透明质酸介导的细胞游走受体与恶性肿瘤侵袭和转移的关系

透明质酸介导的细胞游走受体(RHAMM)是透明质酸的受体之一,与恶性肿瘤生成、浸润和转移有密切关系。其表达水平升高与肿瘤的侵袭参数呈正相关,是衡量肿瘤侵袭程度的重要标志。现通过对RHAMM与各种恶性肿瘤生成、浸润和转移的关系进行综述,以期为恶性肿瘤诊断和治疗提供一种新的途径和方向。

透明质酸介导的细胞游走受体在胆管癌侵袭和转移中的作用

目的:探讨透明质酸介导的细胞游走受体(Receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)在胆管癌侵袭和转移中的作用。方法:收集临床上行胆管癌手术的患者的组织标本及正常胆管组织标本,根据分化程度将胆管腺癌组织标本分为高、中、低分化3组;按TNM分期标准将所有组织标本分为对照组、胆管癌组以及胆管癌伴转移组。免疫组织化学(SP)法测定RHAMM平均光密度值。RT-PCR及Western blot法检测RHAMM mRNA和蛋白的表达水平。结果:免疫组织化学检测在不同分化程度的胆管腺癌中RHAMM均有不同程度的表达(P>0.05);RHAMM在胆管癌伴转移组阳性率最高,在对照组表达阳性率最低。RT-PCR和Western blot检测RHAMM mRNA和蛋白表达水平在对照组和胆管癌组差异无统计学意义(P>0.05)。在胆管癌伴转移组明显高于对照组和胆管癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RHAMM的表达程度与胆管腺癌的分化程度无关,但在胆管癌伴转移组中的高表达可能与胆管癌的侵袭相关,并最终促进了胆管癌的转移。

透明质酸介导运动因子受体基因在口腔鳞状细胞癌中的作用及其临床预后

目的:筛选与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)预后相关的基因,并探究其在OSCC发生、发展中的作用及机制。方法:筛选并纳入癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库中头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)数据集下的OSCC肿瘤样本(OSCC组)330例,正常样本(正常样本组)37例,通过生物信息学分析的方法筛选出两组之中差异表达的基因。进一步通过肿瘤T分级(T1+T2组为114例,T3+T4组为216例)、转移(阳性组为163例,阴性组为167例)及病理分级(G1+G2组为244例,G3+G4组为86例)分别对其进行分组,分别求得差异基因后取交集,筛选出与OSCC预后相关的差异表达基因。进一步选择差异倍数最大的差异基因[透明质酸介导运动因子受体(hyaluronan mediated motility receptor,HMMR)基因]进行下一步研究,探讨HMMR基因与临床分级(Stage Ⅰ+Ⅱ组为69例,Stage Ⅲ+Ⅳ组为261例)、T分级、转移及病理分级之间的关系,并根据HMMR基因表达的中位值分为高表达组和低表达组(高表达组为165例,低表达组为165例),采用Kaplan-Meier生存分析探讨HMMR表达的高低与预后相关因子之间的关系。收集2014年1月至2016年1月在湖南中医药大学第一附属医院接受手术治疗的50例OSCC患者的肿瘤组织标本及配对的正常口腔黏膜组织标本,采用realtime RT-PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学等技术对生物信息学的分析结果进行验证,采用Kaplan-Meier生存分析检测HMMR免疫组织化学染色阳性及阴性表达(阳性组为32例,阴性组为18例)与预后之间的关系,采用Cox回归分析模型探讨OSCC预后相关危险因子,再分别通过细胞增殖实验及细胞划痕实验评估下调HMMR表达后对OSCC细胞增殖及迁移能力的影响。结果:在OSCC组织中HMMR呈高表达,且HMMR高表达组的预后相关因子相对于低表达组显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),HMMR高表达与T分级(RR=1.33,P<0.05)、淋巴结转移(RR=1.74,P<0.05)、临床分期(RR=1.49,P<0.05)显著相关,是OSCC预后的一个独立危险因子(RR=1.45,P<0.05)。与下调前相比,下调HMMR后可抑制OSCC细胞的增殖及迁移,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:HMMR作为OSCC的一个原癌基因,可促进OSCC的发生、发展,其可能可作为一个潜在的早期诊断标志物及靶向治疗的新靶标。

