FDA批准首个选择性T细胞共刺激调节剂abatacept

施贵宝公司日前宣布，FDA批准abatacept（Orencia）治疗类风湿性关节炎（RA）。本品系首个选择性T细胞共刺激调节剂。

选择性雌激素受体调节剂对MC3T3-E1细胞生长分化的调节

目的探讨选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulator,SERM)———雷洛昔芬对小鼠颅顶成骨细胞MC3T3-E1分化的调节及其机制。方法体外培养MC3T3-E1细胞,10-7mol/L的雷洛昔芬和雌激素受体拮抗剂ICI-182780刺激细胞,另设空白对照组,24、48、72 h后检测各指标。MTT法检测细胞增殖;微量酶标法检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测细胞内β-catenin,雌激素受体α、β(estrogen receptorα、β,ERα、ERβ)mRNA的表达。结果 MC3T3-E1细胞分别加入10-7mol/L的雷洛昔芬和ICI-182780后,相对于对照组,雷洛昔芬处理组的促细胞增殖作用较强,在24 h增殖率最高,达(55.93±10.88)%;ALP活性增加,在48 h活性增加率最高,为(30.881±5.614)%;β-catenin、ERα和ERβmRNA的表达均增高,有统计学意义(P<0.05)。ICI-182780组的促细胞增殖率、ALP活性降低;β-catenin、ERα和ERβmRNA的表达均降低,有统计学意义(P<0.05)。结论雷洛昔芬可能通过上调β-catenin、ERα和ERβmRNA的表达促进MC3T3-E1细胞的增殖分化,而ICI-182780则下调β-catenin、ERα和ERβmRNA的表达抑制MC3T3-E1细胞的增殖和分化。

慢性HBV感染者外周血可诱导共刺激分子在CD8+ T淋巴细胞的表达及其临床意义

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血可诱导共刺激分子(ICOS)在CD8+T淋巴细胞的表达特点及临床意义。方法 选取2017年5月—2018年10月就诊的慢性乙型肝炎(CHB)100例、HBV-肝硬化(LC)25例和HBV-慢加急(或亚急)性肝衰竭(ACLF)26例分别纳入CHB组、HBV-LC组和HBV-ACLF组,健康对照(NC)组35例来自同期门诊体检健康者。采用流式细胞仪检测各组ICOS在CD8+T淋巴细胞的表达情况;分析CD8+T淋巴细胞ICOS表达水平与慢性HBV感染者疾病严重程度、HBV-ACLF预后及并发症的相关性;动态观察HBV-ACLF患者治疗过程中CD8+T淋巴细胞ICOS表达变化。结果 HBV-ACLF组外周血CD8+T淋巴细胞ICOS表达比率及平均荧光强度(MFI)均高于CHB组、HBV-LC组和NC组(P<0.05)。慢性HBV感染者ICOS的MFI与白蛋白、胆碱酯酶、总胆固醇、血红蛋白呈负相关(r=-0.263、-0.269、-0.273、-0.302,P=0.003、0.003、0.011、0.004);与直接胆红素、天冬氨酸转氨酶、凝血酶原时间、国际标准化比值呈正相关(r=0.248、0.208、0.331、0.315,P=0.005、0.020、0.003、0.009);与HBV-DNA、腹水及感染无明显相关性(P>0.05)。治疗过程中,HBV-ACLF患者ICOS的MFI无明显改变。但生存组ICOS的MFI在治疗第1周时较治疗前上升(P<0.05)。结论 HBV-ACLF患者外周血CD8+T淋巴细胞ICOS的表达水平明显升高,并与肝脏合成功能、炎症程度及预后相关,治疗早期ICOS水平变化有助于预测慢性HBV感染者的预后。

大剂量过敏原对致敏小鼠DC表面共刺激分子表达及调节性T细胞极化的作用

目的观察和比较致敏小鼠及正常小鼠DC表面共刺激分子表达及CD4+CD25+Foxp3+T数量的差异及大剂量过敏原在体外的作用。方法流式细胞仪检测致敏及正常对照小鼠脾脏DC表面分子CD11c、MHCⅡ、CD80、CD86表达。分离致敏及正常对照小鼠CD4+T细胞,流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+T细胞的数量。致敏小鼠脾脏DC、CD4+T细胞与10 mg/ml OVA或生理盐水共培养后,流式细胞仪检测并比较CD80、CD86等共刺激分子的表达及CD4+CD25+Foxp3+T细胞的数量。结果致敏小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86、MHCⅡ表达显著高于正常对照小鼠。10 mg/ml的OVA作用后,致敏小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86的表达明显降低。致敏小鼠脾脏细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞数量显著低于正常对照小鼠。10 mg/ml的OVA作用后,致敏小鼠CD4+CD25+Foxp3+T细胞数量显著上升。结论大剂量过敏原在体外诱导致敏小鼠T细胞的不反应性,其机制与降低致敏小鼠DC共刺激分子表达,诱导调节性T细胞极化等有关。

