选择复制性腺病毒M4对卵巢癌细胞系OV2008的体外治疗作用及初步机制探讨

目的:研究选择复制性腺病毒M4对卵巢癌细胞系OV2008的体外治疗作用并初步探讨其机制。方法:选择复制性腺病毒M4感染卵巢癌细胞系OV2008后,MTT法检测M4对OV2008细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测M4对OV2008细胞凋亡的影响;PI法检测M4对OV2008细胞周期的影响,W estern blot法检测感染M4后STAT3蛋白以及其下游靶蛋白表达的改变。结果:选择复制性腺病毒M4能明显抑制OV2008细胞的增殖(P<0.05),并且能促进OV2008细胞的凋亡(P<0.05),PI法检测发现M4可以引起细胞G2-M期阻滞。W estern blot检测发现感染M4后STAT3蛋白及其靶蛋白survivin,Cyclin D1,Bcl-xl,p-STAT3的表达水平明显降低(P<0.05)。结论:M4在体外对卵巢癌细胞系OV2008有非常好的治疗效果,其机制可能是因为M4能封闭卵巢癌细胞系中的STAT3基因,从而进一步促使p-STAT3蛋白以及其下游靶蛋白survivin,Bcl-xl,Cyclin D1等的表达降低,最终导致OV2008细胞的凋亡。

选择复制性腺病毒对人黑色素瘤细胞的特异性杀伤作用

目的 构建靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒 ,观察其对人黑色素瘤细胞的特异性杀伤作用。方法 以PCR克隆的方法分别获得腺病毒E1区、鼠酪氨酸酶启动子和增强子DNA片段 ;用基因重组的方法构建靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒的穿梭载体 ;用同源重组的方法获得靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒AdhepE1;以低剂量AdhepE1分别攻击人黑色素瘤细胞系SK Mel 1和人肝细胞癌细胞系HepG2 ,观察细胞形态变化及计算存活细胞数 ;用RT PCR检测E1A的表达 ,以证实AdhepE1的特异性复制。结果 经PCR证实 ,获得了靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒AdhepE1,人黑色素瘤细胞系SK Mel 1对AdhepE1的裂解杀伤敏感 ,而人肝细胞癌细胞系HepG2则不敏感。RT PCR的结果提示 ,AdhepE1在人黑色素瘤细胞中可特异地复制。结论 AdhepE1对人黑色素瘤细胞具有良好的靶向性。