表达HIF1α与EGFP融合蛋白的重组逆转录病毒载体构建及鉴定

目的 构建表达人缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)与EGFP融合蛋白的重组逆转录病毒载体,并观察其对 NIH3T3 细胞感染效率。方法 采用基因工程技术,将HIF 1α基因片段克隆至逆转录病毒载体 pLEGFP N1上,鉴定后用脂质体法转染 PT67细胞包装、扩增,最后用重组逆转录病毒感染NIH3T3细胞。其中采用PCR方法对重组病毒进行鉴定,利用绿色荧光蛋白作为报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测。结果 酶切、测序及 PCR结果与 HIF 1α基因重组逆转录病毒载体的预期结果一致,病毒滴度达1.2×106 pfu/ml,并对NIH3T3细胞有强感染能力。结论 应用基因工程技术,成功构建了表达HIF 1α与EGFP融合蛋白的重组逆转录病毒载体,为应用于治疗性血管生成创造了条件。

表达E2F1小干扰RNA的逆转录病毒载体的构建

目的 :建立一个表达E2F1小干扰RNA的靶向抑制E2F1表达的重组逆转录病毒载体。方法 :通过重组DNA技术 ,将设计好的两条互补寡核苷酸片段退火后与载体连接 ,利用载体上的BglⅡ和EcoRⅠ位点进行双酶切初步鉴定 ,重组载体应产生 3 3 2bp和 6182bp两个片段 ,选择酶切正确的重组载体进行测序 ,保证siRNA的方向和序列正确。结果 :表达siRNA的重组逆转录病毒载体构建成功。结论 :重组逆转录病毒载体的成功构建为下一步基因治疗的研究奠定了基础。

胰岛素样生长因子-1逆转录病毒表达载体的构建及其在大鼠胚胎神经干细胞中的表达

目的:构建胰岛素样生长因子-1(IGF-1)逆转录病毒表达载体,并观察转IGF-1基因的鼠胚胎神经干细胞(NSC)体内外基因表达情况。方法:通过酶切和连接的方法将IGF-1基因克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN中,感染包装细胞后收集病毒颗粒再感染从胎龄14d的SD大鼠全脑组织中分离出的NSC,RT-PCR检测IGF-1的mRNA,免疫组织化学法检测IGF-1蛋白的表达,并用立体定向法将Brdu标记的转基因NSC移植到大鼠大脑中动脉梗死模型的纹状体缺血半暗区,免疫染色观察移植后1周转基因NSC在脑内的基因表达情况。结果:酶切及序列分析证实重组逆转录病毒载体pLX SN-IGF-1构建正确,RT-PCR能检测到转基因IGF-1的mRNA,免疫组织化学法能检测到IGF-1在转染了逆转录病毒的NSC及其子代细胞内表达,转基因NSC移植后1周在宿主脑内迁徙并表达IGF-1基因产物。结论:成功构建了携带IGF-1基因的逆转录病毒载体,转染了重组逆转录病毒载体的NSC可在体内外表达IGF-1。

可溶性转化生长因子β_1Ⅱ型受体逆转录病毒表达载体对人肝细胞凋亡的抑制作用

目的构建表达人转化生长因子-β1(TGF-β1)Ⅱ型受体细胞外结合区和人IgG1Fc的融合蛋白逆转录病毒载体,并研究重组质粒pL(TβRⅡ-IgG1Fc)SN是否拮抗外源性TGF-β1诱发的肝细胞凋亡,从而为该载体对于肝纤维化的临床应用提供理论依据。方法(1)以RT-PCR法扩增目的基因TβRⅡ-IgG1Fc,扩增产物纯化后克隆至测序载体pGEM-T-Easy,挑取阳性克隆酶切鉴定后测序;利用重组DNA技术,将TβRⅡ-IgG1Fc基因亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN中,重组质粒pL(TβRⅡ-IgG1Fc)SN在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,测定病毒滴度。(2)以人正常肝细胞HL-7702为靶细胞,将细胞分为空白对照组、TGF-β1组、载体组、TGF-β1+载体组。用TUNEL原位标记法和流式细胞仪对各组细胞凋亡率进行检测。结果(1)经测序、限制性酶切分析及PCR方法鉴定,载体插入基因序列、大小、位置均正确无误,并用PA317细胞进行包装、病毒滴度测定、筛选,建立具有较高滴度的感染性重组病毒产生细胞系。(2)TGF-β1组TUMEL阳性细胞明显多于其他各组,而TGF-β1+载体组和空白对照、载体组细胞相比,差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪分析结果显示,与其他各组细胞相比,TGF-β1组细胞碎片占细胞总数的百分比明显增加,而加入载体后细胞周期的比例、凋亡率和正常对照组相比没有明显变化。结论成功构建的重组质粒pL(TβRⅡ-IgG1Fc)SN可有效的阻断外源性TGF-β1诱导肝细胞凋亡的作用,提示该载体可望为肝纤维化的基因治疗提供有效途径。