FK506对肝移植受者外周血T细胞亚群及共刺激分子表达调节的研究

目的通过观察他克莫司(FK506)对肝移植患者T细胞亚群及T细胞表面CD28、CD152和可诱导共刺激分子(ICOS)表达的影响,探讨FK506对细胞信号传导通路的作用。方法流式细胞技术测定健康对照组、终末期肝脏疾病患者组及使用FK506治疗的肝移植患者组T细胞亚群及各亚群细胞表面CD28、CD152和ICOS的表达。结果CD3+T细胞总数在3组间差异无显著性;与疾病对照组比较,治疗组CD4+T细胞数明显下降,CD8+T细胞数明显增加;CD4+T细胞和CD8+T细胞上CD28和ICOS的表达均显著降低,而CD152分子则均显著升高。结论FK506对治疗组患者T细胞亚群平衡紊乱的迅速纠正有重要作用。通过抑制正性共刺激分子并同时促进负性共刺激分子表达,FK506可在T细胞免疫信号传导通路的上游阻断T细胞活化信号的传导,发挥了免疫调节功能。

耐多药肺结核患者外周血调节性T细胞及表面共刺激分子的表达及作用探讨

目的探讨耐多药肺结核(MDR-TB)患者外周血中调节性T细胞(Treg)、相关细胞因子、表面共刺激分子的表达情况及免疫功能状态。方法回顾性收集2016年9月-2018年10月期间在我院初治的105例非耐药肺结核(DS-TB)患者、45例MDR-TB患者和50例健康志愿者的资料,采用ELISA法检测外周血转化生长因子β1(TGF-β1)和白介素10(IL-10)的含量;经荧光抗体标记后,采用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+和CD4+CD25+CD127-Treg细胞比例,以及Treg细胞表面共刺激分子-细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序性死亡因子-1(PD-1)、可诱导共刺激分子(ICOS)的表达情况,并进行相关性分析。结果DS-TB患者和MDR-TB患者外周血TGF-β1和IL-10含量均高于对照组,且MDR-TB患者外周血TGF-β1和IL-10含量高于DS-TB患者(P<0.05)。MDR-TB患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+和CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比例分别为(5.24±1.18)%和(7.76±1.75)%,高于对照组和DS-TB患者(P<0.05),且两者呈正相关性(R2=0.674,P<0.001)。另外,MDR-TB患者外周Treg细胞表面共刺激分子CTLA-4、PD-1和ICOS表达量分别为(0.49±0.15)%、(4.13±1.27)%、(0.46±0.23)%,均高于对照组和DS-TB患者(P<0.05)。相关分析显示,TGF-β1(R^2=0.521,P<0.001)、CTLA-4+Treg细胞(R^2=0.434,P<0.001)、PD-1+Treg细胞(R2=0.436,P<0.001)、ICOS+Treg细胞(R^2=0.570,P<0.001)比例与CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞含量呈正相关性。结论Treg细胞在肺结核患者特别是MDR-TB患者外周血中的表达明显升高,提示TB患者免疫功能受损程度可能与Treg细胞水平有关,且MDR-TB患者免疫抑制状态更严重。而Treg细胞表面共刺激分子CTLA-4、PD-1、ICOS有望成为未来肺结核治疗的潜在靶标。

负性共刺激分子BTLA/HVEM抑制肺结核患者CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)调节性T细胞增殖

目的研究B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及其配体疱疹病毒进入中介体(herpesvirus entry mediator,HVEM)在肺结核患者CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)调节性T细胞(CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg)中的表达及其与患者临床特征的关系。方法选取肺结核患者30例(肺结核组)和20例健康体检者(健康对照组),通过流式细胞术检测2组外周血淋巴细胞CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg细胞的阳性率,以及检测BTLA/HVEM在肺结核患者外周血和淋巴细胞上的表达;利用蛋白芯片法检测结核抗体;通过影像检测结果判断肺结核进展程度;采用罗氏培养法培养结核分枝杆菌。结果结核组CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg所占比例为(9.14±2.66)%,健康对照组CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg所占比例为(6.39±1.73)%,相对于健康对照组,肺结核组患者外周血中CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg比率明显增高;健康对照组CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg上BTLA和HVEM的表达率高于肺结核组;BTLA、HVEM在肺结核组患者CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg上的表达呈正相关;BTLA、HVEM在CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg上的表达在痰涂阳性患者组中更低,而与其他临床特征无关。结论肺结核患者体内的CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg增高,可能是抗结核免疫应答被抑制的原因,提示过度扩增导致数量异常增高的Treg是免疫应答不足和MTB逃逸的一个重要因素。负性共刺激信号BTLA/HVEM在结核患者体内下调提示其参与对CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg的增殖的抑制作用。

