载穿心莲二萜内酯有效部位的透明质酸-苯硼酸纳米粒的制备

目的制备载穿心莲二萜内酯有效部位的透明质酸-苯硼酸纳米粒。方法酰胺反应合成透明质酸-苯硼酸后,溶剂挥发法制备纳米粒,并进行表征。MTT法检测体外细胞毒性,HPLC法测定细胞摄取效率,UPLC-MS/MS法考察药动学行为。结果所得纳米粒呈球形,形态均一,平均粒径为(112.3±0.92)nm,Zeta电位为-48.4 mV,载药量为(47.50±0.62)%,包封率为(90.1±1.60)%,30 d内稳定性良好,24 h内累积释放度为90%。与原料药相比,纳米粒对HepG2、A549、MCF-7细胞的细胞毒性显著增强(P<0.05,P<0.01),摄取量显著升高(P<0.05),并呈时间依赖性。纳米粒体内消除缓慢,延长了药物循环时间。结论载穿心莲二萜内酯有效部位的透明质酸-苯硼酸纳米粒具有较强的体外抗肿瘤活性,并可促进大鼠体内药物吸收和生物利用度。

透明质酸修饰血清白蛋白纳米粒在肿瘤诊疗中的研究进展

传统检测和治疗肿瘤的方法存在局限性,如靶向性不足、灵敏度有限等。科学家们开发出的一种新型纳米系统,即利用透明质酸修饰血清白蛋白构建一种生物相容性和降解性都得到改善的纳米系统,有望提供一种新的肿瘤诊疗方法。此外,该纳米系统还具有独特的双重靶向效应,可间接提高肿瘤成像的灵敏度和治疗的准确性。本文旨在探讨透明质酸血清白蛋白纳米粒在肿瘤成像诊断、治疗和治疗一体化应用中的最新研究进展,并指出现阶段仍面临的挑战及须解决的问题,进而为抗肿瘤靶向纳米制剂的开发提供理论依据及方法指导。

透明质酸修饰纳米粒在超声-微泡介导下的体外靶向性与安全性评价

目的制备一种由透明质酸修饰的纳米粒核酸递送载体(HDP@siRNA NPs),评价其生物安全性以及在超声-微泡介导下的体外转染靶向性。方法采用超声乳化溶剂挥发联合两步静电吸附法制备得到HDP@siRNA NPs,在透射电镜下观察其外观形态,测定其粒径、Zeta表面电位及体外稳定性,并检测siRNA的包封率及体外释放能力。荧光显微镜观察超声-微泡介导下纳米粒对肿瘤细胞的转染效果。通过CCK-8实验以及小鼠定期给药后的血清生化指标[肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、肝脏的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)、肾脏的血清肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)]检测及主要器官(心、肝、脾、肺、肾)病理切片分析验证纳米粒体内外生物安全性。结果成功制备出HDP@siRNA NPs,其在透射电镜下为形态均一的三层球形结构,粒径为(154.71±2.91)nm,Zeta表面电位为(-14.12±1.67)mV,并可长期稳定保存。该纳米粒载体对siRNA的包封率为(77.05±2.28)%,体外释放实验显示其具有缓释效果。靶向纳米粒联合超声-微泡组转染细胞后,Cy3荧光强度量化值为单独siRNA组的3.98倍(P<0.001),为非靶向NPs组的1.71倍(P<0.001),为靶向NPs组的1.39倍(P<0.001)。CCK-8结果显示,共孵育siRNA浓度为100 nmol·L^(-1)及150 nmol·L^(-1)时,HDP@siRNA NPs组细胞存活率依然维持在较高水平,并高于DP@siRNA NPs组(P<0.001),同时加入SonoVue共孵育对细胞存活率未产生明显影响(P>0.05)。对健康小鼠定期注射纳米粒及SonoVue微泡期间,给药结束后的血清生化检测结果显示,三组小鼠心、肾、肝功能基本指标水平差异均无统计学意义(P均>0.05),心、肾、肝未见异常损害情况。结论成功制备的由透明质酸修饰的HDP@siRNA NPs具有较高的生物安全性,在超声-微泡介导下其转染细胞效率得到进一步提升,具备作为新型核酸递送载体的潜力。