人HIF1α基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定

目的 构建人缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)基因重组逆转录病毒载体 ,并观察其对NIH3T3细胞感染效率。方法 采用基因工程技术 ,经过 2次亚克隆将HIF 1α基因片段克隆至含IRES EGFP逆转录病毒载体上 ,鉴定后用脂质体法转染PT67细胞进行包装、扩增 ,最后用重组逆转录病毒感染NIH3T3细胞。其中采用PCR方法对重组载体进行鉴定 ,利用绿色荧光蛋白作为报告基因 ,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果 酶切鉴定及PCR结果与HIF 1α基因重组逆转录病毒载体的预期结果一致 ,病毒滴度达 ( 1 4× 10 6pfu/ml) ,并对NIH3T3细胞有强感染能力。结论 应用基因工程技术 ,成功构建了含人HIF 1α基因重组逆转录病毒载体 。

逆转录病毒载体介导的RNAi抑制MCF-7细胞E2F1蛋白表达的研究

目的采用逆转录病毒载体介导的RNAi技术靶向抑制乳腺癌细胞MCF-7E2F1蛋白的表达。方法构建重组的表达E2F1siRNA的逆转录病毒载体，将重组载体和空载体转染入MCF-7细胞中，筛选出稳定转染的单克隆细胞扩大培养，应用Western Blot方法检测各组细胞E2F1蛋白的表达情况。结果筛选出4个转染逆转录病毒载体的单克隆，命名为SIR1—4，其E2F1蛋白表达量分别为0．776±0.012，0．768±0．013，0．764±0，012，0，720±0．016；转染空载体组和未转染细胞组E2F1蛋白表达量分别为1．512±0，011和1．494±0，013：SIR1～4E2F1蛋白表达量低于空载体组及未转染组，差异有统计学意义（P〈0．05），SIR1～4各组E2F1蛋白表达均受到抑制；空载体转染组与未转染组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论逆转录病毒载体介导的RNAi技术特异、高效抑制靶基因的表达，为肿瘤基因治疗提供了新的思路和工具。

E26转录因子-1在不同类型葡萄膜黑色素瘤中的表达及意义

目的 探讨E2 6转录因子 1(E2 6transformation specific 1,Ets 1)在不同类型的葡萄膜黑色素瘤中的表达及其与预后的相关关系。方法 以原位杂交和免疫组织化学法检测 78例葡萄膜黑色素瘤中Ets 1mRNA和蛋白的表达 ,并按WHO 1980年的标准进行分型 :梭型细胞型、类上皮细胞型和混合细胞型。结果 78例中 ,梭型细胞型占 2 1例 ,类上皮细胞型占 34例 ,混合细胞型占 2 3例。Ets 1mRNA和蛋白在 3种类型的葡萄膜黑色素瘤中均有表达 ,但表达强度随梭型细胞型 ,混合细胞型和类上皮细胞型依次递增。回访37例患者 ,其中梭型细胞型 18例 ,平均生存时间为 (78.33± 2 4 .6 9)月 ;混合细胞型 10例 ,平均生存时间 (6 1.4 4± 2 0 .4 6 )月 ;类上皮细胞型 9例 ,平均生存时间 (36 .76± 12 .19)月。患者生存时间与Ets 1表达强度呈负相关。结论 Ets 1可能在葡萄膜黑色素瘤的转移、浸润中发挥重要作用 ,Ets 1的检测可作为葡萄膜黑色素瘤恶性程度的参考指标。

