透明带3多肽诱导的免疫性卵巢早衰小鼠模型子宫组织中Ki-67、ER的表达

目的：以透明带3多肽（pZP3）诱导的免疫性卵巢早衰（POF）小鼠为研究对象，观察其子宫Ki-67、雌激素受体（ER）的表达，以进一步探讨免疫性卵巢早衰患者辅助生殖相关的子宫预处理方案。方法取7~8周龄的健康雌性BALB/c小鼠40只，随机分为对照组和模型组。通过阴道脱落细胞涂片、血清性激素、卵巢组织形态及抗卵巢ZP3抗体鉴定建模成功。检测两组小鼠子宫组织形态变化及子宫Ki-67、雌激素受体α亚型（ERα）及雌激素受体β亚型（ERβ）的表达。结果8周后80%小鼠建模成功。与对照组相比，模型组子宫萎缩，内膜变薄，单位面积内腺体数量减少。模型组子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞及间质细胞中Ki-67的表达较对照组减弱，且有胞核转位至胞浆现象。对照组小鼠子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞及间质细胞的胞浆强表达ERα，而模型组呈阴性表达。两组小鼠子宫内膜ERβ均呈阴性表达。结论 pZP3可以诱导小鼠成功构建免疫性卵巢早衰疾病模型，同时引起子宫内膜上皮细胞及间质细胞的增殖降低和ERα表达减弱。

基于雌激素受体途径探讨补肾活血汤干预免疫性卵巢早衰小鼠模型机制研究

目的:以透明带3多肽(pZP3)诱导的免疫性卵巢早衰(POF)小鼠为研究对象,观察其血清性激素水平及卵巢组织中雌激素受体(ER)表达情况,探讨免疫性卵巢早衰可能的发生机制及补肾活血汤的潜在治疗途径。方法:将40只雌性B6AF1小鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组及补肾活血汤组。除空白组外,各组小鼠第1天、第14天两次予pZP3联合弗氏佐剂皮下注射造模,空白组同期予0.9%氯化钠溶液皮下注射;建模成功后空白组、模型组、补佳乐组及补肾活血汤组分别予以等体积0.9%氯化钠溶液、戊酸雌二醇及补肾活血汤灌胃,每天2次。灌胃28 d后处死小鼠,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))、抗缪勒氏管激素(AMH)水平;采用HE染色和免疫组化方法检测卵巢组织病理变化及雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)的表达情况。结果:①与空白组相比,模型组小鼠呈现出典型的低雌激素高促性腺激素表型(P<0.01);经补佳乐及补肾活血汤灌胃治疗后,小鼠血清E_(2)、AMH水平上升,FSH水平下降(P<0.05或P<0.01),补佳乐组雌激素上升水平更加显著(P<0.05)。②模型组中,小鼠卵巢中卵泡数目减少,闭锁卵泡增多,ER表达与E_(2)水平下降呈现平行趋势(P<0.01);予补佳乐及补肾活血汤灌胃后,小鼠卵巢中各级卵泡恢复发育,雌激素受体表达明显上调(P<0.01),补肾活血汤组小鼠卵巢中ERα的表达上调较补佳乐组更加显著(P<0.05)。结论:pZP3造模可有效构建POF模型,补肾活血汤的治疗机制可能是通过提高卵巢雌激素受体表达,从而增强雌激素的生物学效应的发挥,介导疾病恢复过程。

免疫性卵巢早衰模型鼠制备的时间

背景:研究已经证实抗透明带抗体可以加速卵母细胞的破坏和耗竭而致卵巢早衰。目的:探讨以透明带3多肽(pZP3)诱导BALB/c小鼠建立免疫性的卵巢早衰模型的时间。方法:6-8周龄的健康雌性BALB/c小鼠30只,随机分为免疫实验组(20只)和空白对照组(10只)。实验组小鼠首次免疫注射时间为0周,给予0.15 mL免疫试剂注射双足底及下腹部皮下,每日晨阴道脱落细胞涂片观察小鼠动情周期的变化;2周后给予0.15mL免疫强化试剂皮下注射相同部位,第4周和第6周的第1天,分别注射免疫试剂或免疫强化试剂各1次(交替注射)。在每次注射前采血用酶联免疫法测小鼠血清性激素;最后观察小鼠卵巢组织及子宫形态。结果与结论:①实验组小鼠初次免疫注射及注射后2周,2组间血清促卵泡生长激素及雌激素水平差异无显著性意义;注射后4周实验组血清雌激素水平明显低于对照组,但促卵泡生长激素水平差异无显著性意义;注射后6周实验组血清雌激素水平明显低于对照组(P<0.05),促卵泡生长激素水平明显高于对照组(P<0.01);②实验组小鼠卵巢间质纤维化程度较对照组明显,卵巢体积减小,子宫萎缩,小鼠原始卵泡、初级及次级卵泡数均显著低于对照组,闭锁卵泡数量高于对照组(P<0.05);③结论:75μg透明带3多肽诱导BALB/c小鼠,建立自身免疫性卵巢早衰疾病模型,免疫后6周即可达到良好的建模效果。

不同浓度弗氏佐剂对B6AF1小鼠免疫性卵巢早衰模型建立的影响

目的观察不同浓度弗氏佐剂对透明带3多肽(pZP3)诱导的B6AF1小鼠免疫性卵巢早衰(POF)模型的影响。方法取6~8周龄雌性B6AF1小鼠80只,随机分为空白组、不完全弗氏佐剂组、完全弗氏佐剂组[含结核分枝杆菌(TB)1 mg/mL)和不完全弗氏佐剂+TB(3.3 mg/mL)组,应用HE染色法比较不同注射量的弗氏佐剂对POF模型小鼠免疫效果的影响。结果免疫后模型组小鼠卵巢体积萎缩,闭锁卵泡增多,卵泡周围见间质淋巴细胞浸润。不完全弗氏佐剂+TB(3.3 mg/mL)组免疫效果最好,完全弗氏佐剂组次之。结论不同浓度弗氏佐剂联合pZP3均可诱导B6AF1小鼠成功构建POF疾病模型,引起免疫性卵巢炎;含高浓度TB造模效果较好。