急性白血病膜结合L-选择蛋白与可溶性L-选择蛋白表达及临床意义的研究

为了探讨急性白血病患者血浆可溶性L 选择蛋白 (sL selectin)水平和细胞膜结合L 选择蛋白 (L selectin)及其基因表达与急性白血病发病及病情变化的关系及对指导治疗、判断预后的临床意义 ,用酶联免疫吸附双抗体夹心法 (ELISA)、RT PCR及免疫组化法 ,测定 4 0例急性白血病患者的血浆sL selectin水平 ,L selectin基因 (lyam 1)及细胞膜结合L selectin分子的表达。结果显示 :初治及难治性急性白血病患者血浆sL selectin水平较缓解者及对照者均显著增高 (P <0 .0 1) ,而其mRNA及膜结合L selectin表达和L selectin阳性细胞百分率低于完全缓解组(P <0 .0 5 ) ;伴有肝、脾肿大的急性白血病患者较无此体征者血浆sL selectin水平明显增高 (P <0 .0 1) ;且sL se lectin水平与临床过程有关 ;急性白血病患者L selectinmRNA与膜结合L selectin之间显示显著相关性 (γ =0 782 ,P <0 .0 5 )。结论 :急性白血病患者L selectin基因的表达在mRNA水平及蛋白质水平均较对照减少 ,两者有显著相关性 ;监测患者血浆sL

L-选择蛋白可能介导小鼠肝癌HCa-F细胞经淋巴道转移的研究

目的 观察L 选择蛋白是否介导小鼠肝癌HCa F细胞与淋巴结黏附 ,探讨HCa F细胞特异性向周围淋巴结转移的分子机制。 方法 应用免疫细胞化学方法验证小鼠肝癌HCa F细胞为非淋巴细胞来源 ;用免疫印迹分析、RT PCR及流式细胞术检测L 选择蛋白在HCa F细胞的表达 ;并用L 选择蛋白的抗体抑制HCa F细胞与冰冻淋巴结切片间的黏附实验 (Stamper Woodruffmethod)检测L 选择蛋白的功能。 结果 HCa F细胞为非淋巴细胞来源的肝癌细胞 ,在其表面有L 选择蛋白的表达 ,且HCa F细胞与淋巴结之间的黏附可被L 选择蛋白的抗体抑制。结论 非淋巴细胞来源的HCa F细胞表面表达功能性L 选择蛋白分子 ,并可协助其与淋巴结黏附 ,从而可能介导HCa F细胞向淋巴道转移。

机采血小板保存期内血小板聚集功能和可溶性P-选择蛋白的变化

本研究探讨保存期内的机采血小板的聚集功能和可溶性P-选择蛋白含量的改变。收集20份机采血小板样品,分别在保存期第1天(0-24小时)、第2天(24-48小时)、第3天(48-72小时)、第4天(72-96小时)和第5天(96-120小时)检测血小板的聚集功能和可溶性P-选择蛋白含量。结果表明:以ADP作为诱导剂,保存期内机采血小板的血小板聚集功能降低明显,与第1天组比,组间差异均有统计学意义(p均<0.01),第4天组的血小板最大聚集率≤3%;血浆可溶性P-选择素含量则随着保存时间的延长逐渐升高,与第1天组比,组间差异均有统计学意义(p均<0.05)。结论:机采血小板在保存期内存在持续活化,且聚集功能下降明显,从第4天开始几乎已完全丧失对ADP的致聚反应,提示机采血小板的体外保存损伤应该引起高度重视。

血小板保存期间血小板计数和P-选择蛋白的变化

探讨CS 30 0 0plus血细胞分离机全密闭 5天保存袋保存的血小板数量和质量的变化 ,研究在 (2 2± 2 )℃条件下振荡和静置两种方法保存的血小板有无差异。采用SysmexF 82 0型全自动血细胞分析仪对机采血小板产品计数 ,应用酶联免疫吸附法 (ELISA)定量检测机采血小板上清液中P 选择蛋白的含量。结果显示 ,振荡与静置两种方法保存的血小板产品中血小板计数和P 选择蛋白含量均无显著性差异。随保存时间延长 ,振荡和静置保存的血小板计数逐渐减少和P 选择蛋白逐渐增多 ,其中两组内的血小板计数在保存 0 - 72小时以内均无显著性差异 ;而在保存 96 - 1 2 0小时后与保存前比较都有显著性差异。振荡保存组 0 - 72小时内 ,每相邻 1天之间P 选择蛋白量无显著性差异 ,其余各时间段均有显著性差异 ;静置保存组 0 - 72小时内各时间段均无显著性差异。结论 :①使用CS 30 0 0plus血细胞分离机全密闭 5天保存袋 ,对血小板制品的有效保存期以 3天为宜 ;②在 (2 2± 2 )℃条件下 ,振荡保存的血小板在数量和质量上并不优于静置保存的血小板。