复发性生殖器疱疹患者外周血T淋巴细胞和共刺激分子的检测

目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者外周血中T细胞亚群和共刺激分子的表达,探讨其在RGH免疫中的作用。方法用免疫荧光技术和流式细胞仪检测RGH及对照组血中T细胞亚群和共刺激分子(CD28,CD25,Fas,FasL,4-1BB)的水平。结果 RGH组CD3+,CD4+/CD8+,CD4+CD28+细胞百分数(59.48±10.9,0.89±0.20,27.69±7.34)显著低于健康对照组(69.79+5.63,1.14+0.39,33.68±7.32),差异均有统计学意义(P<0.05);CD4+CD28-,CD25+细胞百分数及Fas(6.55±4.46,15.81±8.62,27.58±3.10)显著高于健康对照(1.93±1.36,7.13±5.13,23.11±5.63),差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论 RGH外周血CD3+,CD4+/CD8+下降,CD4+CD28+低表达,及CD25+和Fas高表达,可能是RGH复发的免疫障碍环节之一。

不同免疫状态肝移植受者外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子的表达及意义

目的探讨不同免疫状态肝移植受者外周血T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)、共刺激分子(CD80、CD86)的表达,及其判断肝移植受者不同免疫状态的价值。方法 52例肝移植受者,分为免疫耐受组28例、急性排斥反应组(排斥组)13例、药物不良反应组(药物反应组)11例。采用流式细胞术测定三组患者外周血CD4+、CD8+及CD80、CD86的表达水平,并计算CD4+/CD8+。结果与免疫耐受组和药物反应组比较,排斥组患者外周血CD8+水平较低,而CD4+、CD4+/CD8+、CD80、CD86均较高(P<0.05～0.01)。与免疫耐受组比较,药物反应组患者外周血CD8+、CD80、CD86水平明显升高(P<0.05～0.01),而CD4+、CD4+/CD8+差异无统计学意义(均为P>0.05)。结论免疫T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)、CD80、CD86可作为判断肝移植受者免疫状态的指标。

阿糖胞苷增强K562细胞共刺激分子B7表达以及对T细胞的免疫应答

目的探讨阿糖胞苷(Ara-c)对白血病细胞(K562)B7分子表达以及对T细胞免疫应答的影响。方法用流式细胞术检测K562细胞经Ara-c处理后B7分子的表达以及对T细胞表面标记的影响。MTT法检测不同效靶比的情况下,诱导后的K562细胞对外周血单个核细胞(PBMNC)的刺激作用,以及用RT-PCR法检测B7分子刺激PBMNC分泌细胞因子γ干扰素(IFN-γ)的测定。结果Ara-c能刺激K562细胞B7分子的表达,呈时间依赖性。诱导后的K562细胞显著刺激PBMNC增殖并产生IFN-γ,并能检测到T细胞表面标记。结论Ara-c通过刺激K562细胞B7分子表达,显著提高了白血病细胞的免疫原性。

桥本甲状腺炎患者γδ T细胞表面共刺激分子的表达及意义

目的探讨桥本甲状腺炎(HT)患者γδT细胞与自身抗体形成之间的关系及机制,寻找潜在的干预靶点。方法流式细胞术检测19例HT患者、15例健康对照者外周血及5例HT和5例单纯性甲状腺肿患者甲状腺组织中γδT细胞及其亚型的比例水平;流式细胞术检测γδT细胞表面活化分子CD69、HLA-DR以及共刺激分子CD40配体(CD40L)、诱导性共刺激分子(ICOS)的表达水平;ELISA检测γδT细胞和B细胞共培养上清中Ig G、Ig M水平,并通过抗体阻断实验分析参与B细胞抗体产生的分子机制。结果与健康对照组相比,HT患者Vδ1+γδT细胞比例明显增加;CD69、HLA-DR、CD40L、ICOS的表达水平均显著上调;γδT细胞和B细胞共培养上清中Ig G的水平显著增高,而添加抗CD40L和抗ICOS抗体能够使共培养上清中Ig G的表达水平明显下降。结论 HT患者的γδT细胞通过表达共刺激分子CD40L和ICOS为B细胞提供协同刺激信号辅助其产生抗体,提示γδT细胞在HT的发病机制中可能发挥着重要作用。

