抑制miRNA-376c-3p对肾透明细胞癌生长的影响

目的探究miRNA-376c-3对肾透明细胞癌(ccRCC)中肿瘤细胞生长的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测人ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN及正常人近段肾小管上皮细胞系HKC中miRNA-376c-3p的表达。体外培养786-O细胞,随机分为对照组、miR-376c-3p inhibitor组(转染miR-376c-3p inhibitor)、miR-376c-3p mimics组(转染miR-376c-3p mimics)、阴性对照组(转染miR-376c-3p阴性对照),分组转染后以RT-PCR检测4组细胞miRNA-376c-3p表达;以Ki67免疫荧光染色、集落生成实验检测4组786-O细胞增殖;以TUNEL染色检测4组786-O细胞凋亡;以免疫荧光染色检测4组786-O细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达并比较其Bax/Bcl-2。于右腋窝皮下接种上述4组786-O细胞建立其裸鼠移植瘤模型,3周后测定其肿瘤体积与质量;以Ki67免疫荧光染色、TUNEL染色分别检测4组裸鼠肿瘤细胞增殖与凋亡。结果与HKC细胞比较,ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN中miR-376c-3p表达降低(P<0.05)。与对照组比较,miR-376c-3p inhibitor组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比升高(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比降低(P<0.05);miR-376c-3p mimics组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比降低(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比升高(P<0.05);阴性对照组各指标无明显变化(P>0.05)。结论抑制miRNA-376c-3p可削弱ccRCC细胞增殖及集落生成活性,促进其凋亡,并在裸鼠体内抑制其移植瘤生长。

CT扫描在肾透明细胞癌假包膜完整性评估中的应用

目的 分析CT扫描成像在肾透明细胞癌假包膜评估中的应用价值。方法 经病理检查确诊、肿瘤直径≤7 cm的肾透明细胞癌患者136例,采用腹部CT扫描和组织病理检查评价假包膜完整性。采用Kappa一致性检验评价病理检查与CT扫描评估假包膜的一致性。结果 136例CT扫描结果显示,假包膜完整96例,假包膜不完整36例,无明显假包膜4例。病理检查结果显示,假包膜完整97例,假包膜不完整32例,无明显假包膜7例。经Kappa检验,CT扫描与病理检查结果一致性高(Kappa=0.745)。结论 大多数肾透明细胞癌有明显的假包膜;CT扫描能够评估肿瘤边缘和假包膜的完整性,CT扫描与病理检查结果一致性良好。

术前老年营养风险指数联合内生肌酐清除率对老年肾透明细胞癌患者的预后价值

目的探讨术前老年营养风险指数(GNRI)联合内生肌酐清除率(Ccr)对老年肾透明细胞癌患者的预后价值。方法选取2016年1月至2017年12月广西医科大学第一附属医院泌尿外科收治住院的老年肾透明细胞癌患者148例,根据随访状况将患者分为存活组122例和死亡组26例。采用采用单因素和多因素Cox回归分析老年肾透明细胞癌患者预后的影响因素。采用Kaplan-Meier分析GNRI和Ccr与老年肾透明细胞癌患者总生存时间的相关性。绘制受试者工作特征曲线分析预测效能。结果两组患者一般资料中,性别、M分期、T分期、肿瘤坏死、白蛋白、GNRI差异有统计学意义(P<0.05);两组患者血清指标中,碱性磷酸酶、前白蛋白、Ccr差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,GNRI升高(HR:0.803,95%CI:0.686~0.939)与Ccr升高(HR:0.971,95%CI:0.943~0.999)是老年肾透明细胞癌患者预后的保护因素(P<0.05),肿瘤M分期为M 1期(HR:5.132,95%CI:1.021~25.787)、T分期为T 3、T 4期(HR:5.179,95%CI:1.249~21.473)是老年肾透明细胞癌患者预后的危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,高GNRI组5年生存率高于低GNRI组(χ^(2)=15.446,P<0.001),高Ccr组5年生存率高于低Ccr组(χ^(2)=11.959,P=0.001)。受试者工作特征曲线曲线显示,GNRI联合Ccr对患者术后1年及3年预后不良预测效果好(曲线下面积分别为0.909、0.755)。结论术前GNRI和Ccr的降低与老年肾透明细胞癌患者预后不良密切相关,GNRI联合Ccr预测老年肾透明细胞癌患者疗效更佳。