血清细胞角蛋白19片段21-1、E26转录因子-1联合^(18)F-FDG PET/CT对胃癌术后复发的诊断价值

目的探讨血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、E26转录因子-1(Ets-1)检测联合^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)正电子发射断层显像/CT(PET/CT)对胃癌术后复发的诊断价值。方法选取2018年1月至2020年1月在上海中医药大学附属曙光医院普外科行手术切除治疗的178例胃癌患者为研究对象,术后随访截止时间2021年2月,无死亡病例。根据再次手术后病理检查结合临床随访结果分为术后复发组(31例)和术后未复发组(147例)。分别采用电化学发光法、化学发光酶联免疫分析法检测所有受试者血清CYFRA21-1、Ets-1水平,并进行^(18)F-FDG PET/CT检查,测定半定量参数原发灶最大标准摄取值(SUV_(max)),并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估血清CYFRA21-1、Ets-1水平、SUV_(max)指标单独及三者联合对胃癌术后复发的诊断价值。结果术后复发组血清CYFRA21-1、Ets-1水平、SUV_(max)值均高于术后未复发组[(5.79±0.61)μg/L比(2.68±0.29)μg/L、(6.16±0.63)μg/L比(2.78±0.31)μg/L、(3.81±0.41)比(1.38±0.15)](P<0.01)。术后复发患者血清CYFRA21-1、Ets-1水平、SUV_(max)值最佳截断点分别为3.45μg/L、3.51μg/L、2.56,三项指标单独检测诊断胃癌术后复发的ROC曲线下面积分别为0.713(95%CI 0.674~0.742)、0.709(95%CI 0.617~0.737)、0.715(95%CI 0.676~0.749),灵敏度分别为77.42%、74.19%、80.65%,特异度分别为68.71%、66.67%、69.39%,准确度分别为70.22%、67.98%、71.35%;三项指标联合诊断胃癌术后复发的ROC曲线下面积为0.778(95%CI 0.724~0.846),灵敏度为67.74%、特异度为85.03%、准确度为82.02%,三项联合检测诊断胃癌术后复发的特异度、准确度高于单独诊断(P<0.05)。结论血清CYFRA21-1、Ets-1水平及SUV_(max)值联合诊断胃癌术后复发较单一指标诊断效能更高。

糖尿病心肌病患者外周血单个核细胞E26转录因子1的表达及其意义

目的探讨糖尿病心肌病（DCM）与外周血单个核细胞E26转录因子（Ets）1的表达相关性，初步探讨Ets．1在DCM发病机制中可能的作用，为临床诊治DCM提供新的思路。方法选择2010年l一12月广东医学院附属医院DCM患者28例（DCM组）、单纯2型糖尿病患者30例（2型糖尿病组）和同期体检健康者30例（对照组）。采用SYBRGreenI实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测外周血单个核细胞Ets．1mRNA表达，记录其他临床及实验室生化指标。结果①DCM组LDL—C、TG高于对照组，二尖瓣舒张早期血流速度峰值／舒张晚期血流速度峰值（E／A）比值低于对照组，组间差异均有统计学意义[LDL—C：（3．3±1．2）mmol／L比（2．5±0．8）mmol／L，TG：（3．5±1．8）mmol／L比（1．8±0．6）mmol／L，E／A：（0．45±0．14）比（1．24±0．16），均P〈0．05]；DCM组和2型糖尿病组空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbAlc）均高于对照组，组间差异均有统计学意义[DCM组分别为（8．7±3．6）mmol／L和（8．5±2．6）％，2型糖尿病组分别为（9．0±2．5）mmol／L和（9．0±1．6）％，对照组分别为（5．4±1．2）mmol／L和（5．3±1．2）％，均P〈0．05]。DCM组E／A低于2型糖尿病组（0．93±0．34），组间差异有统计学意义（P〈0．05）。②DCM组单个核细胞Ets．1mRNA表达明显高于对照组，组间差异有统计学意义（0．58±0．17比0．42±0．15，P〈0．05）；DCM组和2型糖尿病组基质金属蛋白酶（MMP）9表达[（3．7±0．8）、（2．1±0．6）斗∥L]均明显高于对照组[（1．5±0．5）峙／L]，差异均有统计学意义（均P〈0．05），DCM组与2型糖尿病组间差异无统计学意义（P〉0．05）。~DCM患者Ets．1mRNA表达与MMP-9呈正相关（r=0．81，P=0．03），与E／A比值、FBG、HbAlc、LDL-C、TG无相关性（r值分别为旬．52、0．73、0．26、0．06、0．72，均P〉0．05）。~DCM危险因素分析结果显示Ets-1mRNA高表达为危险因素[比值比=3．12，95％置信区间：2．14—4．48，P〈0．05]。结论Ets一1可上调MMP-9表达，参与2型糖尿病的发生发展，Ets．1可作为DCM的早期预测因子。