透明质酸介导的细胞游走受体基因的分子生物学特性及其与肿瘤的关系

透明质酸介导的细胞游走受体(receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)是继CD44之后发现的,分布于细胞膜表面、细胞浆以及细胞核,参与细胞分裂周期的调节、细胞的生长增殖、细胞迁移运动、细胞骨架的组装以及维持中心体和纺锤体极的结构的完整性,与细胞恶性转化、肿瘤浸润和转移等生物学行为密切相关;并且已作为一些肿瘤的肿瘤相关抗原,确定了其抗原表位,成为肿瘤免疫治疗的靶点;在一些肿瘤组织内的表达水平升高和呈现一定的表达模式,与肿瘤临床分级以及肿瘤预后有一定的相关性。

乳腺癌肿瘤高甲基化基因1蛋白和透明质酸介导的细胞游走受体表达分析研究

目的 :探讨抑癌基因肿瘤高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC-1)和致癌基因透明质酸介导的细胞游走受体(hyaluronan-mediated motility receptor,HMMR)在乳腺小叶增生、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌组织中的表达情况,及其与乳腺癌临床病理参数间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测57例患者的乳腺手术切除标本(其中乳腺小叶增生17例,乳腺纤维腺瘤及乳腺癌各20例)中HIC-1与HMMR蛋白的表达情况,观察其染色结果以半定量分析,并结合临床病理学指标进行相关分析。结果:(1)乳腺小叶增生和乳腺纤维腺瘤组织中HIC-1蛋白表达呈中度阳性(平均计分均为5.65分);而乳腺癌组织中HIC-1表达减弱,呈弱阳性(平均计分为2.15分),二者间差异有统计学意义(P<0.001)。(2)乳腺小叶增生和纤维腺瘤组织中的HMMR均呈低表达(其中纤维腺瘤平均计分为0.3分,小叶增生平均积分为0),而乳腺癌组织中HMMR表达呈弱阳性(平均计分为2.3分),二者间差异有统计学意义(P<0.001)。(3)HIC-1及HMMR蛋白的表达与乳腺癌相关临床病理特征之间未见明显关联。结论:抑癌基因HIC-1蛋白在乳腺癌组织中呈明显低表达,而致癌基因HMMR在乳腺癌组织中呈较高表达,HIC-1及受HIC-1调控的下游基因HMMR可能与乳腺恶性肿瘤的发生、发展有关。

透明质酸介导的细胞游走受体和CD_(44v6)在膀胱癌侵袭转移中的作用

目的 探讨透明质酸介导的细胞游走受体 (RHAMM )、CD44v6在膀胱癌侵袭转移中的作用。方法 采用免疫组织化学检测膀胱癌RHAMM ,CD44v6的表达 ;Westernblot法检测膀胱癌RHAMM蛋白表达。结果 膀胱癌RHAMM、CD44v6阳性表达率分别为 60 .9%和 5 3 .1%。随着膀胱癌进展RHAMM阳性表达有增高趋势 ,而CD44v6表达显著下降 ,与病理分期、术后复发及转移有关(P <0 .0 5 )。Westernblot证实膜型RHAMM蛋白在膀胱癌有上调表达。结论 RHAMM、CD44v6异常表达与膀胱癌侵袭及预后有关 ,可能是判断膀胱癌恶性表型及预后的指标之一。

