选择性NMDA受体NR2B亚单位拮抗剂与神经元保护作用

多种神经系统疾病与谷氨酸过度兴奋NMDA受体有关。广谱的NMDA受体拮抗剂能影响所有NMDA受体而产生不良反应 ,限制了其临床运用。NMDA受体NR2B亚单位在神经系统疾病中起着重要的作用 ,艾芬地尔等化合物能够选择性地作用于NMDA受体NR2B亚单位 ,将有可能发展成为临床上安全。

血浆激肽释放酶B1和缓激肽受体B2基因多态性及体质指数与老年原发性高血压的关系

目的探讨血浆激肽释放酶B1(KLKB1)和缓激肽受体B2(BDKRB2)基因多态性及体质指数(BMI)与老年原发性高血压的关系。方法应用限制性片段长度多态性-聚合酶链反应(RFLP-PCR)的方法检测103例重庆地区老年原发性高血压患者和103例老年正常对照者的KLKB1基因rs2304595和BDKRB2基因rs1799722多态性。结果与正常对照组相比,老年原发性高血压组收缩压和体质指数均高于正常对照组(P<0.05);老年原发性高血压男性亚组rs2304595位点GG基因型和G等位基因频率无统计学差异(P>0.05);老年原发性高血压女性亚组GG基因型和G等位基因频率有显著统计学差异(P<0.01);而rs1799722位点的基因多态性无统计学差异(P>0.05)。Logistic回归分析表明:rs2304595位点GG基因型和BMI均不同程度的增加老年原发性高血压的发病风险,二者之间存在协同作用。结论 KLKB1基因rs2304595位点GG基因型和G等位基因可能是老年汉族女性原发性高血压发病的一个遗传标志,并且GG基因型和BMI对老年原发性高血压发病存在协同作用;而BDKRB2基因rs1799722基因多态性与老年原发性高血压发病的关系尚不明确。

尤瑞克林对大鼠缺血-再灌注后缓激肽受体B1和B2表达的影响

目的观察不同剂量尤瑞克林对大脑中动脉闭塞(MCAO)的缺血-再灌注(I/R)SD大鼠缓激肽受体B1(B1R)、缓激肽受体B2(B2R)表达的影响。方法应用改良后Zea Longa线栓方法建立SD大鼠右侧MCAO模型,缺血2 h时拔栓模拟缺血-再灌注,将制备成功的25只SD大鼠按随机抽样法分为假手术组、I/R模型组(I/R+等渗盐水组)、尤瑞克林低剂量治疗组(I/R+LDP组)、尤瑞克林中等剂量治疗组(I/R+MDP组)、尤瑞克林高剂量治疗组(I/R+HDP组),每组5只,术后30 min首次给予尤瑞克林(I/R+LDP组:3.50×10-3 PNAU/kg;I/R+MDP组:8.75×10-3 PNAU/kg;I/R+HDP组:17.50×10-3 PNAU/kg)或等渗盐水尾静脉注射,连续注射7 d、每日定时注射1次,7 d后取材,运用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测梗死灶边缘区域B1R、B2R的mRNA相对表达水平,血管性血友病因子(vWF)免疫荧光测定梗死边界区域微血管密度。结果(1)B1R mRNA表达:与I/R+等渗盐水组比较,I/R+LDP组、I/R+MDP组、I/R+HDP组B1R的mRNA表达水平均上调[(0.34±0.05)、(0.35±0.04)、(0.47±0.03)比(0.23±0.05),均P<0.05];与I/R+LDP组及I/R+MDP组比较,I/R+HDP组B1R的mRNA表达水平均上调(均P<0.05)。(2)B2R mRNA表达:与假手术组比较,I/R+等渗盐水组B2R的mRNA表达水平上调[(0.33±0.01)比(0.23±0.02),P<0.05]。与I/R+等渗盐水组比较,I/R+LDP组、I/R+MDP组、I/R+HDP组B2R的mRNA表达水平均上调[分别为(0.49±0.02)、(0.52±0.04)、(0.71±0.03),均P<0.05];与I/R+LDP组及I/R+MDP组比较,I/R+HDP组B2R的mRNA表达水平均上调(均P<0.05)。(3)微血管密度:与假手术组比较,I/R+等渗盐水组的微血管计数明显增多[(169±6)比(74±12),P<0.01];与I/R+等渗盐水组比较,I/R+LDP组、I/R+MDP组、I/R+HDP组的微血管计数均明显增多[分别为(240±9)、(252±9)、(349±17),均P<0.01];与I/R+LDP组及I/R+MDP组比较,I/R+HDP组微血管计数均明显增多(均P<0.01)。结论一定剂量的尤瑞克林上调MCAO大鼠B1R、B2R表达,发挥促血管再生的作用,且高剂量的尤瑞克林对血管新生作用效果更为明显。