MSCT对乏脂肾血管平滑肌脂肪瘤与非透明细胞肾癌的鉴别诊断

目的分析乏脂肾血管平滑肌脂肪瘤(乏脂AML)与非透明细胞肾癌(肾乳头状细胞癌、嫌色细胞癌)的CT特征,提高病变的鉴别诊断效能。方法回顾性分析经手术病理证实乏脂AML19例、肾乳头状细胞癌(PRCC)16例及肾嫌色细胞癌(ChRCC)22例。测量肿瘤四期(平扫期、皮髓质期、实质期及排泄期)相同ROI的CT值及健侧肾皮质CT值,计算肿瘤强化百分比、多期相净增值、相对强化比并进行统计学分析。结果乏脂AML在平扫期及皮髓质期CT值高于PRCC与ChRCC的CT值,差异均有统计学意义(均P<0.05),在实质期及排泄期,乏脂AML与两者比较差异无统计学意义(均P>0.05)。乏脂AML在皮髓质期、实质期和排泄期的强化百分比高于PRCC、ChRCC,差异均有统计学意义(均P<0.05)。乏脂AML与PRCC、ChRCC在皮髓质期及实质期多期相净增值、相对强化比的差异均有统计学意义(均P<0.05),在排泄期差异无统计学意义(P>0.05)。结论乏脂AML与非透明细胞癌平扫及增强扫描有其特征性CT表现,强化百分比、多期相净增值、相对强化比可进一步提高AML与非透明细胞肾癌的诊断及鉴别诊断能力。

血浆纤维蛋白原、全身炎症反应指数对非转移性肾透明细胞癌患者的预后判断价值

目的 探讨血浆纤维蛋白原(fibrinogen, FIB)、全身炎症反应指数(Systemic inflammatory response index, SIRI)对非转移性肾透明细胞癌(Non-metastatic renal cell carcinoma, nmRCC)患者的预后判断价值。方法 选择2018年1月-2022年12月苏州大学附属第二医院收治的146例nmRCC患者为研究对象,采用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)曲线确定FIB、SIRI诊断高Fuhrman分级(Ⅲ~Ⅳ级)的最佳截断值,并根据最佳截断值将患者分为高、低FIB组和高、低SIRI组。比较不同FIB、SIRI水平患者临床病理参数与生存预后的差异。用多因素Cox风险模型分析影响患者总体生存时间(Overall survival, OS)、肿瘤特异生存时间(Cancer specific survival, CSS)、无复发生存时间(Disease free survival, DFS)的独立危险因素。ROC曲线分析FIB、SIRI单独及联合检测对患者预后不良的预测效能。结果 患者FIB、SIRI水平越高,肿瘤直径越大,TNM分期及Fuhrman分级越高(P<0.05)。与低FIB组相比,高FIB组患者的总体生存率显著较低(χ^(2)=8.385,P=0.003);与低SIRI组相比,高SIRI组患者的总体生存率显著较低(χ^(2)=10.029,P<0.001)。Cox多因素分析显示,FIB水平、SIRI水平、肿瘤直径、Fuhrman分级、TNM分期均是影响患者OS、CSS、DFS的独立性危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,FIB、SIRI预测肾透明细胞癌患者预后不良的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别为0.735、0.799,敏感性分别为62.6%、67.4%,特异性分别为659%、72.3%,二者联合检测的AUC为0.852,敏感性为71.2%,特异性为76.6%。结论 高FIB与高SIRI是nmRCC患者不良生存预后的危险因素,二者联合检测对患者预后不良的预测效能更高。