基于GEO等数据库分析透明质酸介导的运动性受体在肝细胞癌中的表达及预后的影响

目的 初步探讨透明质酸介导的运动性受体(HMMR)在肝细胞癌中的表达及其与患者预后的相关性。方法 运用GEO数据库分析筛选合适的人肝癌芯片数据,利用GEO2R在线分析差异基因;采用HPA数据库分析肝癌组织与肝正常组织的表达差异性;运用Kaplan-Meier Plotter数据库分析HMMR表达与肝癌患者预后的相关性。结果 通过GEO筛选出合适的3项人肝癌芯片数据,GEO2R在线分析3项数据集相交共得到103个差异基因,其中上调基因27个,下调基因76个,通过生信整合分析获得一个具有潜在肿瘤标记物的HMMR基因。HPA数据库进一步在蛋白水平证实HMMR在肝癌中的表达显著高于正常肝组织。结论 HMMR在肝癌组织中高表达,且其高表达与患者生存期短密切相关。

HMMR预测肝细胞癌预后的生物信息学分析

目的探讨透明质酸介导的运动受体(HMMR)在肝细胞癌中的表达及在临床预后中的作用。方法从癌症基因组图谱计划(TCGA)和国际癌症基因组联合体(ICGC)数据库中下载肝细胞癌转录组数据、HMMR的表达信息以及609例患者的临床资料,采用Wilcoxon秩和检验、Kruskal-Wallis检验和Logistic回归分析临床特征与HMMR表达之间的关系,同时使用Kaplan-Meier生存分析、单因素和多因素COX回归分析评估HMMR预测肝细胞癌预后的价值。利用基因富集分析(GSEA)预测HMMR高风险组主要富集的生物学功能和通路。结果在TCGA和ICGC两组数据库中都表明HMMR在肝细胞癌组织中高表达,且其表达水平与临床分期有一定的相关性。生存分析显示,HMMR高表达患者生存时间更短;单因素和多因素COX回归分析表明,HMMR可以作为肝细胞癌的独立预后因子。GSEA显示,HMMR高风险组主要富集通路包括DNA复制、P53信号通路、癌症通路、凋亡通路等。结论HMMR在肝细胞癌中高表达,且HMMR有可能成为肝细胞癌预后的生物标志物及治疗的靶点。

HMMR通过MEK/ERK信号通路促进肝细胞癌侵袭转移

目的探讨透明质酸介导的细胞游走受体(hyaluronan-mediated motility receptor,HMMR)对肝细胞癌侵袭转移的影响及潜在机制。方法采用qRT-PCR和Western blot法检测肝癌细胞系和肝癌组织,以及免疫组化检测肝癌组织中HMMR的表达;通过划痕实验、Transwell小室观察沉默/过表达HMMR对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响;通过小鼠肝癌肺转移模型观察沉默HMMR对肝癌肺转移的影响;采用Western blot检测HMMR对E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、p-MEK、p-ERK等蛋白水平的影响。结果肝癌细胞系中HMMR呈高表达。肝癌组织中HMMR的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),并且转移组癌组织中HMMR的水平明显高于非转移组(P<0.05)。沉默HMMR后细胞的迁移侵袭能力明显低于对照组(P<0.01),并且E-cadherin表达上调,N-cadherin、Vimentin表达下调(P<0.01);而过表达HMMR后细胞迁移侵袭能力显著增强(P<0.01),并且N-cadherin、Vimentin表达上调,E-cadherin表达下调(P<0.01)。体内实验结果显示基因敲减HMMR的肝癌细胞导致的肺转移病灶数显著低于对照组(P<0.05);过表达HMMR后p-MEK和p-ERK表达上调(P<0.01),而MEK、EKR无明显变化(P>0.05)。MEK抑制剂削弱了过表达HMMR介导的细胞的迁移侵袭(P<0.01)。结论HMMR在肝癌中高表达并且可能通过调控MEK/ERK信号通路从而促进肝细胞癌侵袭转移。