缓激肽B2受体在大鼠C6脑胶质瘤细胞上的表达

目的 研究缓激肽选择性开放脑肿瘤的血肿瘤屏障的机制。方法 通过双重免疫组化染色 ,确定缓激肽B2受体是存在于血管内皮细胞上还是存在于肿瘤细胞上。结果 在正常脑组织和肿瘤的血管内皮细胞上未见缓激肽B2受体的表达 ,而在肿瘤细胞上发现了高水平表达的缓激肽B2受体。结论 肿瘤细胞上B2受体的高水平表达可能是小剂量缓激肽灌注能够选择性开放恶性脑肿瘤的血 -肿瘤屏障而未影响正常血脑屏障通透性的重要原因之一。

缓激肽B2受体基因多态性对膝关节骨关节炎易感性的影响

背景:据报道在膝骨关节炎患者中应用缓激肽B2受体拮抗剂能产生持久的镇痛效果,缓激肽B2受体(BDKRB2)在骨关节炎的发展中具有重要作用。目的:进一步明确缓激肽B2受体基因多态性与骨关节炎易感性的相关性。方法:共有278例膝关节骨关节炎患者和291名健康志愿者参与试验。测定受试对象的缓激肽B2受体基因多态性,根据基因型和放射学分型进行统计学处理。结果与结论:骨关节炎组和对照组中+9/-9 bp多态性的基因型分布和等位基因频率差异明显。-9/-9 bp多态性和+9/+9 bp相比,与骨关节炎的罹患风险和严重程度存在明显相关性。-9 bp等位基因的表达,与骨关节炎的Kellgren-Lawrence分型相关。结果提示缓激肽B2受体基因+9/-9 bp多态性可能成为骨关节炎易感性和严重性筛查的分子标记。

缓激肽B2受体基因多态性对膝关节骨关节炎易感性的影响

目的明确BDKRB2基因多态性与OA易感性的相关性,并检测OA患者基因多态性对滑膜组织中BDKRB2表达的影响。方法共有278名膝关节骨关节炎患者和291名健康志愿者参与实验。测定实验对象的BDKRB2基因多态性,在OA患者滑膜组织中通过RT-PCR和Western Blot检测BDKRB2的m RNA和蛋白水平。结果 OA组和对照组中＋9/-9 bp多态性的基因型分布和等位基因频率差异明显。-9/-9 bp多态性和＋9/＋9 bp相比,与OA的罹患风险和严重程度存在明显相关性（OR=2.35,95%CI：1.409~3.937,P〈0.001）。-9 bp等位基因的表达,与OA的Kellgren-Lawrence分型相关（OR=1.545,,P=0.011）。另外,＋9/-9 bp多态性显著影响OA患者滑膜组织中BDKRB2的m RNA和蛋白表达。＋9/-9和-9/-9基因型在滑膜组织中BDKRB2的表达水平显著升高,同时KL4型OA患者平均BDKRB2 m RNA和蛋白水平明显高于其他对象（2.502±1.319 vs.1.471±1.002和1.895±1.174,P〈0.001）。结论本研究提示BDKRB2基因＋9/-9bp多态性可能成为OA易感性和严重性筛查的分子标记。

神经胶质瘤缓激肽B2受体和nNOS表达水平与胶质瘤病理级别相关关系的研究

目的分析神经胶质瘤缓激肽B2受体和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达水平与胶质瘤病理级别的相关关系。方法HE染色进行脑肿瘤的病理诊断及分级,免疫组化法测定不同病理级别神经胶质瘤缓激肽B2受体和nNOS的表达水平。结果神经胶质瘤B2受体和nNOS表达水平均与胶质瘤病理级别呈显著正相关,各病理级别神经胶质瘤B2受体和nNOS的表达水平均为:Ⅰ级(Ⅱ级(Ⅲ级。结论神经胶质瘤B2受体和nNOS表达水平均随着其病理级别的增加而升高,提示二者可作胶质瘤病理分级的标示物。