控制营养状态评分和相关炎性指标在肾透明细胞癌预后预测中的价值:一项多中心回顾性研究

目的探讨控制营养状态(CONUT)评分和相关炎性指标在肾透明细胞癌(ccRCC)患者预后预测中的价值,为临床更好地评估病情及制定个体化治疗方案提供参考。方法回顾性分析2010—2018年宜宾市4所综合性医院收治的132例ccRCC患者的病历资料和生存情况,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析CONUT评分及炎性指标中性粒细胞和淋巴细胞比值(NLR)、血小板和淋巴细胞比值(PLR)以及淋巴细胞和单核细胞比值(LMR)预测患者预后的曲线下面积和最佳截断值,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Log-rank检验和Cox回归分析影响预后的因素。结果患者中位随访时间62(53,71)个月,随访期内死亡37例(28.03%),疾病特异性生存期(DSS)和无进展生存时间(PFS)分别为51(41,58)个月和46(35,56)个月,患者3、5年DSS分别为84.09%和71.97%,3、5年PFS分别为75.00%和71.97%。CONUT评分、NLR、PLR以及LMR预测患者预后的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.980、0.905、0.899和0.884,最佳截断值分别为3.50分、3.19、89.07和3.56。多因素Cox回归分析显示:CONUT评分和PLR与患者DSS有关,其HR(95%CI)分别为0.042(0.013~0.140)和0.182(0.045~0.744);CONUT评分和LMR与患者PFS有关,其HR(95%CI)分别为0.029(0.010~0.086)和2.984(1.227~7.258)。结论ccRCC患者预后与机体营养、免疫和炎症状况有关,CONUT评分和炎症相关指标(PLR、LMR)可能是患者DSS和PFS的重要预测因子。

RNA干扰受体相互作用蛋白激酶1基因表达对肾透明细胞癌生物活性的影响

目的探讨受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)对肾透明细胞癌(ccRCC)生物功能的影响及机制。方法通过RNA干扰技术降低RIPK1在ccRCC中的表达后,光镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞增殖变化情况,Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力的变化,流式细胞仪检测细胞发生凋亡、坏死水平,Western blot法检测cleaved caspase-3、混合谱系蛋白激酶样结构域(MLKL)和RIPK3表达变化。结果小干扰RNA(siRNA)干扰48 h后,RIPK1-siRNA组细胞增殖吸光度值(0.563±0.042)低于NC-siRNA组(0.944±0.039;t=11.550,P=0.003);siRNA干扰72 h后,RIPK1-siRNA组吸光度值(0.408±0.019)低于NC-siRNA组(1.717±0.108;t=20.620,P<0.001)。与NC-siRNA组(72.000±12.120)比较,RIPK1-siRNA组(31.660±10.020)ccRCC细胞的迁移数量明显减少(t=4.442,P=0.011)。与NC-siRNA组(0.360±0.090、0.510±0.060、0.880±0.070)比较,RIPK1-siRNA组ccRCC细胞内cleaved caspase3、MLKL、RIPK3表达明显增加(0.780±0.070、1.490±0.100、1.680±0.130;t=6.380,P=0.003;t=8.656,P=0.001;t=14.150,P=0.001)。结论RIPK1是ccRCC内调控细胞增殖、死亡及迁移能力的重要基因,抑制RIPK1能够促进ccRCC发生凋亡及坏死性凋亡。

