选择性Bcl-2抑制剂Venetoclax的研究进展

慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)是一种成熟B淋巴细胞克隆增殖性肿瘤,以淋巴细胞在外周血、骨髓、脾脏和淋巴结聚集为特征。目前的标准治疗方案是氟达拉滨+环磷酰胺+利妥昔单抗的FCR方案。作为首个靶向药物,B细胞受体信号通路抑制剂极大的改变了CLL的治疗。Venetoclax是由Abb Vie公司和Genentech/Roche公司合作研发的口服选择性抗凋亡蛋白Bcl-2抑制剂,现已被FDA批准用于17p染色体缺失的CLL病人。它是唯BH3蛋白(Bcl-2蛋白家族成员)的类似物,可以重建恶性肿瘤细胞的凋亡通路。目前,Venetoclax与其他药物联合治疗CLL的Ⅰ-Ⅲ期临床试验、单用或联合其他药物治疗非霍奇金淋巴瘤和急性白血病的Ⅰ/Ⅱ期临床试验也在进行当中。本文叙述了Venetoclax全方面的研究进展。

选择性COX-2抑制剂引起心血管风险的研究进展

非甾体抗炎药(non-steroid anti-inflammatory drugs,NSAIDs)是一种有效的、广泛使用的抗炎镇痛药物,其对环氧合酶(cyclo-oxygenase,COX)亚型(COX-1、COX-2)的抑制作用将引起不同的反应,选择性COX-2抑制剂将显著增加不良心血管事件的风险,随着此类药物使用的增加和临床循证证据的积累,其带来的心血管风险引起了越来越多学者的关注。笔者通过归纳分析最新发表文献对选择性COX-2抑制剂引起心血管风险的研究进行综述,以期辅助临床合理用药,减少不良反应,提高用药安全性。

基于FAERS数据库对选择性环氧化酶-2抑制剂不良事件信号的挖掘和分析

目的挖掘3种选择性环氧化酶-2抑制剂(塞来昔布、罗非昔布、依托昔布)的药物不良事件(ADE)信号,为临床安全用药提供一定的参考。方法提取美国药品不良事件报告系统(FAERS)数据库2004年第1季度至2023年第3季度中塞来昔布、罗非昔布、依托昔布的ADE报告数据,分别以首选术语(PT)、按系统器官分类(SOC)对ADE进行排序。分析3种药物ADE报告的基本情况、严重ADE报告比例及累及系统器官、ADE信号的相同和不同。结果提取到塞来昔布的报告患者40087例,PT数107198个;罗非昔布的报告患者35827例,PT数239848个;依托昔布的报告患者295例,PT数954个。3种药物中,塞来昔布ADE报告数较多,但严重ADE比例较低(占66.40%),其他2种药物报告数少,但严重ADE报告占比均>99%。3种药物共得到1457个有效ADR信号,其中塞来昔布有效信号447个,罗非昔布有效信号960个,依托昔布有效信号50个。信号累及27个不同的SOC,其中塞来昔布排名前4位的为全身性疾病及给药部位各种反应(占17.18%)、心脏器官疾病(占10.96%)、各类神经系统疾病(占10.34%)、胃肠系统疾病(占9.52%);罗非昔布排名前4位的为心脏器官疾病(占22.73%)、各类神经系统疾病(占13.07%)、全身性疾病及给药部位各种反应(占8.80%)、血管与淋巴管类疾病(占6.72%);依托昔布排名前4位的为胃肠系统疾病(占17.51%)、皮肤及皮下组织类疾病(占12.58%)、全身性疾病及给药部位各种反应(占11.64%)、呼吸系统、胸及纵隔疾病(占7.55%)。3种药物共同的ADE信号为:高血压、呼吸困难。结论塞来昔布、罗非昔布、依托昔布发生ADE的累及系统器官各不相同,临床使用中应根据患者实际情况合理选择。

