茶碱对嗜酸性粒细胞表面L选择素的脱落影响

目的:观察茶碱对嗜酸性粒细胞(Eos)表达L选择素(L- selectin)的影响。方法:采取15例正常人外周血,体外用不同浓度茶碱(10-3、10-4、10-5mol·L-1)和重组人白细胞介素(rhIL)-5(10-8 mol·L-1)预处理,以地塞米松(10-4 mol·L-1)为对照,用反转录-聚合酶链式反应(RT- PCR)和流式细胞仪法分别从mRNA和蛋白水平测定Eos L- selectin的表达及Eos的活化状态。结果:①茶碱和地塞米松均能抑制IL 5引起的Eos的活化和表面L -selectin的脱落;②茶碱对细胞内L- selectin mRNA水平无影响;③Eos的活化与L selectin的脱落呈相关关系。结论:低于治疗浓度的茶碱即可抑制Eos表面L- selectin的脱落,并可能因此影响Eos的粘附功能。

rhGH对老年多器官功能不全患者CD47、L-选择素及高级氧化蛋白产物表达的影响

目的观察重组人生长激素(rh GH)对老年多器官功能不全(MODSE)患者膜糖蛋白CD47、L-选择素及高级氧化蛋白产物(AOPPs)表达的影响。方法 66例MODSE患者随机均分为对照组(n=33,给予常规治疗)及治疗组(n=33,在常规治疗基础上加用rh GH)。所有患者均于治疗前及治疗后第3、14、28天取静脉血,流式细胞仪检测血清CD47阳性率,ELISA和分光光度计法检测L-选择素及AOPPs浓度,并观察两组患者APACHEⅢ评分的变化。结果与治疗前比较,对照组和治疗组的CD47阳性率增高,AOPPs浓度、L-选择素水平及APACHEⅢ评分降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,治疗组CD47阳性率增高(P<0.05),AOPPs浓度降低,L-选择素水平下降,APACHEⅢ评分降低,病死率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组内观察,与治疗后第3天比较,第14天CD47阳性率增高,AOPPs浓度降低,L-选择素水平下降,APACHEⅢ评分降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与治疗后第14天比较,第28天CD47阳性率增高,AOPPs浓度降低,L-选择素水平下降,APACHEⅢ评分降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 rh GH可增强MODSE患者的免疫功能,减轻氧化应激及炎症反应,并可降低病死率。

2型糖尿病患者血清L-选择素与大血管病变的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者大血管病变与L-选择素(CD62L)的关系。方法将T2DM患者分为合并大血管病变(A组)60例、无大血管病变(B组)65例,采用ELISA测定其血清CD62L、血糖、血脂等,并与55例正常对照组比较。结果A组血清CD62L显著高于B组和对照组;CD62L与超敏C反应蛋白(hsC-RP)、纤维蛋白原、甘油三酯、胆固醇及低密度脂蛋白呈显著正相关,且收缩压、hsC-RP和CD62L与T2DM大血管病变呈独立正相关。结论早期检测CD62L对预防及诊断糖尿病大血管病变具有重要意义。

2-甲氧基雌二醇对K562细胞L-选择素及其基因表达的影响

目的观察2-甲氧基雌二醇(2-ME)对慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞L-选择素表达的影响,并通过分析L-选择素与bcr/abl融合基因表达的关系探讨2-ME的作用机制。方法实验分3组。①对照组:培养基中不含2-ME;②实验组:分别用1、2、4、8、16μmol/L的2-ME处理K562细胞36h,观察各项指标的变化;③阴性对照组:培养基中以无RNase水代替K562细胞。用流式细胞术(FCM)检测K562细胞L-选择素蛋白表达;半定量RT-PCR检测L-选择素mRNA的表达;SYBRGreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测bcr/abl融合基因的mRNA表达。结果不同浓度的2-ME与K562细胞作用36h后,L-选择素蛋白及其mRNA的表达量均呈剂量依赖性增加,与对照组比较均有显著性差异(P<0.05,P<0.01);L-选择素mRNA与其蛋白表达之间呈正相关(r=0.758,P=0.004)。L-选择素mRNA与bcr/abl融合基因mRNA之间呈负相关(r=-0.968,P=0.001)。结论2-ME可能通过抑制K562细胞bcr/abl融合基因的表达,增加L-选择素mRNA及其蛋白表达水平,改善或恢复K562细胞的黏附缺陷。