基于自噬和铁死亡基因的肾透明细胞癌预后模型的建立和验证

目的:建立基于自噬和铁死亡相关基因的预后模型,并基于肾透明细胞癌(ccrCC)的自噬基因(autophagy related genes,ARGs)和铁死亡基因(ferroptosis related genes,FRGs)模型评估预后。方法:通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库中的ccRCC数据集识别与风险相关的ARGs和FRGs,进行功能富集和肿瘤分型分析,通过单变量和多变量Cox回归建立537例患者的预后风险模型。多指标ROC用于评估模型的准确性。最后使用GSE29609数据集验证。结果:共发现37个差异表达的基因。单变量和多变量Cox回归确定了8个与OS相关的风险相关基因:CASP4、PRKCQ、BNIP3、BAG1、BIRC5、CHAC1、ATG16L2、EIF4EBP1。Kaplan-Meier生存分析显示,高危组患者生存率较低,多指标ROC曲线下面积>0.75,说明模型预测准确率较高。然后基于CIBERSORT算法进行免疫细胞浸润评估。结论:基于8个ARGs和FRGs的肾透明细胞癌相关基因预后模型具有一定的准确性,可更准确地指导临床治疗。

胰腺转移性肾透明细胞癌一例

1 病例介绍。患者,女,56岁,因“体检发现胰腺占位8 d”于2022年7月21日入院。患者8 d前于当地医院体检查B超发现胰头部低回声团,考虑实质性占位。患者无腹痛腹胀,无发热、寒战,无腹泻,无恶心、呕吐等不适,当时未予特殊诊治。患者2006年因“肾透明细胞癌”于广西壮族自治区人民医院行右肾切除术,术后恢复良好,定期复查。无胰腺炎病史。近期体重无下降。专科查体:全身皮肤及巩膜无黄染,无出血点,未见肝掌,未见蜘蛛痣,可见腹部陈旧手术瘢痕,上腹部轻压痛,大小便正常。

肾透明细胞癌VSIG4表达及其与免疫细胞浸润的相关性研究

目的:探究VSIG4在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与免疫细胞浸润和预后的关系。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载ccRCC的RNA-seq数据和患者相应的临床数据;通过Wilcoxon秩和检验分析ccRCC及正常肾组织中VSIG4 mRNA表达水平;Wilcoxon秩和或Kruskal-Wallis秩和检验分析VSIG4表达与临床病理参数的相关性;Kaplan-Meier法分析VSIG4表达与患者预后的相关性;基因集富集分析(GSEA)探究VSIG4在ccRCC中参与的信号通路;使用R软件运行CIBERSORT算法分析VSIG4表达与肿瘤浸润免疫细胞的相关性;Western blotting检测人正常肾上皮细胞系293T和人肾癌细胞系ACHN、A-498、786-O、OS-RC-2中VSIG4蛋白表达。结果:VSIG4在ccRCC中的表达水平显著高于正常组织(P<0.05);VSIG4的表达与患者远处转移分期和淋巴结转移分期显著相关(P<0.05);生存分析显示,VSIG4高表达组患者总体生存率显著低于低表达组患者(P<0.05);GSEA富集分析结果显示,VSIG4主要在凋亡、趋化因子信号通路、细胞黏附分子等信号通路富集;VSIG4表达与M1巨噬细胞呈负相关(r<0,P<0.05),而与M2巨噬细胞呈正相关(r>0,P<0.05);免疫印迹结果表明,肾癌细胞中VSIG4蛋白表达均高于人正常肾上皮细胞系。结论:VSIG4在ccRCC中高表达,且与预后呈负相关,可能成为ccRCC患者预后的生物标志物。