HMMR促进原发性肝癌细胞增殖且与不良预后的相关性

目的研究透明质酸介导运动因子受体(HMMR)在原发性肝癌中的表达及对肝癌细胞增殖的影响,阐明HMMR的高表达与肝癌患者预后的相关性。方法收集GEO数据库中原发性肝癌患者(GSE121248)的临床信息及基因表达信息,生物信息学分析得到差异基因,设计针对HMMR基因的小干扰RNA载体,通过沉默HMMR基因表达验证其在肝癌细胞增殖中的影响;分析临床信息,阐明其高表达与肝癌患者预后的关系。结果临床大数据生物信息学分析发现HMMR基因在肝癌中明显高表达,免疫组化染色显示原发性肝癌组织中HMMR表达明显高于癌旁肝脏组织,免疫组化打分比较,差异有统计学意义(t=2.953,P=0.0121);利用小干扰RNA敲低HMMR的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)与实时荧光定量PCR实验验证小干扰RNA的敲低效率(沉默序列1:t=13.2,P=0.0002;沉默序列2:t=8.668,P=0.0010);平板克隆形成实验表明,低表达HMMR的肝癌细胞(HepG2)的增殖能力明显减低(沉默序列1:t=22.3,P=0.0043;沉默序列2:t=16.63,P=8×10-5);在KM-plotter数据库中分析HMMR基因表达高低对肝癌患者预后的影响,发现高表达HMMR基因的肝癌患者[总体生存率(OS):n=128、无复发生存率(RFS):n=110]OS及RFS明显差于低表达HMMR基因的肝癌患者(OS:n=236、RFS:n=206),[OS:风险比(HR)=2.29(1.62~3.24),P=1.3×10-6、RFS:HR=1.99(1.42~2.78),P=3.5×10-5],进一步分析发现,高表达HMMR的不同分期的肝癌患者的预后不尽相同,提示HMMR可以作为早期肝癌患者的预后标志物。结论HMMR在原发性肝癌患者中明显高表达,促进肝癌细胞的增殖,可以作为早期肝癌患者预后检测的潜在标志物。

胃癌组织Survivin、RHAMM表达及意义

目的探讨Survivin、透明质酸受体介导的细胞游走受体(RHAMM)在胃癌发生、发展中的作用。方法选择胃癌患者79例(观察组)、体检健康者120例(对照组),取观察组胃癌组织标本、对照组正常胃组织标本,采用免疫组化法检测两组组织标本中Survivin、RHAMM的表达,并分析Survivin、RHAMM表达与胃癌患者临床病理参数的关系及二者的相关性。结果观察组Survivin、RHAMM阳性表达率分别为70.89%(56/79)、68.35%(54/79),对照组分别为9.17%(11/120)、2.50%(3/120);两组比较P均<0.05。胃癌组织中Survivin、RHAMM阳性表达与肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期均有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、组织分化程度均无关(P均>0.05)。胃癌组织Survivin阳性表达与RHAMM阳性表达呈正相关(r=0.452,P<0.05)。结论 Survivin、RHAMM参与了胃癌的发生、发展及转移过程,其在胃癌组织中的表达可作为胃癌早期诊断、治疗及评估预后的指标之一。

胃癌组织中CD44v6和RHAMM的表达及临床意义

目的:探讨CD44v6和HA受体介导的细胞游走受体(Receptor of HA mediated motility,RHAMM)在胃癌组织中的表达情况及其与胃癌临床病理特征、患者预后的关系。方法:采用免疫组化法检测78例胃癌组织和25例正常胃黏膜组织中CD44v6和RHAMM的表达。结果:CD44v6和RHAMM染色均呈黄褐色,CD44v6在胃癌组织中的阳性表达率为64.1%(50/78),而在正常胃黏膜组织中未检测到阳性表达。RHAMM在胃癌组织中的阳性表达率为66.7%(52/78),与正常胃黏膜组织中的阳性表达率12%(3/25)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中CD44v6和RHAMM的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤分化程度无关(均P>0.05)。但CD44v6和RHAMM的表达与肿瘤的浸润深度和淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。结论:CD44v6和RHAMM在胃癌中高表达,胃癌细胞可能通过CD44v6和RHAMM促进转移,CD44v6和RHAMM的表达对胃癌的浸润转移有重要作用。