变应性鼻炎患者sL-选择素的表达与意义

目的:探讨变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者中sL-选择素(sL-selectin)的表达及临床意义。方法:用ELISA的方法进行定量检测60例变应性鼻炎患者(其中常年性及季节性变应性鼻炎各30例)血清中sL-选择素的含量,将其结果与健康对照组结果进行统计学分析。结果:常年性AR组sL-选择素含量(2830.1±622.6)ng/mL;季节性AR组sL-选择素含量(3115.2±407.0)ng/mL,对照组为(2253.5±275.9)ng/mL;常年性及季节性变应性鼻炎患者中sL-选择素均高度表达,均比对照组结果增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:sL-选择素在AR患者中的高表达与疾病发病机理有重要关系,检测患者血清中sL-选择素的含量对疾病的诊断、病情估计有一定帮助。

人L-选择素的原核表达及多克隆抗体的制备

目的:构建人L-选择素原核表达载体,表达并纯化人L-选择素重组蛋白,制备兔抗人L-选择素多克隆抗体。方法:利用人L-选择素cDNA的N末端胞外结构区153个氨基酸的开放阅读框架(ORF),通过 PCR方法扩增出人L-选择素目的片段。将扩增的基因插入表达载体pQE40的BamH I和HindⅢ酶切位点之间,再经转化使其在大肠杆菌M15中表达,产生含6-His-tag的融合蛋白。融合蛋白经Ni亲合层析柱纯化和 SDS-PAGE分析后,用以免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体。最后经Western blotting检测和斑点杂交(DIBA) 进行抗体效价测定。结果:酶切鉴定和DNA测序显示,pQE40-L-选择素重组表达载体含有人L-选择素N末端结构区153个氨基酸的cDNA序列;通过在大肠杆菌M15中的表达和纯化分析,获得了蛋白含量为 600 mg·L-1的人L-选择素蛋白;通过免疫新西兰白兔和抗体效价测定,得到抗血清效价达1:1 000的多克隆抗体。结论:人L-选择素蛋白可在M15大肠杆菌中高效表达,其多克隆抗体效价较高。

结核病患者中性粒细胞L选择素的表达及意义

目的检测结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)体外感染结核分枝杆菌(M.tb)前后L选择素(CD62L)的表达情况,并探讨CD62L在结核病的发展过程中的作用。方法应用流式细胞术检测结核病患者PMN表面CD62L的表达,同时检测正常人PMN的CD62L表达率;体外感染M.tb后,再检测结核病患者和正常人PMN的CD62L表达率。结果结核病患者PMN表面高表达CD62L,与正常人PMN表面CD62L表达无明显差异;感染M.tb后,结核病患者和正常人PMN表面CD62L表达率显著降低(P<0.05)。结论结核病患者PMN表面CD62L参与了PMN的趋化过程,在结核炎症反应中发挥重要作用,推动结核病的发展过程。

甘肃东乡族L选择素P213S基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的探讨L选择素基因多态性在甘肃东乡族人群中的分布及其与2型糖尿病（T2DM）的关系。方法应用聚合酶链反应-高温连接酶检测反应（PCR—LDR）技术检测116例T2DM和126例健康对照者L选择素的基因型，以生物化学法检测他们的血糖、胰岛素、血脂、肌酐和尿素氮等水平。结果L选择素基因型PP、PS和SS频率在T2DM组和对照组间分别为44．8％、48．3％、6．9％和38．1％、44．4％、17．5％；等住基因P、S频率在T2DM组和对照组分别为69．0％、31．0％和60．3％、39．7％。其基因型频率和等位基因频率在T2DM组和对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。P等位基因患T2DM的风险是S等位基因的1．462倍（OR=1．462，95％CI=1．005～2．127）。结论 L选择素P213S基因多态性与T2DM的发病有相关性，P等位基因可能是甘肃东乡族人群中T2DM发病的危险因素之一。