基于MRI-DWI不同指数模型构建的列线图模型对肾透明细胞癌与肾错构瘤的鉴别诊断价值

目的:基于磁共振-弥散加权成像(MRI-DWI)不同指数构建列线图模型,探讨其对肾透明细胞癌(ccRCC)与肾错构瘤的鉴别诊断价值。方法:回顾性选择医院经病理确诊的85例ccRCC或肾错构瘤患者作为建模组,其中肾错构瘤54例,ccRCC 31例;选择经病理确诊的105例ccRCC或肾错构瘤患者作为验证组,其中肾错构瘤59例,ccRCC 46例。基于建模组数据比较肾错构瘤与ccRCC组MRI-DWI不同指数模型参数,采用多因素Logistic回归分析筛选鉴别诊断ccRCC与肾错构瘤的影响因子,并建立列线图模型进行内部验证及外部验证。结果:ccRCC组MRI-DWI参数微循环灌注相关快速表观弥散系数(ADC)(Dt)、扩散异质性指数(α)值高于肾错构瘤组,表观弥散系数(ADC)值、单纯扩散相关慢速表观弥散系数值(Dp)、灌注分数(fp)、扩散分布指数(DDC)值低于肾错构瘤组(P<0.05)。经Logistic回归分析显示,Dt、α值是鉴别诊断ccRCC与肾错构瘤的危险因子(OR>1,P<0.05),ADC值、Dp、fp、DDC值是保护因子(OR<1,P<0.05)。根据以上参数建立的列线图模型在建模组与验证组C指数分别为0.941、0.903,校准曲线与理想曲线接近;ROC曲线显示,建模组与验证组的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.962(95%CI为0.921~1.000)、0.903(95%CI为0.846~0.961),敏感度分别为0.907、0.898,特异度分别为0.935、0.804,约登指数分别为0.842、0.702。结论:基于MRI-DWI不同模型参数构建的列线图模型具有良好的区分度、准确性,对ccRCC与肾错构瘤具有较高的鉴别诊断价值。

透明细胞肾细胞癌中ENO2的表达及临床意义

目的探讨烯醇化酶2(enolase 2,ENO2)在透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell cancer,CCRCC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化MaxVision法检测ENO2蛋白在97例CCRCC及配对正常肾组织中的表达,并分析ENO2表达与临床病理特征的关系。分析TCGA数据库中542例CCRCC和72例正常肾组织中ENO2 mRNA的表达水平。利用ROC曲线分析CCRCC和正常肾组织中ENO2 mRNA和蛋白表达的敏感性和特异性。通过GEPIA在线网站分析ENO2与CCRCC患者预后的关系。TIMER在线数据分析ENO2表达与糖代谢路径关键基因HK2、ALDOA、PGK1、PKM2及LDHA的相关性。结果ENO2蛋白在CCRCC中的高表达率为71.13%,而在正常肾组织中几乎不表达,ENO2表达与ISUP/WHO分级(P=0.019)、有无肾周脂肪侵犯(P=0.028)明显相关。TCGA-CCRCC数据库中,CCRCC组的ENO2 mRNA表达均显著上调(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,CCRCC中ENO2 mRNA(AUC=0.959,P<0.001)和蛋白水平(AUC=0.964,P<0.001)均具有较高的特异性和敏感性。ENO2与糖代谢路径相关基因HK2、ALDOA、PGK1、PKM2和LDHA的表达呈正相关。GEPIA在线网站分析ENO2与CCRCC患者预后的关系结果提示,ENO2 mRNA高表达组的总生存期显著短于低表达组。结论ENO2在CCRCC中过表达,有助于评估ISUP/WHO分级,可辅助CCRCC的病理诊断,并可能与糖代谢异常相关。

EBP50和EGFR在透明细胞性肾细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探究ERM结合磷酸化蛋白50(ERM-binding phosphoprotein-50,EBP50)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在透明细胞性肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)及正常肾组织中的表达及相关性,并分析二者与患者临床病理特征之间的关系。方法:用免疫组化检测原发ccRCC、转移ccRCC和正常肾组织中EBP50及EGFR的表达,并在原发ccRCC中检测EBP50和EGFR的相关性及两者与ccRCC临床病理特征的关系。结果:EBP50在原发和转移ccRCC中的阳性表达率低于正常肾组织,EGFR在原发和转移ccRCC中的阳性表达率高于正常肾组织;原发ccRCC中,EBP50的表达差异在年龄、Fuhrman分级中具有统计学意义,EGFR的表达差异在肿瘤最大径、Fuhrman分级中具有统计学意义;EBP50与EGFR的表达在原发ccRCC中呈负相关。结论:在ccRCC中,EBP50低表达,EGFR高表达,EBP50可能发挥抑癌作用,EGFR可能发挥致癌作用;EBP50可能通过抑制EGFR的表达和功能来发挥作用;EBP50和EGFR可辅助病理医师判断ccRCC的分级。