骨髓增生异常综合征CD3^+CD4^+T细胞共刺激分子表达的研究

本研究检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS?CD3+CD4+T细胞共刺激分子的表达,为进一步探讨MDS发病机制积累信息。以38例初治MDS患者为研究对象,依据FAB分型将他们进一步划分为RA/RARS、RAEB/RAEB-t组;以11例献血员为正常对照,应用流式细胞术检测两组外周血CD3+CD4+T细胞共刺激分子CD28、CD154、CTLA-4、PD-1、CD25的表达。结果表明:MDS组CD28表达下降,CD154升高,CTLA-4、PD-1、CD25表达明显升高。随着疾病恶性程度的增高,RAEB/RAEB-t组CTLA-4、PD-1的表达以及CTLA-4/CD28比值亦较RA/RARS组升高。结论:MDS患者CD3+CD4+T细胞共刺激分子表达存在异常改变,其表达异常可能在MDS的发病机制中起一定作用。

一种新的共刺激信号CD_(137)在人T细胞及其亚群中的表达特点

目的：为了分析ＣＤ１３７ 在正常人静止状态和受ＰＨＡ刺激后不同时间Ｔ淋巴细胞及其亚群上的表达特点和规律。方法：采用免疫细胞化学和流式细胞术。结果：发现未刺激的淋巴细胞上无ＣＤ１３７ 表达。经ＰＨＡ 刺激后（ 仅Ｔ细胞发生转化） ，２４ ｈ 已有表达，以后表达率逐渐增高。免疫细胞化学法显示，２４、４８ 、７２ ｈ ＣＤ１３７ 的表达率分别为（１００ ±２０） ％ 、（１３０ ±２０） ％ 、（２００±４０） ％ ，ＣＤ１３７ 表达在细胞膜表面，细胞浆、细胞核无表达。流式细胞仪测定结果与免疫细胞化学法相吻合，ＰＨＡ 刺激２４、４８ 、７２ ｈ 的表达率分别为（８１６ ±１２８） ％ 、（１２３９ ±２１５） ％ 、（２１６０ ±４３０） ％ 。ＣＤ４＋ Ｔ细胞和ＣＤ８＋ 细胞均可表达，但在ＣＤ４＋ Ｔ细胞上的表达率高于ＣＤ８＋ 细胞。结论：ＣＤ１３７ 仅表达于活化Ｔ细胞表面，ＣＤ４＋ 和ＣＤ８＋ 细胞均可表达。静止Ｔ细胞无ＣＤ１３７ 表达。

共刺激对T细胞功能和细胞因子格局的作用

利用Ｂ７－１单抗和环孢素Ａ（ＣｓＡ）处理ＡＰＣｖＴ细胞反应系统，探讨了Ｂ７／ＣＤ２８共刺激对Ｔ细胞增殖及细胞因子产生的影响，并用ＲＴ－ＰＣＲ方法分析了细胞因子基因格局的改变。结果表明Ｂ７－１单抗可抑制特异性抗原诱导的Ｔ细胞增殖和ＩＬ－２的产生，Ｂ７－１单抗与ＣｓＡ联用可阻断Ｔ细胞增殖和ＩＬ－２产生。Ｂ７－１单抗对ＩＬ－４的产生未显示明显的影响（Ｐ＞ ０．０５），而Ｂ７－１单抗与ＣｓＡ联用ＩＬ－４仍可检测到（Ｐ＞ ０．０５）。Ｂ７－１单抗能抑制ＩＬ－２和γ－ＩＦＮｍ ＲＮＡ表达，Ｂ７－１单抗与ＣｓＡ联用能够阻断ＩＬ－２和γ－ＩＦＮ ｍ ＲＮＡ表达，ＩＬ－４和ＩＬ－１０ｍ ＲＮＡ仍能表达。

γδT细胞表达共刺激分子及协同信号通路的研究进展

根据T细胞受体的不同,人体T淋巴细胞分为αβT细胞和γδT细胞。近年αβT细胞共刺激信号在调节T细胞活化及耐受方面的研究取得了重要的进展,而在γδT细胞相关的研究较少。明确这些共刺激分子及其信号通路在γδT细胞免疫应答的不同阶段发挥的不同正向负向调节作用,将为病毒感染、肿瘤、自身免疫性疾病、移植后排斥等疾病的治疗提供新的前景。

