透明质酸结合蛋白1在肿瘤中的研究进展

癌症是一种复杂的、多因素、多阶段的疾病,威胁着全球人类的健康。透明质酸结合蛋白1(HABP1)是透明质酸黏素家族中的一员,是一种多功能蛋白,能够特异性地与透明质酸结合,具有独特的晶体结构和多种生物学特性,参与癌症的发生和转移。在哺乳动物细胞内外均有表达,可以与多种细胞蛋白发生作用,参与调控免疫反应、细胞周期和细胞信号转导等。HABP1几乎在所有组织特异性的癌症中均有高表达,与患者的预后和临床分期相关,并参与某些癌症的转移和侵袭过程。

透明质酸结合蛋白1和细胞周期蛋白A在子宫内膜癌组织中表达及临床意义

目的:探讨透明质酸结合蛋白1 (hyaluronan binding protein 1, HABP1)和细胞周期蛋白A (Cyclin A)在子宫内膜腺癌的表达及其与临床病理的关系,初步评价HABP1和Cyclin A在子宫腺癌发生发展中的作用及其临床应用价值。方法:选取子宫内膜腺癌组织56例,子宫内膜非典型增生组织24例,正常子宫内膜组织20例。用免疫组织化学染色法检测HABP1和Cyclin A在子宫内膜腺癌组、子宫内膜非典型增生组和正常子宫内膜组中的表达,并分析HABP1和Cyclin A与临床病理特征的相关性。结果:免疫组化分析表明,HABP1和Cyclin A在子宫内膜腺癌中表达高于正常子宫内膜和非典型增生子宫内膜,差异有统计学意义(P<0.05);在晚期子宫内膜腺癌、低分化组和有淋巴结转移组较早、中分化组和无淋巴结转移组表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);在子宫内膜癌HABP1和Cyclin A二者的表达呈正相关。结论:HABP1和Cyclin A在子宫内膜腺癌中表达增高,并且与临床分期、组织分化程度、肌层浸润深度和有无淋巴结转移有关,且二者的表达呈正相关。二者的异常表达不仅促进子宫内膜细胞癌变的发生发展,而且参与子宫内膜癌的转移过程,可能成为预测子宫内膜癌发生和判断子宫内膜癌预后的新的肿瘤标志物应用于临床。

透明质酸结合蛋白1在人卵巢癌细胞系中表达及其与紫杉醇敏感性的关系

目的探讨透明质酸结合蛋白1在人卵巢癌细胞系SKOV3、HO-8910PM、HO-8910LM、OVCA429和OVCA420中的表达和定位及其与紫杉醇敏感性之间的关系。方法 2007年2月至2008年12月在哈尔滨医科大学附属三院研究所应用荧光定量RT-PCR技术和免疫荧光化学法结合激光共聚焦显微镜分别检测人卵巢癌细胞系SKOV3、HO-8910PM、HO-8910LM、OVCA429和OVCA420中HABP1 mRNA和蛋白的表达以及其在细胞中的定位,MTT法分析各卵巢癌细胞系对紫杉醇的敏感性。结果 HABP1 mRNA在人卵巢癌细胞系SKOV3、OVCA429和HO-8910PM中的表达水平分别是OVCA420的3.7、2.8和2.1倍(P值均<0.05),HO-8910LM和OVCA420中HABP1 mRNA的表达水平无统计学差异(P值>0.05),激光共聚焦显示5种人卵巢癌细胞系中HABP1蛋白的表达变化趋势与mRNA水平基本一致,其中SKOV3、OVCA429和HO-8910PM细胞系中HABP1蛋白在细胞核周的表达量明显高于OVCA420和HO-8910LM。MTT分析显示,SKOV3、OVCA429、OVCA420、HO-8910PM和HO-8910LM细胞对紫杉醇的中效浓度分别是:0.047μmol/L、0.221μmol/L、0.723μmol/L、0.092μmol/L和0.672μmol/L,相关分析显示HABP1 mRNA表达水平与卵巢癌细胞对紫杉醇的中效浓度之间的相关系数为-0.888,P<0.05。结论 HABP1的表达与卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性呈显著正相关,其机制可能是由于其在细胞中的分布位置不同所致,HABP1可作为筛选卵巢癌化疗药物的指标之一。