L-选择蛋白在小鼠肝癌细胞高低转移株HCa-F、HCa-P的表达及与肿瘤转移潜能的相关性

目的 探讨经淋巴道转移的小鼠肝癌细胞高低转移株HCa F、HCa P淋巴道转移能力及与淋巴细胞归巢受体L 选择蛋白的相关性。方法 应用免疫印迹分析、RT PCR及流式细胞术检测小鼠肝癌HCa F、HCa P细胞表面L 选择蛋白的表达情况 ,再通过E 、P 、L 选择蛋白的抗体对细胞粘附实验的影响检测HCa F、HCa P细胞淋巴道转移潜能与L 选择蛋白的相关性。结果 L 选择蛋白在HCa F、HCa P细胞表面均有表达 ,且HCa F细胞的表达量明显高于HCa P细胞 (P <0 .0 1) ,HCa F细胞与淋巴结之间的粘附可被抗L 选择蛋白的抗体所阻断。结论 小鼠肝癌细胞高低转移株HCa F、HCa P细胞均表达L 选择蛋白 。

选择蛋白及其配体在肿瘤转移中的作用

选择蛋白 (selectin)在生理状态下参与白细胞运行过程的调节 ,在炎症反应过程中与白细胞的渗出密切相关。近期研究发现 ,在肿瘤的转移过程中 ,选择蛋白及其配体也可发挥重要的作用 ,甚至是导致肿瘤发生转移的信号分子之一 。

早期应用替罗非班对PCI患者血浆MMP-9、P选择蛋白和心血管事件的影响

目的探讨早期应用替罗非班对经皮冠状动脉介入治疗(PCI)患者血浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、P选择蛋白和心血管事件的影响。方法选择行PCI的冠心病患者98例,随机分为观察组和对照组各49例。对照组术前给予肝素100 U/kg,冠状动脉造影开始时给予替罗非班10μg/kg负荷剂量,继续维持0.15μg/(kg·min)泵入48 h;观察组确诊后立即给予替罗非班,给药方式和剂量同对照组。术后两组均给予低分子肝素钙4 100 U/次,2次/d。术后3 d测定血浆MMP-9和P选择蛋白,统计术后28 d内的主要不良心血管事件。结果术后3 d两组血浆MMP-9和P选择蛋白均明显降低(P<0.05或<0.01),观察组低于对照组(P均<0.05)。术后28 d内观察组发生主要不良心血管事件2例(4.1%),对照组为6例(12.2%),观察组少于对照组(P<0.05)。结论早期应用替罗非班可减轻炎症反应,抑制血栓形成,减少心血管事件的发生。

不同剂量的氯吡格雷对介入术后P选择蛋白的影响

P选择蛋白是一种在激活细胞表面表达的黏着分子,它能介导激活的上皮细胞或血小板与白细胞之间的反应。P选择蛋白在动脉粥样硬化斑处表达增加,在不稳定型心绞痛病人中也发现这种蛋白分子具有高血浆水平。P蛋白与组织发生血栓性炎症有明显的相关性。因此我们推测大剂量的氯吡格雷也能有效减少血浆P蛋白的水平。

P-选择蛋白用于诊断肾移植术后排异的可行性探讨

目的:寻找一个比环孢素A(CsA)更加灵敏的、经济的、用于诊断肾移植(RT)术后排异反应的特异性指标。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆P-选择蛋白水平,采用单克隆抗体荧光偏振免疫分析法(FPIA)测定CsA谷浓度,分析了P-选择蛋白的变化与CsA谷浓度、疗效三者之间的相关性,并对二者诊断RT术后的准确性进行了比较,探讨了P-选择蛋白用于诊断RT术后排异的可行性。结果:当移植肾有发生排异的趋势时,血浆P-选择蛋白会有显著增高,且其用于诊断RT术后排异的准确率明显大于CsA(P<0.05)。结论:P-选择蛋白可以作为一个更加灵敏的、用于诊断排异反应的特异性指标。

