV-1RT的活性。结果:正常小鼠血清有非特异性抑制HIV-1RT的活性,经稀释后可排除;非核苷类RT抑制剂可在体外直接测定小鼠体内用药后的血清抑制HIV-1RT活性和动态,核苷类RT抑制剂的血清抗HIV-1RT的活性可测出,但血清活性不如非核苷类药物为高,主要因核苷类药物的活性物质是其三磷酸盐,在细胞内转化后形成。此种体外测定小鼠用药后血清活性的体内体外结合的实验方法,简便快速,可初步分析药物与血清蛋白的结合率以及估算其生物利用度和清除率。结论:体内与体外相结合的逆转录酶抑制剂的小鼠血清活性的测定方法,可应用于非核苷类HIV-1RT抑制剂的药效评价,对于核苷类HIV-1RT抑制剂,取血时间要长,并同时测定血清在细胞内的活性,以便综合分析。

假型逆转录病毒载体介导的tPA转染对平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨假型逆转录病毒载体VSV-G/MuLV介导组织纤溶酶原激活物(tPA),lacZ基因转染兔平滑肌细胞(SMCs)后基因的表达和对SMCs增殖的效应.方法:利用携带tPA,lacZ基因的假型逆转录病毒载体VSV-G/MuLV分别转染兔SMCs(SMCs/tPA,SMCs/lacZ).通过检测tPA抗原和测定tPA的活性观察tPA基因的表达.通过x-gal染色检测β-gal的活性测定lacZ基因的表达.用放射性标记的脱氧胸腺嘧啶苷(3H-TdR)掺入法和细胞计数法测定SMCs的增殖.结果:在没有纤溶酶原时,SMCs/tPA与SMCs在增殖上无显著差异.在有纤溶酶原时,SMCs/tPA条件培养基诱导了SMCs增殖.结论:VSV-G/MuLV介导tPA,lacZ转染到SMCs并成功表达.tPA基因转染在纤溶酶原存在的条件下促进了SMCs的增殖.

携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体的构建与鉴定

目的 :构建携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,采用平末端连接法获得含人TGFβ1cDNA3’ -端活性肽编码基因正、反向插入的重组病毒质粒 ,脂质体介导转染包装细胞PA317,获得含TGFβ1正、反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ-AS ,感染NIH3T3细胞 ,测定病毒滴度。分别转染膀胱癌EJ细胞 ,通过Southern -blot和半定量RT -PCR方法评价载体整合及表达效率。结果 :pRevTβ、pRevTβ-AS载体病毒滴度分别为0.84、0.88×105CFU/ml,EJ细胞外源基因的整合率为100 %,正、反义基因转染细胞内TGFβ1mRNA的相对转录水平为1.89和0.35。结论 :构建的携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体符合细胞体外转染要求 ,能与肿瘤细胞高效整合 ,有效表达。

复制缺陷型人泡沫逆转录病毒载体构建和外源基因表达

在人泡沫逆转录病毒 (humanfoamyvirus ,HFV)原病毒全长克隆pHRSV13的基础上 ,缺失病毒基因组的env基因和bel基因 ,构建了一个表达标记基因neo和报道基因 gfp的重组人泡沫病毒载体质粒pGPSNI GFP。在与辅助质粒 p△GP共转染情况下 ,得到复制缺陷型的重组病毒颗粒GPSNI GFP。该病毒颗粒可以感染多种宿主细胞 。

假型逆转录病毒高效介导人乳腺癌细胞基因转移

目的 :探索假型逆转录病毒MuLV/VSV G在乳腺癌细胞基因转导的效率 ,为乳腺癌细胞基因转导找寻一种高效的载体。方法 :将含报道基因的假型逆转录病毒MuLV/VSV G转导入人乳腺癌MDA MB 435细胞 ,观察其转导效率 ,并与MuLV的转导效率进行比较。结果 :MuLV/VSV G的转导效率达 (92± 12 ) % ,MuLV的转导效率为 (2 4±5 ) % ,前者较MuLV转导效率提高 3.8倍。结论 :假型逆转录病毒MuLV/VSV G可作为一种高效的载体广泛应用于乳腺癌的基因治疗研究。

猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立

目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间。采取GST树脂纯化目标蛋白,包被磁珠,建立流式免疫荧光微球检测技术,用于临床样本的检测。结果重组蛋白以可溶的上清液进行表达,诱导的最佳时间为4 h。包被磁珠后,成功建立流式免疫荧光微球检测技术,对阳性血清稀释81倍仍可检测为阳性,对猴类其他病原的阳性血清无交叉反应,特异性强,与ELISA法同时对24份临床样本进行检测,其中3份样品的流式免疫荧光微球检测结果为阳性,ELISA检测结果为2份阳性,1份阴性,两种方法的检测结果符合率为96%。结论成功表达猴D型逆转录病毒p27蛋白,并运用该蛋白建立了灵敏度高,特异性强,样本需求少的流式免疫荧光微球检测技术,为后续推广应用多重流式免疫荧光微球检测技术奠定了基础。

猴D型逆转录病毒血清抗体检测方法的比较研究

本文比较了酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光试验(IFA)、斑点酶免疫试验(DEIA)3种方法检测猕猴SRV抗体的情况。结果表明,DEIA的阳性检出率最高,IFA的阳性检出率最低。比较了3种方法的优缺点:ELISA的敏感性比DEIA低,但特异性明显高于DEIA,ELISA完成一个样品的检测所用酶结合物的量和所费时间都比DEIA少。IFA的特异性比ELISA高,但结果判断不易掌握,需经过专门训练的人员操作。因此,本中心以ELISA和IFA作为猴群的常规监测方法,先以ELISA进行初检,视结果情况作IFA复检。