新型Bcl-2小分子抑制剂的设计、合成与初步活性评价

目的设计并合成一系列新型Bcl-2小分子抑制剂,测试其对Bcl-2和Bcl-2 G101V(Bcl-2突变体)与BH3-only蛋白相互作用的抑制活性,初步探究其构效关系,为后续相关研究提供参考。方法以临床化合物BGB-11417为先导化合物,通过骨架跃迁等方法,设计新型含螺环结构的Bcl-2小分子抑制剂。以苯甲醛为原料,通过取代、环化和偶联等反应合成目标化合物,并通过1H NMR和LC-MS进行结构确定。采用时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)评价目标化合物对Bcl-2和Bcl-2 G101V(Bcl-2突变体)与BH3-only蛋白相互作用的抑制能力。结果共合成8个新型螺环Bcl-2小分子抑制剂,其中29a[IC_(50)(Bcl-2):0.8 nmol·L^(-1),IC_(50)(Bcl-2 G101V):55.41 nmol·L^(-1)],29d[IC_(50)(Bcl-2):0.27 nmol·L^(-1),IC_(50)(Bcl-2 G101V):18.65 nmol·L^(-1)]对Bcl-2和Bcl-2 G101V与BH3-only蛋白的相互作用有较好的抑制活性。结论建立了一种新型螺环Bcl-2小分子抑制剂合成方法,发现了对Bcl-2和Bcl-2 G101V(Bcl-2突变体)与BH3-only蛋白相互作用有较好抑制活性的新化合物,其中29d具有进一步研究的价值。

新型BCL-2抑制剂的设计、合成及活性评价

通过研究BGB-11417与靶蛋白结合的相互作用,创造性的在P2口袋引入并环,合成了6个结构新颖的BCL-2抑制剂,产物经1H NMR和MS确证。以时间分辨荧光共振能量转移法(TR-FRET)测定目标化合物对BCL-2蛋白及BCL-2突变蛋白G101V和D103Y的体外抑制活性。活性结果表明化合物A、化合物B和化合物D对BCL-2及其突变蛋白G101V和D103Y有较好的抑制活性,可为合成活性更高的BCL-2抑制剂提供参考。

急性B淋巴细胞白血病BCL-2抑制剂耐药细胞系的构建及耐药机制研究

目的:利用急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞系RS4;11构建对BCL-2抑制剂耐药的耐药细胞系,并探讨其可能的耐药机制。方法:采用BCL-2抑制剂navitoclax和venetoclax小剂量低浓度递增的方法间歇诱导RS4;11细胞系,构建RS4;11/Nav和RS4;11/Ven耐药细胞系,通过MTT法检测不同药物浓度下细胞的存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,转录组测序技术(RNA-seq)检测RS4;11耐药细胞系和亲本细胞系中的差异表达基因(DEGs),RRT-PCR检测耐药细胞系与亲本细胞系中差异表达基因的mRNA表达水平,Western blot检测耐药细胞系和亲本细胞系中BCL-2家族抗凋亡蛋白的表达水平。结果:成功构建了对BCL-2抑制剂耐药的耐药细胞系RS4;11/Nav和RS4;11/Ven,RS4;11/Nav对navitoclax的耐药指数为328.655±47.377,RS4;11/Ven对venetoclax的耐药指数为2 894.027±300.311。流式细胞术检测细胞凋亡发现,相比耐药细胞系,RS4;11亲本细胞系明显被BCL-2抑制剂抑制,而耐药细胞系的凋亡率基本未受药物的影响。Western blot检测结果表明,BCL-2家族抗凋亡蛋白在耐药细胞系中的表达无明显增多。RNA-seq、RT-PCR和Western blot检测发现EP300在耐药细胞系中的表达较亲本细胞系明显增高(P<0.05)。结论:小剂量低浓度递增间歇诱导法可成功构建对BCL-2抑制剂耐药的B-ALL细胞系,并且其耐药机制可能与EP300的表达上调有关。

新型大环Bcl-2抑制剂的设计合成及生物活性评价

目的 为克服Bcl-2的基因突变引起的耐药问题,设计并合成一系列新型Bcl-2抑制剂,并分别评价其对Bcl-2以及G101V、D103Y两种突变的抑制活性,探讨初步构效关系。方法 通过大环化设计,合成了一系列新型Bcl-2抑制剂,并通过^(1)H NMR和ESI-MS进行结构确证。采用时间分辨荧光共振能量转移技术(TR-FRET)和MTS法测定化合物对激酶和肿瘤细胞的抑制活性。结果 合成了1个阳性化合物和9个新型大环Bcl-2抑制剂。抑酶活性结果表明化合物28c、28d、28e、28f具有较强的抑制Bcl-2以及G101V、D103Y两种突变激酶的活性。结论 合成的新型大环Bcl-2抑制剂中部分化合物(28c、28e、28g和28i)对肿瘤细胞的增殖具有一定的抑制活性。