抗P-选择蛋白人源性单克隆抗体的制备

目的:获得人源性抗P-选择蛋白(selectin)特异性抗体,为相关疾病治疗奠定基础。方法:在HEK293细胞中真核分泌表达人P-选择蛋白功能性片段,以此蛋白片段作为抗原,利用本室构建的大容量全合成人源性噬菌体抗体库进行筛选,经过3轮固相筛选后,阳性克隆得到富集;将其中富集效果最好的一株单链抗体A1改造成全抗体(IgG1),重组质粒转染H293细胞后,抗体得到表达;表达后在全抗体水平上用ELISA和Western印迹分别验证了A1抗体的特异性,并通过非竞争ELISA方法初步测定这株抗体的亲和力。结果:3轮筛选得到3株特异性噬菌体抗体,其中富集效果最好的单链抗体A1改造成全抗体形式后特异性良好,抗体亲和力Kd=2×10-8 mol/L。结论:筛选得到一株特异性较好的抗P-选择蛋白人源性单克隆抗体A1,其特异性和亲和力较好,有继续开发的价值。

炎症性肠病中循环L-选择蛋白水平与内皮细胞CD_(34)表达

Crohn氏病（CD）和溃疡性结肠炎（UC）是病因不明的慢性、节段性肠道病变,统称为炎症性肠病（IBD）.遗传、肠内上皮功能异常、感染及炎症反应调节的改变等各种因素在其发病过程中都起着重要作用.在溃疡性结肠炎中,循环可溶性L-选择蛋白（sL-选择蛋白）浓度与疾病活动呈正相关,而CD则不然.L-选择蛋白的这种差异可能是因L-选择蛋白配体CD34的疾病特异性调节所致.本文介绍不同疾病活动程度UC或CD患者受累肠组织CD34表达与血清sL-选择蛋白水平的关系.

选择性免疫球蛋白A缺乏症合并自身免疫性胃炎及脊髓亚急性联合变性1例报告

1病例资料患者男,62岁,主诉“四肢麻木3个月”于2022年4月28日收住南京中医药大学附属医院脑病中心。患者3个月前无明显诱因出现双下肢麻木、乏力,步态不稳,脚踩棉花感,伴双上肢麻木,间断性头晕,腰部束带感,症状逐渐加重;并有胃胀不适,大便干结难解,排尿不净感,近期体重无明显变化。既往有颈椎病病史、长期饮酒史(每天约饮白酒250 g,已戒酒半年),无药物、食物过敏史,否认家族遗传史。

维持性血液透析患者血清结缔组织生长因子、P-选择素糖蛋白配体-1的表达水平及临床意义

目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),P-选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand 1,PSGL-1)在维持性血液透析患者中的表达及与残余肾功能(residual renal function,RRF)、炎症反应的相关性。方法选取2019年5月至2021年10月陕西省宝鸡市人民医院收治的102例维持性血液透析患者为研究组,根据透析前24h尿量将患者分两组:24h尿量≥200ml为有RRF组68例,24h尿量<200ml为无RRF组34例,选择年龄、性别相匹配的50例健康体检者为对照组。收集一般资料,采用酶联免疫吸附法检测血清中CTGF、PSGL-1表达水平,Pearson法分析CTGF、PSGL-1与炎症反应指标的相关性,采用logistic回归分析影响RRF的因素。结果与对照组相比,无RRF组和有RRF组患者血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、高敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,Hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)水平均上升,血红蛋白和白蛋白表达水平均下降,差异有显著性(P<0.05);与有RRF组相比,无RRF组患者血清BUN、SCr、Hs-CRP、TNF-α、IL-6水平均上升,血红蛋白和白蛋白水平均下降,差异有显著性(P<0.05);研究组患者血清中CTGF、PSGL-1表达水平均高于对照组,且无RRF组患者血清中CTGF、PSGL-1水平均高于有RRF组患者,差异有显著性(P<0.05);维持性血液透析患者血清中CTGF与PSGL-1表达呈正相关(r=0.472,P<0.05);维持性血液透析患者血清CTGF、PSGL-1水平与Hs-CRP、TNF-α、IL-6、BUN、Scr水平呈正相关(P<0.05),与血红蛋白、白蛋白水平呈负相关(P<0.05);Logistic回归结果显示BUN、SCr、Hs-CRP、TNF-α、IL-6、CTGF、PSGL-1、血红蛋白、白蛋白均是RRF的独立影响的因素(P<0.05)。结论CTGF、PSGL-1在维持性血液透析患者血清中高表达,与患者RRF及炎症反应密切相关。