携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体的构建与鉴定

目的 :构建携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,采用平末端连接法获得含人TGFβ1cDNA3’ -端活性肽编码基因正、反向插入的重组病毒质粒 ,脂质体介导转染包装细胞PA317,获得含TGFβ1正、反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ-AS ,感染NIH3T3细胞 ,测定病毒滴度。分别转染膀胱癌EJ细胞 ,通过Southern -blot和半定量RT -PCR方法评价载体整合及表达效率。结果 :pRevTβ、pRevTβ-AS载体病毒滴度分别为0.84、0.88×105CFU/ml,EJ细胞外源基因的整合率为100 %,正、反义基因转染细胞内TGFβ1mRNA的相对转录水平为1.89和0.35。结论 :构建的携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体符合细胞体外转染要求 ,能与肿瘤细胞高效整合 ,有效表达。

逆转录病毒介导的稳定表达E4orf1和绿色荧光蛋白的胎肝窦内皮细胞株的建立

目的:为构建优化的内皮细胞用于造血干细胞(HSCs)的支持培养,通过逆转录病毒载体系统建立稳定表达腺病毒E4区开放读框1(E4orf1)和绿色荧光蛋白(GFP)的人胎肝窦内皮细胞(HFLSECs)株。方法:利用Plat-A细胞将质粒MSCV-N E4orf1和p MX-GFP分别包装为逆转录病毒,共同感染HFLSECs,将原代培养的HFLSECs和转基因的HFLSECs分别在含有0.5、1、2、4μg/m L嘌呤霉素的EGM-2培养基中培养,以测试最适药物筛选浓度,药筛1周后通过流式细胞分选获得稳定转染E4orf1的GFP^+HFLSECs(E4orf1-GFP/HFLSECs)。通过密度梯度离心法从脐带血中分离单个核细胞,利用免疫磁柱分选获得CD34^+造血干/祖细胞(HSPCs),以E4orf1-GFP/HFLSECs作为饲养层联合SCF、TPO、Flt-3L等3种基础造血相关因子进行体外扩增和半固体造血细胞集落培养。结果:0.5μg/m L嘌呤霉素在5 d内即能完全杀死HFLSECs,而转基因的HFLSECs可以正常存活,以此药物浓度加压筛选1周,后续通过流式分选GFP阳性细胞,阳性率为90.5%,在E4orf1-GFP/HFLSECs饲养层支持下,人脐带血来源的CD34^+细胞15 d扩增了360倍,是单纯细胞因子悬浮培养组的2.2倍,且扩增后的HSPCs在体外仍具有多种造血集落形成能力。结论:该细胞株的建立将为构建造血干细胞体外培养体系及研究造血细胞的发育分化提供适宜的微环境。

E26转录因子-1在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的探讨E26转录因子-1(Ets-1)在视网膜母细胞瘤(Rb)中的表达及其与肿瘤的血管化、浸润、转移的关系。方法利用原位杂交和免疫组织化学法分别检测Ets-1mRNA和蛋白在40例Rb中的表达。并以免疫组织化学法检测肿瘤中CD34的表达,以此计算肿瘤微血管密度的值。结果82·5%(33/40)的Rb中Ets-1mRNA呈阳性表达,Ets-1蛋白的阳性表达率为65%(26/40)。Ets-1主要表达于癌细胞和血管内皮细胞。Ets-1高表达组的微血管密度明显高于Ets-1低表达组(P<0·01)。其表达与组织学分级和预后有关。结论Ets-1可促进Rb的新生血管形成,与肿瘤的浸润和转移有关。

HIV-1辅受体配体的逆转录病毒载体的构建和表达

目的:构建HIV 1辅受体的配体-趋化因子RAN TES和SDF 1的逆转录病毒载体,并观察在NIH3T3细胞的表 达.方法:从重组质粒pCMV R K S K中获取RANTES KDEL SDF KDEL基因片段,构建RANTES和SDF 1的逆转录病毒 载体pLNCX R K S K,酶切鉴定并测序.采用标准的磷酸钙共 沉淀法转染包装细胞Bing,G418筛选克隆细胞,制备重组病 毒液,继之感染NIH3T3细胞,计算病毒滴度.间接免疫荧光 检测NIH3T3细胞中RANTES、SDF 1的表达.结果:pLNCX R K S K逆转录病毒载体酶切和测序结果与预期一致,筛选 出抗性克隆,制备了高滴度的重组病毒液,间接免疫荧光证实 RANTES和SDF 1可表达于转染细胞.结论:HIV 1辅受体的 配体、趋化因子RANTES和SDF 1的逆转录病毒载体构建成 功,重组病毒可以感染NIH3T3细胞,为下一步HIV 1感染实 验打下了基础.