尿毒症患者T细胞亚群共刺激分子CD28和CD152的表达分析

目的探讨尿毒症患者T细胞亚群表面共刺激分子CD28和CD152(CTLA4)的表达与细胞免疫功能紊乱的关系。方法采用流式细胞术测定尿毒症患者外周血T淋巴细胞上共刺激分子对CD28和CD152(CTLA4)的表达。结果尿毒症患者与健康对照组相比,CD4+T细胞相对计数和CD4/CD8比值均明显增加,共刺激分子CD28和CD152(CTLA4)在CD4+和CD8+T细胞上表达均明显增加,P值均<0.05。尿毒症患者CD4+T细胞表达的CD28明显高于CD8+T细胞,两组间T细胞亚群上共刺激分子CD28表达率差值间比较有显著性差异,P<0.05;患者的CD152分子在CD4+T细胞上的表达较CD8+T细胞上明显减少(P=0.027)。结论尿毒症患者的细胞免疫功能紊乱,T细胞亚群比例失衡,共刺激分子对CD28、CD152(CTLA4)在CD4+和CD8+T细胞上表达均增加,提示可能存在T细胞活化或抑制信号调节失衡。

T细胞共刺激分子及其亚群在胃癌和大肠癌组织中表达的意义

目的探讨T细胞共刺激分子及其亚群在胃癌、大肠癌发生及预后中的作用。方法应用流式细胞术检测38例胃癌、42例大肠癌患者和21例健康人(对照组)外周血T细胞亚群及其共刺激分子CD28的表达。结果T细胞共刺激分子CD28(CD28+CD3+)表达:胃癌组为(25.80±10.56)%,大肠癌组为(28.95±9.29)%,均明显高于对照组的(0.82±0.98)%,P<0.01;总T细胞(CD3+)表达:胃癌组为(53.61±13.84)%,大肠癌组为(55.96±10.68)%,均明显低于对照组的(72.07±7.83)%,P<0.01;CD4+T细胞(CD4+CD3+)表达:胃癌组为(29.84±9.71)%,大肠癌组为(33.75±9.04)%,也均明显低于对照组的(38.79±5.08)%,P<0.01,P<0.05;细胞毒T细胞(CTL,CD8+CD28+CD3+)表达:胃癌组为(1.57±1.99)%,大肠癌组为(1.93±2.61)%,均明显高于对照组的(0.02±0.04)%,P<0.01;胃癌组CD8+抑制性T细胞(CD8+CD28-CD3+)和CD4/CD8比值明显低于对照组〔(16.06±6.94)%vs(20.56±6.54)%,P<0.05;(1.10±0.51)%vs(1.36±0.31)%,P<0.05〕;大肠癌组调节性T细胞(CD4+CD25+CD3+)明显高于对照组〔(19.74±6.89)%vs(13.72±3.08)%,P<0.01〕。胃癌组和大肠癌组患者手术前和手术后1周外周血T细胞亚群(除外胃癌组的CD3+细胞和CD28+CD3-细胞)的差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌和大肠癌患者T细胞数量明显减少,T细胞共刺激分子CD28表达增高。胃癌患者CD4+T细胞显著减少;大肠癌患者调节性T细胞显著增加。

T细胞亚群及共刺激分子表达与系统性红斑狼疮免疫病理的关系

目的 探讨T细胞亚群及共刺激分子表达与系统性红斑狼疮免疫病理的关系。方法 采用免疫荧光标记技术和流式细胞仪检测技术对系统性红斑狼疮 (SLE)患者和正常人外周血T细胞亚群及外周血单个核细胞膜表面共刺激分子的表达进行分析。结果 ①与正常人相比 ,SLE患者CD3+ 、CD4+ T细胞亚群显著减少 ,CD4/CD8比例失调 ,双标记CD4+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8+ T细胞亦显著减少 ;②患者共刺激分子CD2 8表达显著降低 ,4-1BB分子表达显著增高 ;③患者T细胞CD4/CD8与抗核抗体呈负相关 ,共刺激分子 4- 1BB与抗核抗体、尿蛋白呈正相关 ,而与CD4+ CD2 8+ T细胞亚群呈负相关。结论 T细胞亚群及共刺激分子表达异常在系统性红斑狼疮发病机制中可能具有重要作用。