染色质调节因子相关的lncRNA肾透明细胞癌预后模型的构建和验证

目的构建染色质调节因子(CR)相关长链非编码RNA(lncRNA)的肾透明细胞癌(ccRCC)预后模型,提高ccRCC的预后管理。方法从TCGA数据库下载ccRCC的转录组数据和临床数据,并通过“caret”R包将ccRCC样本以7∶3的比例分为训练集(166例)和验证集(71例)。基于“DESeq2”R包筛选出差异表达的CR及相关的lncRNA。构建CR与lncRNA的共表达网络,并筛选出相关系数|rs|>0.3且P<0.05的差异lncRNA。利用单因素Cox、Lasso和多因素逐步Cox回归分析,构建CR相关的lncRNA预后模型。计算训练集和验证集样本的风险评分,根据风险评分的中位数将ccRCC患者分为高、低风险组。K-M曲线和受试者操作特征(ROC)曲线评价模型,单因素和多因素Cox回归分析评估风险评分的独立预测性能。“DynNom”和“shiny”R包开发在线预测工具。单样本基因集富集分析探索风险评分与免疫微环境及免疫检查点的关系。结果本研究最终纳入237个肿瘤样本和72个癌旁正常组织样本,鉴定了1025个CR相关的lncRNA,最终筛选得到7个CR相关lncRNA(DUXAP8、AC026462.3、LINC01460、AL592494.1、AL353804.2、AC012462.1、AC009518.1)构建预后模型,并将其开发成在线工具(https://xzlmodelshiny.shinyapps.io/DynNomapp/)。高危组患者的生存率低于低危组(P<0.05),ROC曲线表明模型预测效能较好,单因素分析和多因素分析中风险评分的HR值分别为4.058(95%CI:2.530~6.508,P<0.001)和3.096(95%CI:1.887~5.080,P<0.001)。高风险组MDSC和Tregs细胞等免疫抑制细胞的浸润比例高于低风险组,趋化因子、免疫检查点及副炎症等通路的富集水平高于低风险组(P<0.05)。此外,风险评分与免疫检查点TNFRSF25和TNFSF14呈正相关(r>0.3,P<0.05)。结论本研究构建的CR相关的lncRNA风险模型可独立有效地预测ccRCC患者的预后。

透明细胞肾细胞癌的不常见组织学形态及诊断思路

透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,CCRCC)是肾脏最常见的恶性上皮源性肿瘤,占肾细胞癌的60%~75%[1],与其他恶性肿瘤一样,具有生物异质性的普遍特征,即组织学形态异质性。CCRCC经典型组织学形态为肿瘤细胞呈巢状、腺泡状或管状结构,胞质透明,偶尔嗜酸性,伴有丰富的毛细血管网,与VHL双等位基因失活相关[2]。肿瘤细胞核级别与胞质颜色相匹配,当细胞核级别较低时(WHO/ISUP 1~2级),细胞质透明;当细胞核级别较高时,细胞质偏向嗜酸性。

肾透明细胞癌患者血清miR-21及miR-27b与预后的关系

目的探究肾透明细胞癌患者血清微小RNA(miR)-21及miR-27b与预后的关系。方法筛选2019年2月至2021年4月青海大学附属医院收治的118例肾透明细胞癌患者作为研究对象,另选取院内同期健康体检患者118例作为对照组,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测所有受试者血清miR-21及miR-27b表达。比较肾透明细胞癌患者及健康对照患者的血清miR-21及miR-27b相对表达量;不同病理分期、Fuhrman分级肾透明细胞癌患者的血清miR-21及miR-27b表达及相关性;血清miR-21及miR-27b表达与肾透明细胞癌患者生存预后的关系。结果肾透明细胞癌组患者的血清miR-21及miR-27b表达量均高于健康对照组(P<0.05)。Ⅲ期患者的血清miR-21表达量高于Ⅰ期(P<0.05),Ⅳ期患者的血清miR-21表达量高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的血清miR-27b表达量逐渐升高(P<0.05)。病理分期与血清miR-21及miR-27b表达均呈正相关(P<0.001)。Fuhrman分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级患者的血清miR-21、miR-27b表达量逐渐升高(P<0.05)。Fuhrman分级与血清miR-21及miR-27b表达均呈正相关(P<0.001)。miR-21高表达组与低表达组,miR-27b高表达组与低表达组患者的生存曲线比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肾透明细胞癌患者的血清miR-21及miR-27b表达水平可反映患者的病情进展及预后生存情况。