转录调节因子E26转录因子-1蛋白在胎膜早破中的表达和意义

目的探讨E26转录因子-1(E26 transformation specific-1,Ets-1)蛋白在胎膜早破中的表达和意义。方法采用免疫组织化学S-P法在蛋白水平检测75例胎膜早破者(病例组)及70例无其他产科并发症及内外科合并症的足月择期剖宫产者(对照组)胎膜中Ets-1蛋白的表达。结果①Ets-1蛋白在胎膜滋养层细胞核及胞浆中均有表达,以胞核表达为主;②Ets-1蛋白在胎膜早破组滋养层中高表达,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05);③Ets-1蛋白在未足月胎膜早破组滋养层中高表达,但与足月胎膜早破组比较,无显著性差异(P>0.05)。结论转录调节因子Ets-1在人类胎膜上有表达,且在胎膜早破中高表达,表明Ets-1蛋白可能使胎膜细胞外基质重塑从而引发胎膜早破。本研究可作为预测胎膜早破发生的依据。

E26转录因子-1在葡萄膜黑色素瘤中的表达及意义

目的探讨E26转录因子-1(E26transformation-specific-1,Ets-1)在不同类型葡萄膜黑色素瘤中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测78例葡萄膜黑色素瘤中Ets-1的表达,并按WHO1980年的标准进行分型:梭型细胞型,类上皮细胞型和混合细胞型。结果78例中,梭型细胞型21例,类上皮细胞型34例,混合细胞型23例。Ets-1在3种类型的葡萄膜黑色素瘤中均有表达,但表达强度梭型细胞型,混合细胞型和类上皮细胞型依次递增。回访37例患者,其中梭型细胞型18例,平均生存时间为(78.33±14.21)月,混合细胞型10例,平均生存时间为(69.07±17.36)月,类上皮细胞型9例,平均生存时间为(36.76±12.19)月。患者生存时间与Ets-1表达强度呈负相关。结论在葡萄膜黑色素瘤中Ets-1表达与肿瘤类型相关,其表达与肿瘤的恶性程度呈正相关,Ets-1的检测可作为葡萄膜黑色素瘤恶性程度的参考指标。

E26转录因子-1在葡萄膜黑色素瘤中的表达及意义

目的探讨E26转录因子-1(E26transformation-specific-1Ets-1)在不同类型的葡萄膜黑色素瘤中的表达及意义。方法以免疫组织化学法检测78例葡萄膜黑色素瘤中Ets-1的表达,并按WHO1980年的标准进行分型:梭型细胞型,类上皮细胞型和混合细胞型。进行临床随访,以SPASS10.0统计软件包进行统计学处理。结果78例中,梭型细胞型占21例,类上皮细胞型型占34例,混合细胞型占23例。Ets-1在三种类型的葡萄膜黑色素瘤中均有表达,但表达强度随梭型细胞型,混合细胞型和类上皮细胞型依次递增。结论Ets-1可能在葡萄膜黑色素瘤的转移,浸润中发挥重要作用,Ets-1的检测可作为葡萄膜黑色素瘤恶性程度的参考指标。

E26转录因子-1和信号转导与转录激活因子6在食管病变组织中的表达及临床意义

目的探讨E26转录因子-1(Ets-1)和信号转导与转录激活因子6(STAT6)在食管病变组织中的表达,并分析其相关性与临床意义。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法和反转录聚合酶链反应法检测36例食管鳞癌、36例癌旁非典型增生及18例正常食管黏膜组织中Ets-1、STAT6的表达。结果 Ets-1、STAT6蛋白在正常食管黏膜、癌旁非典型增生及食管鳞癌组织中阳性表达率均依次升高,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05),且二者呈正相关关系(r=0.447,P<0.05)。Ets-1、STAT6 mRNA在正常食管黏膜、癌旁非典型增生及食管鳞癌组织中相对含量依次升高,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。Ets-1及STAT6异常表达与食管癌的分级、浸润深度及淋巴结转移均密切相关(P<0.05)。结论 Ets-1和STAT6异常表达与食管上皮癌变有关,二者可能具有协同作用,并可作为判断患者预后的分子指标。