进展性脑梗死L选择素及P选择素的研究

目的 观察进展性脑梗死患者外周血中L选择素（CD62L）和P选择素（CD62P）的表达及其临床意义。方法 选择脑梗死患者140例，其中进展性脑梗死患者32例（进展组），稳定性脑梗死患者108例（稳定组），应用流式细胞仪分别检测外周血中CD62L和CD62P在发病3、7、14d的阳性表达率，并与40例健康者进行对照（对照组）。结果 （1）进展组发病3d CD62L阳性表达率为（6．38±3．78）％，显著低于稳定组的（12．75±7．26）％和对照组的（24．23±10．54）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）进展组发病3d CD62P阳性表达率为（24．36±8．52）％，显著高于稳定组的（17．58±7．31）％和对照组的（8．96±6．21）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）随着病程的发展，进展组CD62L的阳性表达率逐渐增加，CD62P的阳性表达率逐渐下降。发病14d进展组的CD62L阳性表达率仍低于对照组，而CD62P阳性表达率与对照组比较差异无统计学意义。结论 进展性脑梗死发生时，CD62L的阳性表达率明显下降，CD62P的阳性表达率明显上升，提示自细胞激活及血小板活化在进展性脑梗死的发生、发展中起重要作用。CD62L和CD62P的检测可作为进展性脑梗死发生、发展的观察指标，对预后评估及指导治疗有重要帮助。

可溶性P-选择素和L-选择素在鼻息肉中的表达和意义

目的检测可溶性P-选择素和L-选择素在鼻息肉患者血清和组织匀浆中含量的变化,探讨其在鼻息肉发病机制中的作用及其与复发可能的相关性。方法采用酶联免疫吸附法和放射免疫法分别检测56例各型鼻息肉组及22例健康对照组的血清及组织匀浆中P-选择素和L-选择素的含量变化,做出分析。结果①两种方法测得P-选择素在实验组与对照组中的含量比较有统计学意义(P<0.05),伴有变应性鼻炎鼻息肉组、复发鼻息肉组与鼻窦炎鼻息肉组比较有统计学意义(P<0.05),伴有变应性鼻炎鼻息肉组、复发鼻息肉组比较无统计学意义(P>0.05)。②两种方法测得L-选择素在实验组与对照组中的含量比较有统计学意义(P<0.05),3组实验组组间两两比较无统计学意义(P>0.05)。结论高表达的P-选择素和L-选择素可能通过参与嗜酸细胞等炎症细胞的浸润、活化、增殖,从而在鼻息肉的形成过程中起重要作用。P-选择素表达量的多少可能与鼻息肉的复发有关。

慢性肾功能不全患者外周血血小板P-选择素、L-选择素和细胞间粘附分子-1表达的研究

目的 :研究血小板P -选择素 (CD6 2 -P)、淋巴细胞L -选择素 (CD6 2 -L)和细胞间粘附因子 - 1(ICAM- 1)在慢性肾功能不全时的变化规律及与肾功能的相关性。方法 :用流式细胞术及免疫荧光染色法 ,分析了4 9例慢性肾功能不全患者外周血血小板P -选择素 (CD6 2 -P) ,淋巴细胞L -选择素 (CD6 2 -L) ,ICAM - 1(CD - 5 9)表达情况。结果 :慢性肾功能不全各期患者外周淋巴细胞L -选择素表达量与正常对照组无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,氮质血症期和尿毒症期患者血小板P -选择素表达量低于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,而尿毒症期ICAM - 1表达量高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。患者CD6 2 -P及ICAM - 1与肾功能指标血尿素氮(BUN)及血肌肝 (Cr)之间有明显的的相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :血小板P选择素、ICAM - 1表达可能与慢性肾功能损坏的进程有关。

选择素在家兔糖尿病酮症酸中毒肺损伤中的作用

目的 :研究选择素在糖尿病酮症酸中毒肺损伤中的作用。方法 :雄性新西兰家兔 1 2只 ,随机分为实验组 (DK组 ) 6只和生理盐水对照组 (NS组 ) 6只 ,DK组给予四氧嘧啶 (alloxan ) 1 50mg·kg- 1 和链脲佐菌素 (STZ ) 1 50mg·kg- 1 ,对照组给予等剂量生理盐水 ,72h后处死动物 ,检测动脉血气 ,取肺组织进行组化研究。结果 :实验组动物免疫组化显示选择素的表达增多。结论