PGC-1α诱导细胞周期阻滞抑制肾透明细胞癌的实验研究

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂1α(PGC-1α)在透明细胞型肾细胞癌(ccRCC)中的调控作用。方法本研究收集在郑州大学附属第一医院治疗的98例ccRCC患者的肾癌和癌旁组织,以及患者一般临床资料。利用RT-qPCR法检测不同临床分期和病理分级ccRCC患者组织中PGC1αmRNA的相对表达水平。使用细胞培养模型786-O、ACHN、RCC4等ccRCC细胞系以及人肾皮质近曲小管上皮永生化细胞系(HK-2)探讨PGC-1α在肿瘤细胞中的作用。采用CCK8实验、细胞克隆形成实验、细胞周期测定和蛋白表达检测等方法评估PGC-1α对ccRCC细胞增殖、克隆形成能力以及细胞周期的影响及其机制。结果在ccRCC患者中,与癌旁组织相比,癌组织中PGC-1α的表达水平明显下调,并且PGC-1α的表达水平与肿瘤的临床分期和病理分级相关。体外实验结果表明PGC-1α过表达抑制ccRCC细胞的增殖和克隆形成能力,并诱导细胞周期阻滞。进一步的蛋白表达检测显示,PGC-1α过表达导致细胞周期调控相关蛋白的表达水平发生改变,诱导P16、P21和P27的表达的上调和Cyclin D的下调。结论PGC-1α通过诱导细胞周期阻滞从而抑制ccRCC的发展。

Ⅳ型胶原蛋白A4在肾透明细胞癌中的表达及其与预后和免疫浸润的相关性分析

目的探究Ⅳ型胶原蛋白A4(collagen typeⅣalpha 4 chain,COL4A4)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达及其与临床预后和免疫浸润的关系。方法利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和高通量基因表达(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库分析COL4A4在ccRCC组织和癌旁正常组织中的表达差异。Western blot实验探究COL4A4在人ccRCC细胞株(786-O、OS-RC-2、Caki-1、SW839和RCC4)和人正常肾小管上皮细胞株HK-2中的表达差异。Kaplan-Meier曲线用于分析COL4A4表达与ccRCC患者的临床总生存期、无进展生存期和疾病特异性生存期的关系,并用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价COL4A4对预测ccRCC发生的诊断价值。利用cBioPortal和COSMIC数据库分析COL4A4在ccRCC中的突变情况。采用STRING数据库构建COL4A4的蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络。采用LinkedOmics数据库构建COL4A4的共表达基因网络。采用R软件进行基因本体(Gene Ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路富集分析。基于TCGA数据的单样本基因集富集分析(single sample gene set enrichment analysis,ssGSEA)分析ccRCC中COL4A4表达与免疫浸润的相关性。结果TCGA和GEO数据库均显示,COL4A4在ccRCC组织中低表达(均P<0.05)。Western blot实验证实,COL4A4在ccRCC细胞株(786-O、OS-RC-2、Caki-1、SW839和RCC4)中均低表达(均P<0.05)。高表达COL4A4的患者具有更好的总生存期、无进展生存期和疾病特异性生存期(均P<0.01)。COL4A4是ccRCC患者的独立危险因素(HR=0.562,95%CI:0.352~0.898,P<0.05)。COSMIC数据库发现,COL4A4突变频率较低,在ccRCC中稳定表达。PPI网络显示,COL4A4与整合素家族密切相关。功能富集分析发现,COL4A4参与GTP酶活性调节、细胞核分裂、细胞周期转换、自噬和T细胞激活等生物学过程。信号通路富集分析提示,COL4A4主要参与沙门氏菌感染和细胞间的紧密连接。免疫浸润分析发现,COL4A4表达与调节性T细胞浸润呈负相关(r=-0.428,P<0.05)。结论COL4A4是ccRCC的潜在生物预后标志物和治疗靶点。