BCL-2抑制剂联合用药治疗老年急性髓系白血病的临床研究

目的探讨B淋巴细胞瘤-2(B-cell Lymphoma-2,BCL-2)抑制剂联合用药在治疗老年急性髓系白血病中的治疗效果,为老年急性髓系白血病的治疗提供实践依据。方法选取甘肃省酒钢医院肿瘤血液科于2020年1月—2023年10月收治的30例老年急性髓系白血病患者作为研究对象,按照随机数表法分为对照组(15例)和干预组(15例)。干预组采用BCL-2抑制剂联合用药治疗,对照组采用常规治疗方法。比较两组治疗后的效果和不良反应发生率。结果治疗后,干预组的好转率(86.67%)显著高于对照组(46.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=5.400,P<0.05)。治疗后,干预组的血液学指标显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预组的免疫学指标优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预组不良反应总发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BCL-2抑制剂联合用药在治疗老年急性髓系白血病患者中,能有效改善患者的血液学指标和免疫学指标,促进疾病的好转,降低不良反应发生率。

环氧合酶-2抑制剂对佐剂性关节炎大鼠胃黏膜的影响

目的 探究选择性环氧合酶(COX)-2抑制剂是否加重佐剂性关节炎大鼠胃黏膜损伤及其机制。方法 将32只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、关节炎组、正常给药组和关节炎给药组,给予选择性COX-2抑制剂塞来昔布灌胃4 w,取大鼠胃组织行苏木素-伊红(HE)染色损伤评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测前列腺素(PG)E2,实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测COX-1、COX-2 mRNA。结果 与空白对照组比较,关节炎组、关节炎给药组胃黏膜PGE2均显著降低(P<0.05),胃黏膜损伤评分均显著增加(P<0.05);正常给药组胃黏膜PGE2、胃黏膜损伤评分与空白对照组比较无显著差异(P>0.05);关节炎组胃黏膜COX-1、COX-2均较空白对照组显著增加(P<0.05),正常给药组胃黏膜COX-1、COX-2与空白对照组相比均无显著差异(P>0.05);与关节炎组比较,关节炎给药组胃黏膜PGE2、COX-1、COX-2及胃黏膜损伤评分均无显著差异(P>0.05)。结论 在治疗剂量下,塞来昔布不会造成正常大鼠胃黏膜损伤,也不会加重佐剂性关节炎大鼠胃黏膜的损伤;佐剂性关节炎大鼠存在胃黏膜损伤;佐剂性关节炎大鼠胃黏膜损伤可能与黏膜局部PGE2下降相关,COX-1、COX-2表达增加可能与关节炎所致全身慢性炎症有关。

BCL-2选择性抑制剂——ABT-199的合成工艺改进

以3,3-二甲基环己酮(2)为原料,经5步反应制得中间体1-氯-4-[2-(氯甲基)-5,5-二甲基环己基-1-烯]苯(5);以5-溴-7-氮杂吲哚为原料,经3步反应制得制得5-羟基-1-三异丙基硅基-7-氮杂吲哚(8);8与4-[3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(9)经取代反应制得4-{3-[(7-氮杂吲哚)氧]-4-(甲氧基羰基)苯基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10);10脱保护后与5进行SN2取代反应,所得中间体与3-硝基-4-{[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基}苯磺酰胺经缩合反应合成了BCL-2选择性抑制剂ABT-199,总收率28.4%,其结构经1H NMR和ESI-MS确证。

BCL-2抑制剂治疗多发性骨髓瘤的研究进展

在过去的几十年里,多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)的治疗取得了重大进展,患者的生存率有了明显改善。然而,由于耐药性等其他问题,MM仍然无法治愈。B细胞淋巴瘤因子2(B-cell lymphoma-2,BCL-2)家族与细胞凋亡密切相关,在各种血液系统恶性肿瘤中异常表达,BCL-2靶向治疗成为一种有前景的治疗MM的方法。本文回顾了BCL-2靶向治疗MM的研究进展,以更好地了解这一治疗策略的前景。

选择性COX-2抑制剂对胃癌细胞增殖的影响

背景与目的:越来越多证据表明非甾体类抗炎药(NSAIDs)可以减少消化道肿瘤的危险,其化学预防作用在于抑制了环氧合酶-2(COX-2),但选择性COX-2抑制剂对胃癌细胞生长的影响及机制目前仍不十分清楚。本研究目的是观察选择性COX-2抑制剂尼美舒利对SGC7901胃腺癌细胞PGE2释放及增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT比色法和放射免疫分析法观察尼美舒利对SGC7901细胞增殖及前列腺素E2(PGE2)释放的影响,采用透射电镜及流式细胞仪观察尼美舒利对SGC7901细胞诱导凋亡的作用及细胞周期的影响。结果:尼美舒利呈时间、剂量依赖性方式抑制SGC7901细胞增殖,减少PGE2释放;改变细胞周期的分布,增加G0/G1期细胞比例;呈剂量依赖性非线型方式诱导其凋亡。结论:尼美舒利可能通过减少PGE2释放、影响细胞周期分布和诱导细胞凋亡,从而抑制SGC7901胃腺癌细胞的增殖,选择性抑制COX-2发挥其抑制人胃癌细胞恶性增殖和诱导凋亡的作用。