白介素10、E_(26)转录因子1和肿瘤相关巨噬细胞在宫颈癌中的表达研究

背景宫颈癌是女性高发的恶性肿瘤之一。白介素10(IL-10)作为一种具有免疫抑制作用的细胞因子对宫颈癌变的发生、发展具有重要作用。肿瘤相关巨噬细胞(TAM)、E26转录因子1(Ets1)均可促进肿瘤的生长、侵袭和迁移。目的探讨宫颈癌组织中IL-10、Ets1和TAM的表达情况及其与宫颈癌的关系。方法选取2014年9月—2016年3月唐山工人医院住院部收治的宫颈上皮内瘤变(CIN)患者72例为CIN组,宫颈鳞癌患者76例为鳞状细胞癌(SCC)组,行全子宫切除术的子宫良性病变患者40例为正常组。采用简单随机抽样法选取3例SCC组宫颈组织及3例正常组宫颈组织进行基因芯片杂交测序;采用RT-q PCR法检测所有患者宫颈组织中IL-10、Ets1 mRNA表达水平,免疫双荧光共定位法检测宫颈组织中TAM情况及表达IL-10、Ets1的TAM(IL-10^+TAM、Ets1^+TAM)水平,分析IL-10^+TAM、Ets1^+TAM水平与SCC组患者临床资料的关系。结果与正常组宫颈组织比较,IL-10在SCC组宫颈组织中表达上调3.4倍,Ets1表达上调2.9倍(P<0.05)。CIN组、SCC组IL-10、Ets1 mRNA表达水平高于正常组(P<0.05);SCC组IL-10、Ets1 mRNA表达水平高于CIN组(P<0.05)。CIN组、SCC组IL-10 mRNA表达水平与Ets1mRNA表达水平均呈正相关(r=0.453,P<0.01;r=0.456,P<0.01)。正常组、CIN组、SCC组宫颈组织中TAM逐渐增多。CIN组、SCC组IL-10^+TAM、Ets1^+TAM水平高于正常组(P<0.05);SCC组IL-10^+TAM、Ets1^+TAM水平高于CIN组(P<0.05)。SCC组患者IL-10^+TAM、Ets1^+TAM水平与年龄、肿瘤大小无关(P>0.05);SCC组患者IL-10^+TAM、Ets1+TAM水平与分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 IL-10、Ets1和TAM表达水平随宫颈病变进展而升高,TAM及其分泌的IL-10、Ets1可能与宫颈癌及临床预后有关。

人乳头瘤病毒感染与宫颈病变患者C反应蛋白、辅助性T17细胞、前列腺素E2及E2F转录因子-1的关系研究

目的研究人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈病变患者C反应蛋白(CRP)、辅助性T(Th)17细胞、前列腺素E_(2)(PGE_(2))及E2F转录因子-1(E2F-1)的关系。方法选取2017年1月至2020年1月承德市第三医院收治的120例HPV感染宫颈病变患者设为观察组,根据HPV感染类型分为低危型组(n=55)和高危型组(n=65)。选择同期60例无HPV感染的宫颈病变患者设为对照组。比较各组CRP、Th17细胞及PGE_(2)水平,分析HPV感染与宫颈病变患者CRP、Th17细胞、PGE_(2)及E2F-1的相关性。结果低危型组、高危型组CRP、Th17细胞、PGE_(2)水平及E2F-1蛋白阳性表达率均高于对照组,且高危型组均高于低危型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Pearson检验结果显示,HPV感染与宫颈病变患者CRP、Th17细胞、PGE_(2)水平及E2F-1蛋白阳性表达率呈正相关(P<0.05)。结论HPV感染与宫颈病变患者CRP、Th17细胞、PGE_(2)水平及E2F-1蛋白阳性表达密切相关,随着疾病的进一步深入变化,CRP、Th17细胞、PGE_(2)水平及E2F-1蛋白阳性表达率不断升高,或与患者免疫调节失衡有关。

高效抗逆转录病毒疗法(HAART)对HIV／AIDS患者免疫功能的影响

目的评价高效抗逆转录病毒疗法(highly active antiretroviral therapy,HAART)对HIV/AIDS患者的疗效。方法采用HAART治疗73例HIV/AIDS患者,流式细胞仪测定治疗前后HIV/AIDS患者体内CD4+,CD8+T淋巴细胞数量,定量ELISA法检测血浆细胞因子IL-2,IL-10和TGF-β1水平。结果经HAART治疗后,CD4+T细胞数量显著回升(P(0.01),但CD8+T细胞变化不大(P(0.05)。血浆IL-10水平较治疗前明显下降(P(0.05),IL-2水平较治疗前升高(P(0.05),TGF-β1的水平显著降低(P(0.01)。结论HAART治疗HIV/AIDS患者疗效显著,对于重建免疫功能、改善体内细胞因子失调有明显效果。