肾透明细胞癌中双硫死亡核心基因SLC7A11的孟德尔随机化及生物信息学分析

目的分析溶质载体家族7成员11(SLC7A11)在肾透明细胞癌(ccRCC)发生、发展中的作用及其预后价值。方法采用两样本孟德尔随机化分析以识别与ccRCC风险存在因果关系的基因。使用来自UCSC Xena泛癌队列的RNA测序数据及临床数据分析SLC7A11的表达及预后意义。使用TCGA-KIRC数据(训练集)进行基因集富集分析(GSEA)。随后通过逐步Cox回归分析建立了基于SLC7A11的预后模型,并在E-MATB-1980队列(验证集)中进行了外部验证。结果孟德尔随机化分析显示,SLC7A11水平升高会加重ccRCC的患病风险(HR=1.27,95%CI:1.15~1.40,P<0.001)。SLC7A11在各种肿瘤中过表达,并与高T分期和较差的生存预后相关(P<0.05)。GSEA显示SLC7A11富集在增殖和转移相关通路,包括E2F和上皮-间质转化信号通路。SLC7A11预后模型在训练集(1、3、5年AUC=0.78、0.73、0.71)和验证集(1、3、5年AUC=0.70、0.71、0.72)中均显示出强大的预测性能。结论SLC7A11作为ccRCC的潜在生物标志物和治疗靶点,为精准医学提供了新视角。

增强CT影像组学对肾透明细胞癌恶性程度的鉴别

目的探索基于CT增强图像影像组学鉴别肾透明细胞癌恶性程度的价值。方法回顾性分析192例经病理证实为肾透明细胞癌(CCRCC)增强CT图像资料,其中低级别组(Ⅰ-Ⅱ级,n=111)、高级别组(Ⅲ-Ⅳ级,n=81)。对于增强CT皮质髓质期(CMP)、肾实质期(NP)、排泄期(EP)及三期联合的图像进行影像组学特征提取,运用最小绝对收缩率和选择运算符(LASSO)进行降维,选取有价值的组学特征,采用五折交叉验证将样本量分为训练组及测试组,训练组采用支持向量(support vector machine,SVM)及逻辑回归(logistic regression,LR)两类分类器创建CMP、NP、EP及三期联合的影像组学模型,运用受试者工作特征曲线下面积(AUC)、准确度、灵敏度、特异度、精确度最终评估影像组学模型对于肾透明细胞癌恶性程度的诊断效能,并用测试组进一步验证。结果基于CMP、NP、EP及三期联合图像所建立的影像组学模型与CCRCC恶性程度显著相关,且CMP影像组学模型对于CCRCC恶性程度诊断效能最高(R=0.831,0.801)。SVM分类器模型测试组CMP、NP、EP及三期联合诊断效能ROC曲线下面积(AUC)值分别为0.819、0.785、0.808、0.812;LR分类器模型测试组CMP、NP、EP及三期联合AUC值分别为0.860、0.789、0.808、0.799;在SVM与LR分类器中,CMP与EP、CMP与NP影像组学模型AUC值之间具有显著差异(P<0.05),NR与EP模型之间无差异(P>0.05)。两类分类器均有较好的诊断性能,且SVM分类器建立的影像组学模型性能较LR分类器更稳定、全面。结论基于增强CT影像组学特征所建立的影像组学模型对于肾透明细胞癌恶性程度鉴别具有临床指导性作用,且SVM分类器建立的影像组学模型性能更加稳定、全面。