阿霉素白蛋白透明质酸纳米粒的制备及评价

目的制备以人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)和透明质酸(hyaluronic acid,HA)为载体,负载抗肿瘤药物阿霉素(doxorubicin,DOX)的纳米粒子,对纳米粒制备处方进行优化,并对制剂进行质量评价,初步考察纳米粒的体外抗肿瘤效果。方法采用去溶剂-交联法制备得到负载阿霉素的白蛋白透明质酸纳米粒子(DOX-HSA-HA NPs),并利用Box-Behnken Design响应面优化筛选最优处方,采用透射电镜、激光粒度仪对纳米粒的形貌和粒径进行考察,并考察纳米粒的体外释放效果及体外溶血情况,最后通过细胞毒性实验初步考察纳米粒的体外抗肿瘤效果。结果按优化条件制得的DOX-HSA-HA NPs透射电镜下呈球形,分布均一,粒径为(213.39±0.79)nm,PDI值为0.062±0.012,Zeta电位为-25.53 mV,包封率达88.85%,载药量达2.06%;体外释放结果表明,在pH 6.8和pH 7.4条件下DOX-HSA-HA NPs具有缓释效果,加入透明质酸酶之后,DOX的释放量增加;溶血性实验表明,纳米载体材料HSA-HA NPs无溶血风险,可用于静脉注射给药;体外细胞实验表明,空白载体对细胞基本无毒性,相比于DOX-HSA NPs,DOX-HSA-HA NPs对小鼠乳腺癌4T1细胞的细胞毒性增强。结论采用去溶剂-交联法制得的DOX-HSA-HA NPs分布均匀,包封率高,具有明显的缓释作用和增强的细胞毒性。

响应性透明质酸胶束的合成与性能分析

透明质酸(HA)是一种具有癌细胞靶向性的天然多糖,基于特殊功能基团可用于构建病灶环境敏感的高分子纳米载体。本文利用可逆加成⁃断裂链转移(RAFT)聚合可控合成了3⁃丙烯酰胺基苯硼酸与乙烯基吡咯烷酮的嵌段共聚物,通过硼酸酯键与HA自组装形成了纳米胶束。调节两种高分子的投料浓度及优化共聚物的链长比例,能够实现对胶束水合粒径的调控。共聚物浓度为7.5 mg/mL、聚合度为40且嵌段分子量比为2时,组装粒子粒径可以控制在73.3~163.9 nm,有利于体内长循环及病灶渗透。研究表明,该纳米粒子具有良好的pH、糖和盐响应性。合成了多重响应的癌细胞靶向聚合物纳米胶束,具有用作抗肿瘤活性药物及探针载体的潜能。

胰岛素/维生素B12-透明质酸纳米粒的制备及口服给药体内外性质的评价

【目的】维生素B12修饰的透明质酸纳米粒口服递送胰岛素的体内外性质评价。【方法】采用二次乳化法制备载胰岛素/维生素B12修饰透明质酸纳米粒(INS/VB12-HA NP),激光粒度分析仪测定纳米粒粒径和分布,反相高效液相法测定纳米粒包封率和载药量;并用人结肠腺癌细胞(Caco-2)单层膜模型体外评价INS/VB12-HA NP的细胞摄取与跨膜转运;以糖尿病模型大鼠降血糖实验评价口服INS/VB12-HA NP的药效。【结果】所制备的INS/VB12-HA NP粒径在185～286 nm之间,PDI小于0.25,包封率在55%左右。细胞摄取实验表明在25～200μg/mL胰岛素浓度范围内和孵育0.5 h后Caco-2细胞对INS/VB12-HA NP的摄取量显著高于胰岛素溶液组。Caco-2细胞单层膜跨膜转运实验中,4 h内跨膜电阻没有明显变化,VB12-HA NP组比对照溶液组有更多的胰岛素跨膜量和更快的跨膜速率。糖尿病大鼠的降糖实验显示,与口服胰岛素溶液相比,纳米粒组均有显著的口服降血糖作用。【结论】VB12修饰的透明质酸纳米粒可促进胰岛素跨过Caco-2细胞单层膜,且对糖尿病大鼠的口服降糖作用优于胰岛素溶液。