肿瘤高甲基化基因1重要下游基因HMMR对乳腺癌细胞株MDA-MB-231迁移和侵袭能力影响的体外实验

目的 :探讨肿瘤高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC-1)与透明质酸介导的细胞游走受体(hyaluronan-mediated motility receptor,HMMR)基因之间的调控关系,观察HMMR产物对MDA-MB-231乳腺癌细胞株的迁移和侵袭能力的影响。方法:MDA-MB-231细胞分别转染双链小激活RNA(small activating RNA,sa RNA)HIC-1和双链小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)HMMR,通过反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白印迹法检测观察转染后HIC-1、HMMR的m RNA和蛋白的表达情况,用CCK-8细胞增殖实验检测HIC-1和HMMR表达改变对乳腺癌细胞增殖能力的影响,再用Transwell小室观察其改变对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:转染sa RNA HIC-1时MDA-MB-231细胞中HIC-1上调,同时HMMR表达下调,细胞的迁移和侵袭能力受抑制,细胞增殖能力未发生改变;转染si RNA HMMR时,MDA-MB-231细胞中HMMR表达下调,细胞的迁移和侵袭能力受抑制,细胞增殖能力未受影响。结论:HIC-1可调控HMMR的表达,HIC-1表达上调可下调HMMR,乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力受抑制;乳腺癌细胞中因HIC-1失活,导致HMMR呈高表达,促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭。

Lgr5和MIF在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的研究富含亮氨酸重复单位的G蛋白偶联受体5(Lgr5)和巨噬细胞游走抑制因子(MIF)在结直肠癌中的表达及其与临床病理因素之间的相关性。方法收集2014年5月至2016年5月结直肠癌石蜡包埋标本64例。采用免疫组化检测34例正常肠道组织、40例肠上皮内瘤变、64例结直肠癌组织中的Lgr5和MIF的表达,并分析其与临床病理因素之间的关系。结果 Lgr5在正常肠道组织、肠上皮内瘤变以及结直肠癌中的阳性表达率分别为6.88%、47.50%、84.38%,呈逐渐增高的趋势,且两两比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。MIF在正常组织、肠上皮内瘤变以及结直肠癌组织中的表达率分别为17.65%、40.00%、81.25%,也呈逐渐增高的趋势,且两两比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。结直肠癌组织中的Lgr5、MIF高表达与病理分级、Dukes分期以及有无淋巴结转移等临床病理因素有关(P<0.05,P<0.01),而与性别、年龄无关(P均>0.05)。结论 Lgr5和MIF在结直肠癌组织中呈高表达,且与其发生、发展、侵袭、转移密切相关,对上述因子的调控有可能成为结直肠癌治疗的新的靶点。

RHAMM及TPX2在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义

目的探讨透明质酸介导的细胞游走受体(RHAMM)以及Xklp2靶蛋白(TPX2)蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化EnVision二步法检测51例卵巢上皮性癌(A组)、20例上皮性卵巢交界性肿瘤(B组)、22例上皮性卵巢良性肿瘤(C组)以及12例正常卵巢组织(D组)中RHAMM和TPX2蛋白的表达。结果 RHAMM与TPX2蛋白在D组均不表达;在C组、B组和A组中阳性表达率分别为22.7%和9.1%、30.0%和55.0%、88.2%和86.3%,组间差异均有统计学意义(P<0.01)。A组中RHAMM蛋白表达与病理分期、淋巴结转移相关(P<0.05),而与年龄、病理类型、组织分级无关(P>0.05);TPX2蛋白表达与病理分期、组织分级、淋巴结转移相关(P<0.05),而与年龄、病理类型无关(P>0.05)。RHAMM与TPX2蛋白在卵巢上皮性癌中表达呈正相关(rs=0.446,P=0.001)。结论 RHAMM与TPX2可能共同参与卵巢上皮性癌的发生与发展;RHAMM与TPX2有望成为卵巢上皮性癌预后评估的指标。