选择性COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌细胞增殖影响的探讨

目的:探讨选择性COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法:应用MTT法和FCM检测Celecoxib对胃癌SGC-7901细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期和COX-2蛋白和bcl-2蛋白表达的影响。结果:Celecoxib呈时间、剂量依赖性抑制胃癌SGC-7901细胞生长,72h细胞最高存活率为48.7%,最低为20.5%;COX-2蛋白含量由26.73±0.06降至5.79±1.44,bcl-2蛋白含量由2.76±0.14降至0.78±0.05,COX-2蛋白和bcl-2蛋白表达的降低呈浓度依赖性;随着药物浓度的增高,细胞凋亡率由3.0%增加到33.0%;G0/G1期细胞比例增加到(87.29±1.34)%,S期和G2/M期细胞比例分别降低到(8.91±0.78)%、(3.80±0.55)%。结论:Celecoxib能够诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡,影响细胞周期的分布,从而有效地抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖;Celecoxib诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡可能主要通过抑制COX-2的生物活性来实现,并与bcl-2蛋白表达的下调有关。

COX-2选择性抑制剂治疗疼痛的研究进展

传统非甾体类抗炎药(non-steroid anti-inflammatory drugs,NSAIDs)被广泛用于疼痛和炎症治疗,但这类药物的胃肠道副作用限制其使用。环氧化酶-2(cyclooxygenase,COX-2)选择性抑制药既有一定的消炎镇痛作用,也能减少胃肠道不良反应,广泛应用于类风湿性关节炎、骨性关节炎和围手术期疼痛。然而,一些研究证实COX-2选择抑制剂会增加心血管疾病的发生率,其临床应用应该结合患者的个体情况进行仔细评估和分析药物的风险。本文将对COX分类、COX-2选择性抑制剂的机制、临床应用及安全性进行综述。

选择性环氧合酶-2抑制剂Celebrex对胰腺癌血管内皮生长因子表达的影响

背景与目的:有研究证实,环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)与肿瘤,特别是与消化系统肿瘤形成的关系较为密切,而其抑制剂则具有抗肿瘤作用。本研究观察选择性COX-2抑制剂Celebrex对裸鼠胰腺癌PC-3细胞移植瘤血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法:观测Celebrex对裸鼠移植瘤生长的影响,并采用免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Westernblot)以及酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测裸鼠移植瘤组织中VEGF的表达。结果:给药组移植瘤生长曲线较对照组明显低平。对照组移植瘤体积为0.438cm3,给药组为0.212cm3(抑瘤率为51.6%,P<0.05)。给药组与对照组相比,VEGF表达明显减弱,ELISA显示,对照组VEGF表达量为(1.11±0.11)μg/g,给药组为(0.66±0.11)μg/g,VEGF抑制率为40.6%,两组间有显著性差异(P<0.05)。结论:COX-2可能参与了肿瘤新生血管的生成;选择性COX-2抑制剂Celebrex具有抑制肿瘤生长和对抗肿瘤新生血管生成的作用。

选择性COX-2抑制剂影响肿瘤细胞生长的作用机制

选择性环氧化酶2（COX-2）抑制剂包括塞来昔布、罗非昔布、NS398、SC58125、尼美舒利等。近年研究发现其对多种恶性肿瘤有预防及治疗作用,且可避免因COX-1抑制而产生的胃肠、肾脏和血小板的副作用,长期服用安全性高,因而是目前最具临床应用前景的抗癌药物。COX-2抑制剂的的抗肿瘤机制是多层次、多途径的,可通过多方面的作用抑制肿瘤细胞增生,抑制肿瘤血管生成,促进肿瘤细胞凋亡。本文就近年来对选择性COX-2抑制剂对肿瘤细胞生长影响的作用机制的研究作一综述。