自组装形成的透明质酸-铜-槲皮素配位聚合物纳米粒子对乳腺癌的协同治疗作用

目的:探讨自组装形成的具有协同治疗作用的透明质酸-铜-槲皮素配位聚合物纳米粒子(HCQ NP)对乳腺癌的协同治疗作用。方法:采用自组装方法合成HCQ NP,并通过透射电镜、动态光散射、红外光谱分析和电感耦合等离子体质谱对其进行表征;采用亚甲蓝紫外吸收法测定HCQ NP与不同浓度的过氧化氢(H_(2)O_(2))反应生成羟基自由基(·OH)的能力;在模拟肿瘤微环境下,采用CCK-8法分别评价不同浓度的HCQ NP对乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制效果。结果:自组装形成的HCQ NP具有形状类似球形、大小均一的特点,并对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有显著的协同抑制作用。结论:自组装形成的HCQ NP对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有协同抑制作用。

透明质酸修饰的葛根素PEG-PLGA纳米粒的处方工艺优化及其体外评价

目的以乳酸-羟基乙酸共聚物(PEG-PLGA)为载体,优化纳米沉淀法制备透明质酸修饰的葛根素PEG-PLGA纳米粒(HA/Pue-NPs),并对其体外性质进行初步评价。方法以PEG-PLGA为载体材料,透明质酸为表面修饰剂,采用纳米沉淀法制备了透明质酸修饰的HA/Pue-NPs;应用正交实验设计优化处方,对其体外性质进行表征;并采用体外释药行为评价透明质酸修饰HA/Pue-NPs。结果制备出的载药纳米粒外观呈球形,平均粒径、Zeta电位分别为(88.9±2.2)nm、(-21.9±0.54)mV,载药量及包封率分别为6.75%、78.52%。体外释药试验表明,载药纳米粒释药缓慢,24h的累计释放率为65.8%。结论透明质酸修饰的葛根素PEG-PLGA纳米粒粒径大小均一,体外性质良好且具有一定的缓释特性。

紫杉醇甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的制备及性能研究

优化紫杉醇甘草次酸修饰透明质酸(PTX/GA-HA)纳米粒的载药工艺,并系统评价其体内外特性。以载药量、包封率为评价指标,通过单因素考察优化甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的载药工艺。制得的纳米粒粒径为(321.2±8.2)nm,荷负电;载药量和包封率分别为(31.2±0.8)%和(90.3±1.6)%。体外释放动力学研究显示,在偏酸性介质中,PTX/GA-HA纳米粒下具有更快的释药速度。同时,MTT实验显示其对多种肿瘤细胞具有杀伤作用,尤其对HepG2细胞的生长抑制作用最强。此外,细胞摄取实验表明,GA-HA纳米粒易被肿瘤细胞摄取。因此,PTX/GA-HA纳米粒具有优良的体内外特性,其成功制备将有助于提高抗肿瘤药物的肿瘤靶向治疗效果。

pH值响应性透明质酸纳米粒的制备及作为阿霉素载体的研究

通过化学交联法合成组氨酸修饰透明质酸耦合物(His-HA),制备载阿霉素纳米粒,分析其pH值响应性和抗肿瘤特征。研究显示,随着pH值的降低(7.4～5.5),纳米粒的粒径增大(230～780nm),zeta电位升高,载药纳米粒的体外释放量增加。细胞毒性实验显示粒径<300nm的载药纳米粒具更高的毒性。细胞摄入实验表明,阿霉素通过受体介导的胞吞和载药纳米粒的胞外释放两种途径被细胞摄入。以上研究显示组氨酸修饰透明质酸纳米粒具有显著的pH值响应性,具备作为阿霉素药物载体的应用前景。

透明质酸修饰的介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备及在肿瘤化疗-热疗联合治疗中的应用

通过在包覆了金纳米棒的介孔硅表面修饰生物相容性的透明质酸,得到了具有肿瘤靶向性的多功能药物载体.实验结果表明,透明质酸可以通过酰胺键修饰在介孔硅表面,所得药物载体可在透明质酸酶作用下实现选择性释放.该体系在近红外区域具有较高的吸收,可以在近红外光照射下实现光热转换.细胞实验结果表明,该多功能药物载体可以有效靶向CD44过量表达的乳腺癌细胞,通过CD44介导的内吞富集在肿瘤内部,结合化学药物治疗和光热治疗,显示出更高的肿瘤细胞凋亡效率.