缓激肽B2受体基因多态性在膝骨关节炎发生和发展中的作用

目的研究缓激肽B2受体(BDKRB2)基因多态性对膝骨关节炎易感性和严重性的影响。方法在原发性膝骨关节炎245例(观察组)及健康志愿者264例(对照组)中,针对BDKRB2基因多态性-58T/C和+9/-9,分别进行基因型测定。结果 +9/-9基因多态性的基因型分布和等位基因频率,在两组之间存在明显差异。回归分析显示-9/-9基因型相对于+9/+9基因型,罹患膝关节骨关节炎的风险明显增高(OR=2.354,P<0.01)。同时,+9/-9基因多态性与骨关节炎的放射学分型存在相关性,-9等位基因可能与骨关节炎的严重程度有关。-58T/C基因多态性与骨关节炎的易感性和严重性无相关性。结论缓激肽B2受体基因多态性+9/-9可能成为检测骨关节炎易感性和严重性的基因标记物。

残肾大鼠主动脉重塑及缓激肽B_2受体

目的研究1/6残肾大鼠主动脉重塑情况和BKB2R mRNA水平.方法32只Wistar大鼠随机分成模型组和假手术组,每组16只.使用5/6肾切除术构建残肾大鼠模型.造模前和造模后15、30、60、120 d检测血压和血清肌酐.造模后1月和4月每组处死大鼠各8只,RT-PCR法检测主动脉BKB2R mRNA的水平;取同一部位胸主动脉石蜡切片行天狼星红染色.结果造模后15 d血压(180±22)mm Hg和血清肌酐(44.5±9.3)μmol/L较假手术组,分别(109±11)mm Hg和(24.5±5.3)μmol/L显著升高(均P＜0.01),并维持在较高水平,至术后120 d无显著变化.模型组主动脉BKB2R mRNA水平(×103拷贝数)术后1月为22.48土6.26,4月为6.25±1.78,呈现时间依赖性持续降低(P＜0.05).造模后1月大动脉中膜胶原纤维含量略增加,造模后4月大动脉中膜胶原纤维增生显著.结论1/6残肾大鼠模型至少在术后15 d出现显著的肾功能不全的表现,并维持到术后4月.残肾大鼠更易出现大血管重塑,血管BKB2R mRNA的水平呈时间依赖性的显著降低.

缓激肽β2受体拮抗剂在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 探讨缓激肽β2受体拮抗剂（HOE-140）对大鼠移植肺功能的影响以及作用.方法 将纯系SD大鼠随机分为3组,即实验组1、实验组2、对照组.对照组的供肺用低钾右旋糖苷液（LPD液）灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,于移植后1d测定对照组的气道峰压（PAP）、静脉血氧分压（PO2）、移植肺湿干重比（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性.实验组1以及实验组2（加HOE-140干预）的供肺用含特异性不可逆DPPⅣ酶抑制剂（AB192）的LPD液灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,分别于移植后1d测定受者的各项肺功能指标,并取相同受体肺部组织做病理学检查. 结果 与对照组比较,各实验组的PAP值降低（P＜0.05）,PO2值升高（P＜0.05）,W/D值降低（P＜0.05）,MPO活性降低（P＜0.05）,差异有统计学意义,病理学结果显示实验组2（HOE-140组）均优于对照组及实验组1.结论 缓激肽β2 受体拮抗剂HOE-140能有效降低肺移植肺缺血再灌注损伤,从而改善移植肺功能.

神经胶质瘤中缓激肽B_(2)受体的表达水平与病理级别的相关性

目的分析神经胶质瘤中缓激肽B2受体表达水平与病理分级的相关关系,为缓激肽及其类似物的临床应用提供实验依据.方法采用神经胶质瘤患者术后标本,用H&E染色进行神经胶质瘤的病理诊断及分级,用免疫组化法和Western Blot法测定不同病理分级的神经胶质瘤中缓激肽B2受体的表达水平.结果H&E染色显示26例神经胶质瘤中Ⅰ级为9例,Ⅱ级为9例,Ⅲ级为8例,Ⅳ级为0例.胶质瘤边缘水肿带不表达缓激肽B2受体,B2受体位于胶质瘤细胞.Western Blot结果显示在三组不同病理分级的神经胶质瘤中,B2受体表达水平为Ⅰ级与Ⅱ级(39480.88±5119.96对51354.25±6168.77,n=8,t=2.447,P＜0.05),Ⅰ级与Ⅲ级(39480.88±5119.96对73032.13±8802.71,n=8,t=7.710,P＜0.001),Ⅱ级与Ⅲ级(51354.25±6168.77对73032.13±8802.71,n=8,t=5.704,P＜0.001);神经胶质瘤中缓激肽B2受体表达水平与其病理分级Ⅰ级～Ⅲ级呈显著正相关(r=0.895,P＜0.001),呈Ⅰ级＜Ⅱ级＜Ⅲ级状况.免疫组化法显示在三组不同病理分级的神经胶质瘤中,B2受体阳性区域面积占切片面积的百分比值为Ⅰ级与Ⅱ级(3.54%±1.51%对8.47%±3.45%,n=8,t=3.698,P＜0.01),Ⅰ级与Ⅲ级(3.54%±1.51%对15.94%±1.68%,n=8,t=15.562,P＜0.001),Ⅱ级与Ⅲ级(8.47%±3.45%对15.94%±1.68%,n=8,t=5.505,P＜0.001);神经胶质瘤中缓激肽B2受体阳性区域面积占切片面积的百分比值与其病理分级Ⅰ级～Ⅲ级呈显著正相关(r=0.878,P＜0.001),呈Ⅰ级＜Ⅱ级＜Ⅲ级状况.结论神经胶质瘤B2受体表达水平与其病理分级Ⅰ级～Ⅲ级呈显著正相关,提示利用缓激肽及其类似物开放血肿瘤屏障的疗效差异可能与B2受体表达水平有关.