猴D型逆转录病毒P27基因的表达、纯化及重组蛋白的鉴定

根据GenBank上已发表的猴D型逆转录病毒SRV-2株基因组序列设计合成了一对特异性引物,通过PCR扩增出P27基因。将扩增出的片段克隆到原核表达载体pBAD/Thio-TOPO上,通过序列分析证实该片段与猴D型逆转录病毒SRV-2株P27基因序列一致。将阳性重组质粒转化至大肠杆菌T0P010中,用阿拉伯糖诱导表达,表达的融合蛋白进行SDS-PAGE和WesternBlot分析,并用proBondTM柱在天然状态下进行纯化。结果表明,表达的融合蛋白分子量约为50KDa,其大小与预期相符。

中国猕猴D型逆转录病毒(SRV)感染猴体的病理学改变

1990年3月,我们用从中国猕猴分离到的猴D型逆转录病毒(SRV)感染3只幼龄恒河猴(90101、90102、90103),接种后23～60d,3只感染猴出现全身淋巴结病、脾脏肿大、中性白细胞减少症等。其中1只实验猴(901O3)在接种后354～489d,间断出现抽搐、强直及四肢痉挛等神经系统症状。经678d观察后处死,3只实验猴淋巴网状内皮组织显微镜下观察显示典型的猴艾滋病(SAIDS)病理改变;1只实验猴(90103)还显示有大脑脱髓鞘、噬神经细胞现象和神经细胞缩裂死亡等病理改变。

猴D型逆转录病毒和猴艾滋病

1983年在加里福利亚和新英格兰灵长类研究中心先后发现了与人艾滋病的表现相似的猴艾滋病(Smian AIDS,SAIDS)(Letvin et al.,1983;Henrickson et al.,1983)。引起SAIDS的病原体有猴艾滋病D型逆转病毒(Simian AIDS Type D)Retrovirus,SRV)和猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodefiency Virus,SIV)。

猕猴群D型逆转录病毒感染的控制与猕猴资源的保护和利用

猕猴群Ｄ型逆转录病毒感染的控制与猕猴资源的保护和利用贲昆龙（中国科学院昆明动物研究所）猴获得性兔疫缺陷综合征（ＳＡＩＤＳ）简称猴艾滋病，是一种严重危害猴类的疾病，它的传播可影响灵长类资源的保护和在生物医学中的合理利用。已有文献报道，一旦猴艾滋病传入易...

猴D型逆转录病毒(SRV)感染恒河猴诱导脑细胞凋亡

收集1990-03用我所首次在国内分离到的猴D型逆转录病毒(SRV)接种3只幼龄恒河猴(90101、90102、90103),经678d观察后处死的病理组织标本进行组织病理学观察。结果显示,3只实验猴网状内皮组织显微镜下呈现典型猴艾滋病(SAIDS)病理改变。其中1只实验猴(90103)的大脑组织除有片状变性坏死外,神经元周围星形胶质细胞和血管周围小胶质细胞还表现有明显的增生和凋亡,H.E形态以核浓缩的为主。

国内部分地区猴场猴D型逆转录病毒血清学调查

为了解国内不同地区猴场猴D型逆转录病毒(simian type D retrovirus,SRV)感染情况,采集广东、云南、海南、广西、河南境内主要猴场的实验猴血清752份,通过ELISA法检测SRV抗体,评估不同猴场感染情况。结果显示:受检样本总阳性率为5.19%,繁殖单元阳性率为16.15%。不同地区猴场实验猴群的感染率存在一定差异,其中云南实验猴感染率最高,样本和繁殖单元阳性率分别为13.50%和46.15%;其次是海南猴场实验猴,样本和繁殖单元阳性率分别为5.00%和17.65%;广东省两家猴场的感染率较低,样本阳性率分别为2.50%和1.00%,繁殖单元阳性率分别为12.90%和5.00%;广西与河南猴场未检出SRV阳性。不同猴种的感染率有明显差异(P<0.05),恒河猴样本和繁殖单元阳性率分别为11.64%和35.29%,而食蟹猴分别为2.31%和9.38%。结果表明,SRV在国内人工饲养猴群中感染较普遍,部分地区感染较为严重,尤其是恒河猴,应采取措施加强对猴场SRV流行的控制。

猴D型逆转录病毒p27基因的克隆表达及诊断价值评价

目的 克隆表达猴D型逆转录病毒（SRV） p27基因,评价其诊断价值.方法 PCR扩增p27基因片段,定向克隆至原核表达载体pET-28b（＋）,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta （DE3）中诱导表达,利用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定,目的蛋白经镍柱亲和层析纯化后用ELISA方法评价其诊断价值.结果 重组质粒转化宿主菌后在37℃,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓-度为0.5 mmol/L的条件下诱导4h,可溶性p27蛋白表达量最大,且具有免疫学活性.纯化后测定融合蛋白浓度为2.043 g/L,纯度93.3％,以融合蛋白为诊断抗原包被ELISA板检测3份标准阳性血清和22份阴性血清,检出率为100％.结论 p27基因成功表达并具有良好的反应原性,可作为猴D型逆转录病毒血清学检测的候选抗原.