胰岛素巯基化透明质酸纳米粒的制备与体外性质评价

目的制备胰岛素巯基化透明质酸纳米粒(insulin thiolated hyaluronic acid nanoparticles,Ins-HA-Cys-NPs),考察纳米粒的理化性质。方法以合成的具有生物黏附性质的巯基化透明质酸作为载体,采用超声乳化法制备纳米粒,考察其外观、粒径、Zeta电位、包封率、载药量,并进行其冻干制剂的冻干保护剂筛选。结果制备的Ins-HA-Cys-NPs粒径均一,外观圆整;平均粒径为(178.5±0.8)nm,PDI为(0.214±0.013),Zeta电位为-(38.47±0.46)mV,超滤离心法测定载药纳米粒的包封率为(48.85±0.66)%,载药量为(4.79±0.13)%;选择10%的甘露醇为冻干保护剂,复溶后得到具有蓝色乳光的粒径均一的纳米粒混悬液。结论巯基化透明质酸纳米粒是蛋白多肽类药物口服给药的潜在载体,为下一步研究胰岛素纳米粒在大鼠体内药效、药动学研究提供前提和基础。

透明质酸/聚酰胺-胺三元纳米基因复合物的构建及其体外评价

目的在聚酰胺-胺(polyamidoamine,PAMAM)树状大分子与DNA形成复合物的基础上添加透明质酸(hy-aluronic acid,HA)形成三元纳米复合物,研究其基因递送性能的改变。方法配制不同电荷比的三元纳米复合物,测定其粒径和电位;选择MCF-7和MDA-MB-231细胞进行转染效率的测定,选择B16和MCF-7细胞进行细胞毒性的测定。结果和结论形成的三元纳米复合物大小均一,结构稳定。与单纯的PAMAM载体相比,增加HA提高了转染效率,降低了细胞毒性,适合用于基因的递送和转染。

透明质酸修饰的地塞米松核壳纳米粒的制备及表征

探讨透明质酸修饰的地塞米松核壳纳米粒的制备方法,并对其理化性质及释药行为等进行考察。首先采用薄膜分散水化-挤膜法制备核壳纳米粒(LCS-NPs),单因素研究多种处方组成对LCS-NPs性质的影响。随后用透明质酸(HA)与二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)的键合物(HA-DOPE)修饰LCS-NPs,制得HA-LCS-NPs。采用粒度仪和投射电镜分别考察HA-LCS-NPs的粒径、电位、微观形态和结构组成。以地塞米松为模型药物,考察载药HA-LCS-NPs的包封率和体外释药行为。HA-LCS-NPs在透射电镜下呈现清晰的核壳结构,平均粒径为(189±10.3)nm。HA-LCS-NPs对地塞米松的包封率和载药量分别为27.4%和5.9%,72 h累积释放率低于40%。结果表明,薄膜分散水化-挤膜法制备的LCS-NPs经HA-DOPE修饰,可得到具有明显核壳结构的纳米载体,并实现有效的药物包裹和良好的缓释特征。

载腺嘌呤甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的制备及其对肝癌细胞增殖的影响

目的以甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)修饰的透明质酸(hyaluronic acid,HA)为载体,腺嘌呤(adenine,Ade)为模型药物,制备Ade/GA-HA纳米粒,并分析其理化性质及其对肝癌细胞增殖的影响。方法通过化学交联法将GA与HA连接,透析、冷冻干燥得到GA-HA纳米粒,采用超声波分散法制备Ade/GA-HA纳米粒。利用激光粒度仪、透射电镜、紫外/分光光度计、高效液相色谱仪对纳米粒的粒径、形态、载药量、包封率、体外释放性能初步考察。采用MTT法检测Ade/GA-HA纳米粒对Bel-7402细胞增殖的影响。结果GA的取代度为3.8%,GA-HA纳米粒呈球形,粒径为398.1 nm,分散度良好,Zeta电位为-34.2 m V,粒度稳定性良好;Ade/GA-HA的载药量为(22.5±5.8)%,包封率为(87.27±0.33)%;在前4 h内,Ade/GA-HA纳米粒存在突释现象;4 h后,表现出缓释特性。与游离Ade相比,Ade/GA-HA纳米粒对Bel-7402细胞增殖抑制作用更强,差异有统计学意义。结论 GA-HA纳米粒具有良好的理化性质,符合设计要求。