缓激肽受体B2在肾脏相关细胞中的表达及在体外高糖环境下对相关细胞增殖的影响

目的了解缓激肽受体B2在肾脏相关细胞中的蛋白和核酸表达水平,以及在体外高糖环境下该受体对细胞增殖能力的影响。方法以Western Blot、RT-PCR技术分别对人体肾脏相关细胞中缓激肽受体B2进行检测,分别敲低肾小球系膜细胞和肾小球毛细血管内皮细胞中的缓激肽受体B2,用MTT方法检测两种细胞在高糖环境下(葡萄糖终浓度为10mmol/L)的增殖能力。结果肾小球系膜细胞、肾小球毛细血管内皮细胞中均可检测出缓激肽受体B2的表达。同时发现高糖环境下,敲低缓激肽受体B2水平,可以促进细胞的增殖能力。结论缓激肽受体B2在肾小球系膜细胞、肾小球毛细血管内皮细胞中有表达,在体外高糖环境下该受体对上述细胞增殖能力存在影响。

血小板活化因子受体拮抗剂-BN52021对内毒素引起大鼠急性肺动脉高压影响的观察

目的 探讨特异性血小板活化因子 (PAF)受体拮抗剂 -BN 5 2 0 2 1对内毒素引起的肺动脉高压的影响。 方法 Wistar大鼠静脉注入内毒素引起急性肺动脉高压 ;应用BN 5 2 0 2 1预处理 ;观察BN 5 2 0 2 1对经内毒素处理大鼠的血液动力学、血浆肿瘤坏死因子α(TNF α)、血栓素B2 (TXB2 )及动脉血气变化的影响。 结果 BN5 2 0 2 1可部分抑制内毒素引起的急性肺动脉高压 ;降低血浆TNF α和TXB2 的含量 ;提高动脉血氧分压。 结论 BN 5 2 0 2 1能减轻内毒素引起的肺损伤 ;降低内毒素引起的大鼠肺动脉高压。

缓激肽B_2受体在缬沙坦抑制心肌细胞肥大中的作用研究

目的:探讨缓激肽(BK)B2受体在缬沙坦(val-sartan)抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌细胞肥大中的作用及可能机制。方法:经差速贴壁法获得新生大鼠心肌细胞,随机分为对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、AngⅡ+缬沙坦组、Hoe-140组和AngⅡ+缬沙坦+Hoe-140组。采用流式细胞仪技术检测细胞大小和蛋白含量,硝酸还原酶法测定上清液中NO含量,放射免疫法测定细胞内cGMP水平。结果:与对照组相比,10-7mol.L-1AngⅡ显著增加心肌细胞大小和蛋白含量,降低心肌细胞NO生成(P<0.01),10-5mol.L-1缬沙坦显著降低AngⅡ诱导的心肌细胞肥大和蛋白合成增加(P<0.01),促进心肌细胞NO(P<0.05)和cGMP生成(P<0.01),BKB2受体阻断剂Hoe-140可部分阻断缬沙坦的上述作用。结论:BK B2受体部分介导了缬沙坦抑制心肌细胞肥大的效应,该作用与NOc、GMP生成有关。

缓激肽β_2受体拮抗剂在兔体外循环中的脑保护作用

目的:探讨缓激肽β2受体拮抗剂HOE-140在兔体外循环中的脑保护作用。方法:实验兔随机分成深低温停循环下选择性逆行脑灌注组(DHCA+SCP,对照组,n=15)和深低温停循环下选择性逆行脑灌注+HOE-140组(DHCA+SCP+HOE-140,实验组,n=15),复温后开颅取脑组织检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、干湿重比(WDR)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量,进行组间比较。结果:与对照组相比,实验组SOD活性明显增强,MDA和WDR均明显下降(P<0.05);TNF-α和IL-1β均明显下降(P<0.05);6-keto-PGF1α/TXB2比值明显升高。结论:HOE-140在深低温停循环下选择性逆行脑灌注中能明显升高6-keto-PGF1α/TXB2比值,降低缺血再灌注损伤,有明显的脑保护作用。