选择素蛋白糖基修饰及其与慢性炎症疾病研究进展

选择素蛋白是普遍存在于真核生物中的一类非免疫来源的糖蛋白,具有凝集细胞、特异性糖基识别与结合等化学特性,主要参与白细胞与血管内皮细胞之间的识别与粘着,在促进有丝分裂、细胞连接与粘附、肿瘤、免疫调节和病毒感染等方面发挥重要作用。近年来,选择凝蛋白质修饰在高血压,动脉粥样硬化,心肌梗死,凝血障碍和糖尿病等中的研究取得许多新进展,现综述如下。

P选择素、P选择素糖蛋白配体-1及C反应蛋白与青年性脑梗死不同TOAST亚型的关系

目的探讨P选择素、P选择素糖蛋白配-1体(PSGL-1)及C反应蛋白(CRP)与青年性脑梗死不同TOAST亚型的关系。方法收集132例青年性脑梗死患者(青年组)临床资料,分析其危险因素;依据TOAST分型标准进行分型。检测患者P选择素、PSGL-1及CRP水平,并与老年组(n=100)及正常对照组(n=100)进行比较。采用线性回归分析探讨P选择素、PSGL-1及CRP水平与不同TOAST亚型的临床神经功能缺损评分的关系。结果青年组吸烟、梅毒感染及风湿性心脏病比例较老年组明显为高。P选择素、PSGL-1及CRP水平较正常对照组明显升高(P<0.05)。LAA型患者P选择素水平较老年组升高更为明显。3种炎性因子均与LAA型患者NIHSS评分相关;其中PSGL-1回归系数最高。CRP在CE型中升高更为明显,与该亚型NIHSS评分呈正相关。结论青年性脑梗死具有自身特征性的危险因素。P选择素、PSGL-1及CRP水平与不同TOAST亚型青年性脑梗死关系密切,可分别作为不同亚型预后的依据。

P-选择素糖蛋白配体1与老年糖尿病缺血性脑卒中的关系

目的检测白细胞黏附分子PSGL-1在老年糖尿病缺血性脑卒中的变化,评价该黏附分子能否成为老年糖尿病缺血性脑卒中临床相关性指标。方法选择25例糖尿病缺血性脑卒中患者作为研究对象,在1年内没有脑卒中临床证据的年龄、性别配对的单纯糖尿病患者25例和健康体检者20例作为对照组。以流式细胞术检测外周血单个核细胞PGSL-1表达情况,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清样本中PGSL-1水平。结果 PGSL-1水平变化与健康对照组(33.2±3.9)比较,糖尿病缺血性脑卒中患者(44.7±5.8,P<0.01)和单纯糖尿病患者(41.2±4.4,P<0.05)外周血单个核细胞表面PGSL-1表达的荧光强度较健康体检人群明显增加。结论老年糖尿病缺血性脑卒中患者PSGL-1显著增高,PSGL-1高度表达可能是糖尿病缺血性脑卒中的高危因素。

P-选择素基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1基因M62I多态性与缺血性脑梗死临床关联性研究

目的探讨P-选择素(SELP)基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1(PSGL-1)基因M62I多态性与缺血性脑梗死的关系。方法选取148例缺血性脑梗死患者作为脑梗死组,并分为大动脉粥样硬化性(LAA)亚组、心源性脑栓塞(CE)亚组和小动脉闭塞性(SAO)亚组;88例正常人群作为正常对照组。运用基因测序方法检测所有受试者SELP基因S290N和PSGL-1基因M62I的基因多态性。结果与正常对照组比较,脑梗死组及其亚组S290N基因型和等位基因频率差异无统计学意义(均P>0.05);脑梗死组M62I基因型和等位基因频率差异有统计学意义(均P<0.01);LAA亚组M62I基因型差异无统计学意义(χ~2=5.889,P=0.053),但等位基因频率差异有统计学意义(χ~2=6.156,P=0.021);CE亚组基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(χ~2=1.693,P=0.429;χ~2=1.372,P=0.238);SAO亚组基因型和等位基因频率差异均有统计学意义(χ~2=12.572,P=0.002;χ~2=8.736,P=0.004)。S290N与缺血性脑梗死风险无相关性(均P>0.05)。M62I显性模型和超显性模型与缺血性脑梗死风险有相关性(OR=2.662,95%CI:1.531~4.630,P=0.000;OR=0.392,95%CI:0.219~0.701,P=0.001),而隐性模型和加性模型与缺血性脑梗死风险无相关性(OR=1.428,95%CI:0.528~3.862,P=0.630;OR=2.121,95%CI:0.766~5.872,P=0.156)。结论 PSGL-1基因M62I多态性与缺血性脑梗死之间具有相关性。