选择性COX-2抑制剂尼美舒利抑制胃癌细胞株SGC7901端粒酶的活性

目的:探讨选择性COX-2抑制剂尼美舒利对胃癌细胞株SGC7901细胞增生及端粒酶活性的影响,为选择性COX-2抑制剂应用于胃癌的防治提供新的理论依据.方法:用不同浓度的尼美舒利(0,50,100,200及400μmol/L)处理SGC7901胃癌细胞株后,采用MTT比色试验和PCR-ELSIA半定量法检测细胞的增生和端粒酶活性,同时用相差显微镜动态观察细胞形态及生长方式上的改变.结果:尼美舒利呈时间剂量依赖性抑制SGC7901细胞的生长,同时他也能显著抑制SGC7901细胞的端粒酶的活性,50,100,200及400μmol/L浓度的尼美舒利实验组的吸光度值分别为2.12±0.11,1.54±0.08,1.13±0.09,0.79±0.12vs2.76±0.06(P<0.01),并呈剂量依赖关系.结论:选择性COX-2抑制剂尼美舒利能抑制胃癌细胞株SGC7901的端粒酶活性,进而抑制其细胞生长,这也可能是选择性COX-2抑制剂抗肿瘤作用的又一新的机制.

选择性环氧合酶-2抑制剂对胃癌细胞生长的影响

目的 观察选择性环氧合酶 - 2 ( COX- 2 )抑制剂 (美洛昔康、塞来昔布、罗非昔布 )对人胃癌细胞株SGC790 1生长的影响以及罗非昔布对人胃癌裸鼠移植瘤生长的抑制效应。方法 采用 3H-胸腺嘧啶核苷 ( 3H- Td R)掺入法了解细胞的增殖 ;用免疫组化检测细胞增殖核抗原 ( PCNA)及细胞 COX- 2的表达 ;用 TUNEL 染色法检测细胞凋亡。建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型 ,给予罗非昔布 8周 ,观察肿瘤大小、COX- 2及 PCNA表达情况。结果三种选择性 COX- 2抑制剂均较阿司匹林更有效抑制体外培养的胃癌细胞 3H- Td R掺入 ,3H-胸腺嘧啶掺入值与药物浓度呈负相关。美洛昔康、塞来昔布、罗非昔布对胃癌细胞 3H-胸腺嘧啶掺入的 IC50 分别为 1.18× 10 - 7mol/ L、1.68× 10 - 8mol/ L、4.3 9× 10 - 9mol/ L。经 1× 10 - 5m ol/ L 的上述三种药物作用 2 4h,SGC790 1细胞凋亡指数分别为 19.8%± 1.8%、2 4.6%± 1.2 % 3 1.2 %± 2 .2 %。 COX- 2抑制剂的选择性越高 ,凋亡指数也显著升高 ( P<0 .0 1)。罗非昔布对裸鼠胃癌原位移植瘤的抑瘤率为 93 .9% ;肿瘤组织的 COX- 2、PCNA表达均较对照组明显下降。结论 COX- 2抑制剂的选择性越高 ,对胃癌生长抑制作用越强。

选择性COX-2抑制剂超前镇痛对骨科围手术期镇痛的疗效观察

目的观察选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂超前镇痛对骨科围手术期镇痛的疗效。方法选择2009年1月至2010年3月在我院骨科住院的关节周围骨折、关节置换、脊柱骨折、断指再植及关节周围软组织松解的手术患者219例,采用随机双盲对照的方法分成A、B两组,分别给予选择性COX-2抑制剂超前镇痛进行围手术期镇痛以及自控镇痛泵(patien t con tro lled ana lges ia,PCA),进行镇痛。A组术前3 d起给予塞来昔布200 m gB id,术前1 h给予帕瑞昔布40 m g im,术后12 h根据疼痛程度再次给予帕瑞昔布40 m g im,同时术后第1～4天给予塞来昔布200 m gB id。B组术后给予镇痛泵止痛治疗。两组手术患者术中给予常规的全身麻醉或连续硬膜外麻醉。术后两组患者根据疼痛的程度(VA S评分大于6分)适当加用扶他林、曲马多以及哌替啶。观察患者疼痛VA S评分、消化道反应、出凝血检验、其他药物的使用及对骨折愈合的影响。结果选择性COX-2抑制剂超前镇痛对骨科围手术期镇痛效果在手术当天及术后第1天明显优于对照组,并且不良反应及患者的总体满意度优于对照组,且不增加出血的风险,同时对骨折的愈合没有影响。结论选择性COX-2抑制剂具有超前镇痛的作用,且疗效满意。