大鼠肺纤维化和活性维生素D_3干预后P32和PKD1的表达及作用研究

目的探讨大鼠肺纤维化发生发展中透明质酸结合蛋白(P32)和蛋白激酶D1(PKD1)的表达及相互作用,以及活性维生素D_3(VD_3)干预后这2种因子表达的变化。方法90只清洁级雄性SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组通过气管内注射博来霉素(BLM,5 mg/kg)的方法复制大鼠肺纤维化模型,对照组经气管注射等体积的生理盐水(500μl/kg)。术后第2天,治疗组腹腔注射VD_3(2μg/kg),模型组腹腔注射等量的VD_3的溶剂(99.9%丙二醇和0.1%乙醇),对照组腹腔注射等量的生理盐水,各组均注射1次/2 d。各组分别于术后第14、21、28天处死10只大鼠。通过检测大鼠肺组织羟脯氨酸含量来验证肺纤维化,应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和免疫组织化学技术分别检测大鼠肺组织中P32和PKD1的表达水平。结果纤维化早期(14 d),治疗组中P32和PKD1 m RNA和蛋白质表达量与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组均高于模型组;相关性分析发现这2种基因的m RNA和蛋白质表达量具有相关性。结论在大鼠肺纤维化过程中,活性VD_3可能在纤维化早期促进P32和PKD1的表达,通过P32和PKD1在线粒体内的相互作用来实现抗氧化作用,进而抑制肺纤维化的发生发展。

HABP1在人卵巢癌细胞中的表达及其对紫杉醇敏感性的影响

目的探讨透明质酸结合蛋白1(HABP1)在5种人卵巢癌细胞系中的表达及其对紫杉醇敏感性的影响。方法采用荧光定量RT-PCR法检测各细胞系中HABP1 mRNA的表达量,激光共聚焦显微镜观察HABP1蛋白的表达及定位,MTT法检测各细胞系对紫杉醇的敏感性。结果 HABP1 mRNA在人卵巢癌细胞系SKOV3、OVCA429和HO-8910PM中的表达水平分别是OVCA420的3.7、2.8和2.1倍(P均<0.05),HO-8910LM和OVCA420中HABP1 mRNA表达量差异无统计学意义(P均>0.05),HABP1蛋白在五种卵巢癌细胞系中的胞质中均有表达,在SKOV3、OVCA429和HO-8910PM细胞中可见到明显的核周聚集,在HO-8910LM和OVCA420中其核周聚集量明显减少,SKOV3、OVCA429、OVCA420、HO-8910PM和HO-8910LM细胞对紫杉醇的中效浓度分别为0.047、0.221、0.7230、.092、0.672μM,相关分析显示HABP1 mRNA表达水平与卵巢癌细胞对紫杉醇的中效浓度之间的相关系数为-0.888,P<0.05。结论 HABP1高表达能增加人卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性,HABP1可作为筛选卵巢癌化疗药物的新指标。

人卵巢癌细胞HABP1的表达及其与侵袭转移能力的相关性

目的探讨透明质酸结合蛋白1(HABP1)在卵巢癌侵袭转移过程中的作用。方法分别用荧光实时定量RT-PCR和Western blot法检测HABP1 mRNA和HABP1蛋白在人卵巢癌细胞株HO-8910及高转移HO-8910PM细胞株中的表达,采用体外侵袭实验测定细胞侵袭能力。结果HO-8910PM中HABP1 mRNA和蛋白的表达水平均高于HO-8910,HO-8910PM的侵袭转移能力高于HO-8910。结论HABP1的高表达可能在人卵巢癌细胞的侵袭转移过程中发挥一定作用。

HABP1基因慢病毒干扰和表达载体的构建及表达

目的构建慢病毒介导的透明质酸结合蛋白1基因(HABP1)干扰载体及表达载体,建立HABP1降表达及过表达的稳定肾癌细胞系786-0。方法合成人HABP1基因短发夹RNA(shRNA)干扰序列,与慢病毒载体pLKO.1-TRC连接产生重组质粒pLKO.1-shHABP1;双酶切质粒pCDNA3.1(-)-HABP1-Flag,将目的基因片段连接到pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体上,组成重组表达载体pCDH-HABP1;酶切鉴定及DNA测序后,转染293T细胞,收集慢病毒颗粒感染786-0细胞,嘌呤霉素筛选稳定细胞系,western blot验证HABP1蛋白的表达水平。结果构建成干扰载体pLKO.1-shHABP1及表达载体pCDH-HABP1;与随机序列对照组比较,pLKO.1-shHABP1转染的786-0细胞HABP1表达水平(0.30±0.01)明显降低(t=25.98,P<0.05),pCDHHABP1转染786-0细胞后,HABP1的表达水平(3.20±0.40)明显升高(t=10.34,P<0.05)。结论成功构建HABP1基因的干扰载体及表达载体,且786-0细胞可稳定降表达及过表达HABP1。