替加氟透明质酸纳米粒的制备

采用透明质酸为原料,以己二酰肼为交联剂、EDCI为催化剂,制备了透明质酸纳米粒,并用做抗肿瘤药物替加氟的载体。红外光谱法确定了透明质酸纳米粒官能团的变化反应。采用激光粒度测定仪测定了纳米粒的粒径和zeta电位。结果表明,本方法制备的透明质酸纳米粒的平均粒径为218.3±41.38 nm,zeta电位为-24.0±7.48 m V。替加氟在透明质酸纳米粒的包封率为92.1%。

石杉碱甲聚乳酸-乙醇酸纳米粒的制备、表征及其小鼠活体成像脑靶向分布

目的制备石杉碱甲(HupA)聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)纳米粒,并研究其分布特性。方法以PLGA为载体材料,采用乳化溶剂挥发法,正交实验优化HupA-PLGA纳米粒的制备工艺;透射电子显微镜观察纳米粒形态;激光粒度仪测定平均粒径、粒径分布和Zeta电位;HPLC法测定纳米粒的包封率;并通过小动物活体荧光成像实验对纳米粒在小鼠体内的分布特性进行研究。结果优化条件下制备的纳米粒呈圆形,大小较为均一,平均粒径为(46.49±1.37)nm,多分散指数值为0.31±0.01,Zeta电位为(-38.3±1.56)mV,包封率为(28.45±1.52)%,且工艺重现性好。小动物活体成像实验结果表明该纳米粒可以通过血脑屏障到达脑组织,且具有很好的缓释作用。结论以PLGA为载体的HupA纳米粒具有较小的粒径、良好的缓释性能并能提高脑内药物浓度水平。

载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸PEG-PLGA纳米粒子的制备与应用

【目的】以生物可降解材料聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PEG-PLGA)制备载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸的纳米粒子(TFO-NPs),并初步探讨其对前列腺癌LNCaP细胞的生长抑制作用。【方法】采用改良自乳化溶剂挥发法(modified-SESD)制备TFO-NPs,对其形态、包封率、载药量及体外释放特点进行鉴定。倒置荧光显微镜观察LNCaP细胞对TFO-NPs的摄取情况,四唑盐(MTT)法测定体外细胞毒作用。【结果】制备的TFO-NPs呈球形、大小均匀,平均粒径128nm,平均包封率和载药量分别为72.28%和1.02%,在体外具有缓释作用。LNCaP细胞对TFO-NPs的摄取率显著高于裸TFO。TFO-NPs对LNCaP细胞的抑制作用明显强于裸TFO(P<0.05),抑制率分别为61.2%±6.5%和20.7%±3.1%。【结论】本法制备的TFO-NPs理化性质优良,在体外能够有效抑制LNCaP细胞的增殖。

葛根素纳米粒的制备工艺研究

目的:考察苯硼酸化壳聚糖载葛根素纳米粒(PBACS-TPP-Pur-NPs)的处方及其制备工艺。方法:采用离子凝胶化法制备PBACS-TPP-Pur-NPs,以粒径、PDI、电位、包封率、载药量为评价指标,考察的因素主要包括3-羧基苯硼酸化壳聚糖(PBACS)的取代度、PBACS的浓度、三聚磷酸钠(TPP)的浓度、PBACS的pH、搅拌转速和搅拌时间。筛选出最优处方工艺,并对优化所得纳米粒的基本性质和体外释药性能进行表征评价。结果:制备PBACS-TPP-Pur-NPs的最佳处方工艺为PBACS浓度为1.5 mg/mL,TPP浓度为1.4 mg/mL,PBACS的pH为5.5,搅拌转速为390.0 r/min,搅拌时间为30 min。优化所得的PBACS-TPP-Pur-NPs粒径适中均一、载药能力强、稳定性良好、具有明显的缓释特征。结论:该方法有效可行,适用于优化葛根素纳米粒的处方与制备工艺,为葛根素纳米制剂的开发提供稳定基础。

透明质酸纳米给药载体的研究进展

透明质酸(hyaluronic acid,HA)是一种天然多糖,具有无毒性、无免疫原性、无致炎性、生物相容性好、生物可降解等诸多优点,同时还具有靶向性,在药物载体领域广泛应用。本文综述了各种HA纳米给药载体的合成、物理化学特点和生物学性质,重点阐述了其体外靶向能力和体内分布,展望了其发展趋势和应用前景。