糖尿病对大鼠脑缺血再灌注后缓激肽B1和B2受体表达及作用的影响

目的糖尿病基础上发生脑缺血再灌注损伤后,缓激肽B1受体(bradyldnin B1 receptor,B1R)和缓激肽B2受体(bradykinin B2 receptor,B2R)表达及作用的研究尚少。文中旨在观察比较非糖尿病和糖尿病大鼠脑缺血再灌注后B1R和B2R的表达差异及作用变化。方法构建非糖尿病大鼠和2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型,各41只,测试大鼠体重和生化指标。按照随机数字表法分别将8只非糖尿病大鼠及8只2型糖尿病大鼠分为2组:非糖尿病对照组和非糖尿病脑I/R 24 h组,糖尿病对照组和糖尿病脑I/R 24 h组,每组4只。实时荧光定量PCR检测再灌注24 h后B1R和B2R的表达。另将33只非糖尿病大鼠及33只2型糖尿病大鼠以随机数字表法各分为4组:假手术组(n=6)、等渗盐水组(n=9)、B1R拮抗剂组(n=9)和B2R拮抗剂组(n=9),I/R 24 h后,采用NSS评估神经功能缺损程度,TTC染色观察脑梗死体积,TUNEL染色测定细胞凋亡,Fluoro-Jade C染色检测神经元变性。结果 41只糖尿病大鼠造模后3、7、14 d空腹血糖[(23.45±5.01)、(23.71±4.87)、(22.72±4.11)mmol/L]较非糖尿病大鼠[(5.77±0.75)、(6.05±0.69)、(7.15±1.09)mmol/L]明显增加(P<0.05);14 d时血胆固醇[(4.59±3.43)mmol/L]、胰岛素[(67.26±12.02)pmol/L]较非糖尿病大鼠[(1.58±0.37)mmol/L、(25.34±4.88)pmol/L]明显升高(P<0.05),而三酰甘油水平差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病大鼠脑I/R 24 h后脑组织中B1R mRNA水平较非糖尿病大鼠升高更加明显(P<0.01),而B2R mRNA水平则相对下降(P<0.05)。非糖尿病B2R拮抗剂组NSS评分、梗死体积百分比、损伤和凋亡细胞数目较等渗盐水组明显减少(P<0.05);糖尿病B1R拮抗剂组NSS评分、梗死体积百分比、损伤和凋亡细胞数目较等渗盐水组明显减少(P<0.05)。结论非糖尿病大鼠脑I/R损伤诱导了B2R mRNA的显著上调,抑制B2R有效地减少脑梗死体积及减轻组织细胞损伤;糖尿病大鼠的脑I/R损伤诱导了B1R mRNA表达上调,B1R拮抗剂取代B2R拮抗剂发挥神经保护作用。

缓激肽B2受体基因多态性+9/-9bp对骨关节炎患者血清NO产物水平的影响

目的为研究缓激肽B2受体(BDKRB2)基因多态性+9/-9 bp与骨关节炎(OA)患者血清中一氧化氮(NO)产物水平的关系,从而更好的了解OA的发病机制。方法本研究共招募了156名膝关节骨关节炎患者和58名健康志愿者参与实验。参与研究对象OA患者的BDKRB2基因多态性被测定后按基因型进行分组,在OA患者滑膜组织中通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测BDKRB2的mRNA产物表达水平,通过NO检测试剂盒检测血清中NO产物水平。结果我们发现与+9/+9 bp基因型组相比,+9/-9 bp和-9/-9 bp基因型OA患者血清中NO产物水平更高。相关性分析显示BDKRB2 mRNA与NO水平呈显著正相关。与健康对照者相比,OA患者血清中NO产物水平显著升高,并且随着Kellgren-Lawrence(KL)评分增加而增加。多重线性回归分析(MLR)所示(性别和年龄校正后)血清NO产物水平与BDKRB2多态性和KL评分呈正相关,与肥胖呈负相关。结论本研究提示缓激肽B2受体基因+9/-9 bp多态性影响骨关节炎患者中BDKRB2受体基因以及NO产物的表达,其可能作为骨关节炎的一个遗传调制机制在炎症过程中起着关键作用。