选择素的放射响应及L选择素的调控

放射生物剂量计的研究一直是放射生物学领域中的一个热点及难点,核事故后对放射伤员进行快速、准确的诊断是事故救援及后续正确救治的关键,建立快速、高通量的放射生物剂量诊断方法具有重要的意义。外周血是临床检验中方便实用的检材,血液中蛋白质检验方法多样,易实现高通量、快速检测。在现阶段的研究中发现外周血中P选择素和L选择素均具有较好的放射响应,但是在放射医学领域关于选择素家族分子的研究尚未深入。本文对放射医学领域中选择素家族的研究现状进行总结,并对L选择素的调控机制进行简单综述,期望能为放射生物剂量计的研究引入新的分子,为将来放射损伤后L选择素的调控机制研究提供帮助。

腺样体组织中CD62L和CD8^+的表达

目的探讨腺样体免疫状况与分泌性中耳炎(SOM)的相关性。方法采用免疫组织化学法检测43例腺样体肥大伴SOM者及40例单纯腺样体肥大者腺样体组织的CD62L、CD8+的表达。结果伴SOM组的CD62L及CD8+的表达均高于单纯腺样体肥大组,两组比较其差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SOM患儿腺样体中CD62L、CD8+淋巴细胞活性增高,导致腺样体局部免疫异常可能是引起SOM的主要因素之一。

机体炎症因子和氧化应激标志物介导姜黄素抑制骨性关节炎的作用机制

目的：探讨骨性关节炎（OA）关节软骨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD47、L-选择素及高级氧化蛋白产物（AOPP）表达的变化以及姜黄素（Cur）的干预作用。方珐：建立C57BIM6小鼠OA模型，20只小鼠随机分为手术对照组、模型对照组、Cur25组和Cur50组（术后分别每日接受25μmol／L和50μmol／L浓度姜黄素腹腔注射）。4周后取材，采用免疫组织化学法观察各组大体标本形态学变化，电子显微镜下观察软骨组织超微结构；培养各组软骨细胞，运用蛋白质印迹法检测各组MMP-2、MCP-1和CD47表达，ELISA和分光光度法检测L-选择素水平及AOPP浓度变化。结果：软骨组织标本形态学变化模型对照组最明显，Cur25组次之；与手术对照组比较，模型对照组、Cur25组、cur50组软骨细胞MMP-2、MCP-1表达均增多（均P〈0．05），CD47表达均下降（均P〈0．05），L．选择素水平及AOPP浓度均增加（均P〈0．05）；与模型对照组比较，Cur25组和Cur50组软骨细胞MMP-2、MCP-1、L-选择素及AOPP的表达下降（均P〈0．05），CIM7的表达上升（均P〈0．05），且与Cur25组比较，Cur50组的上述变化更为显著（均P〈0．05）。结论：MMP-2、MCP—1、CD47、L-选择素及AOPP的异常表达与OA软骨退变的病理过程相关。姜黄素可缓解关节软骨的退变，减轻软骨炎症，提高软骨细胞的代谢活性，且此作用与姜黄素的浓度有关。

LIF基因修饰的ECV-304细胞对脐血造血细胞体外培养的影响

目的观察经LIF基因修饰的ECV-304细胞对脐血造血干/祖细胞(HSC/HPC)体外培养的影响。方法用脂质体转染法将pcDNA3.0-LIF真核表达质粒导入ECV-304人脐静脉内皮细胞,并通过G418筛选获得能稳定表达LIF的ECV-304转基因细胞。用LIF基因修饰的ECV-304细胞与脐血CD34+细胞共培养,检测培养前后CD54+细胞、CD34+CD54+细胞和CD34+CD62L+细胞数量的变化,观察转LIF基因的ECV-304细胞对脐血造血细胞的影响。结果成功获得经LIF基因修饰的ECV-304转基因细胞,该细胞能支持脐血CD34+细胞的扩增,且能维持细胞表面与归巢有关的黏附分子的表达,培养后CD34+CD54+和CD34+CD62L+细胞亚群数量显著增加。结论经LIF基因修饰的ECV-304细胞可改善脐血造血细胞体外培养的微环境,有助于抑制HSC/HPC的分化并保持其归巢能力。

L选择素在乳腺癌前哨淋巴结的趋向性表达及其临床意义

目的:探讨L选择素(L-selectin)在乳腺癌前哨淋巴结(SLN)中的表达,分析乳腺癌SLN状况与L选择素表达的关系。方法:选择T1-2N0M0乳腺癌患者68例,以亚甲蓝为示踪剂先行前哨淋巴结活检术(SLNB),应用免疫组织化学法检测本组68例乳腺癌SLN,乳腺癌原发灶,癌旁乳腺组织以及20例III级不典型增生乳腺组织中L选择素的表达。结果:68例乳腺癌患者中SLN检出成功62例,检出率为91.17%(62/68),其中假阴性3例(3/32)。阳性SLN中L选择素阳性表达率明显高于乳腺癌组织、癌旁组织(均P<0.05)。SLN阳性患者其原发灶L选择素阳性表达率明显高于SLN阴性患者(P<0.05)。SLN及非前哨淋巴结(NSLN)均阳性患者其原发灶L选择素阳性表达率明显高于SLN及NSLN均阴性患者(P<0.001)。结论:L选择素在阳性SLN转移癌中表达增高,提示L选择素在乳腺癌细胞的淋巴结趋向性中起重要作用;SLN状态与L选择素阳性表达有密切关系,两者相结合分析可以更全面地反映乳腺癌转移规律及腋淋巴结状态。

急性肺损伤大鼠多形核白细胞L选择素变化及其在肺内扣押中的作用

目的 探讨急性肺损伤 (ALI)大鼠循环血多形核白细胞 (PMN)L选择素表达的变化及其于肺内扣押中的作用。方法 通过静脉注射内毒素 (5mg/kg)复制大鼠ALI模型 ,5 6只大鼠随机分为7组 ,每组 8只。分别为 :(1)内毒素 5min组 ;(2 )内毒素 15min组 ;(3)内毒素 30min组 ;(4 )内毒素 6 0min组 ;(5 )fucodin干预 5min组 ;(6 )Fucodin干预 15min组 :静脉注射fucodin 5mg/kg后 ,立即静脉注射内毒素 5mg/kg ;(7)正常对照组 :静脉注射等量生理盐水替代内毒素。用免疫荧光间接法和流式细胞仪检测大鼠ALI过程中PMNL选择素蛋白表达的变化 ;用髓过氧化酶 (MPO)分析法及组织学检查定量ALI过程中PMN于肺内的扣押量。结果 (1)PMNL选择素的表达于静脉注射内毒素后 5min为7 8± 1 6 ,与对照组 (10 5± 2 1)比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,静脉注射内毒素后 15min(2 9± 0 5 )、30min(3 5± 0 7)和 6 0min(4 9± 0 7)与对照组比较差异更具显著性 (P <0 0 1)。 (2 )大鼠肺组织MPO活力于静脉注射内毒素后 5min [(0 35 9± 0 0 74)U/mg肺组织 ]、15min [(0 490± 0 0 6 9)U/mg肺组织 ]、30min [(0 5 6 5± 0 111)U/mg肺组织 ]、6 0min [(0 710± 0 112 )U/mg肺组织 ]与对照组 [(0 0 6 9± 0 0 11)

L选择素的研究进展及其与临床疾病

L选择素属于选择素家族,选择素家族是细胞黏附分子家族成员之一。L选择素的结构为单体糖蛋白,表达于多种白细胞表面,通过与其配体的结合发挥广泛的生物学功能,介导淋巴细胞向周围淋巴结的归巢,介导白细胞的滚动与黏附。可溶性L选择素是L选择素在白细胞表面脱落的部分,起负反馈免疫调节作用,它们与临床疾病关系密切。该文就L选择素的结构、功能及与临床疾病的关系等进行综述。