电针对负透镜诱导型近视豚鼠视网膜M1受体表达的影响

目的探讨电针对负透镜诱导型近视豚鼠视网膜中毒蕈碱样乙酰胆碱M1受体表达的影响。方法 48只3周龄豚鼠随机分为4组:正常对照组、近视模型组、近视电针组与近视假穴组,后3组豚鼠右眼配戴-10.00 D透镜片,建立透镜诱导型近视豚鼠动物模型,近视电针组戴镜同时给予针刺豚鼠的合谷穴和太阳穴,近视假穴组针刺臀部无穴位处。于造模前及造模后4周测量各组眼轴长度和屈光度,同时取视网膜组织,利用RT-PCR的方法检测各组豚鼠视网膜中M1受体mRNA的相对表达量,ELISA法检测M1受体的蛋白含量。结果造模4周后,近视模型组右眼屈光度为(-3.40±0.55)D,明显低于正常对照组右眼的(1.20±0.24)D和自身对照眼左眼的屈光度(1.25±0.32)D(均为P<0.05);近视模型组右眼眼轴长度为(8.74±0.38)mm,明显大于正常对照组的右眼眼轴长度(8.23±0.21)mm,也大于自身对照眼左眼的眼轴长度(8.16±0.43)mm(均为P<0.05);近视模型组、近视电针组和近视假穴组右眼的眼轴长度和屈光度比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。正常对照组、近视模型组、近视电针组、近视假穴组视网膜中M1受体的mRNA相对表达量分别为59.17±4.02、74.50±4.64、64.83±6.05和74.67±3.93,M1受体蛋白含量分别为(984.67±44.69)ng·L-1、(1172.00±41.91)ng·L-1、(1027.00±41.08)ng·L-1和(1153.50±56.40)ng·L-1,统计学分析显示正常对照组与近视电针组相比差异无统计学意义(P>0.05),两组分别与近视模型组和近视假穴组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论负透镜诱导型近视豚鼠视网膜中M1受体表达增高,针刺合谷穴和太阳穴可以减少其视网膜中M1受体表达,这可能是针刺改善近视患者远视力的机制之一。

透镜诱导型近视肾阳虚豚鼠巩膜MMP-2及其抑制剂TIMP-2的表达

目的探讨负透镜诱导型近视肾阳虚豚鼠巩膜基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及其抑制剂基质金属蛋白酶-2抑制剂(tissure inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)的表达。方法选取72只3周龄雄性英国种三色短毛豚鼠,随机分为正常对照组、戴镜组和肾阳虚+戴镜组,每组各24只。肾阳虚+戴镜组每日腹腔注射氢化可的松注射液,剂量10 mg·kg-1,正常对照组和戴镜组则给予等量生理盐水,每天1次,连续2周。第3周起,戴镜组、肾阳虚+戴镜组右眼均戴-10.0 D透镜,戴镜2周,正常对照组不作任何干预。戴镜前后分别进行眼轴长度及屈光度的测量;SYBRgreen I实时荧光定量PCR检测后极部巩膜MMP-2及TIMP-2 mRNA的表达变化;ELISA和免疫组织化学检测后极部巩膜MMP-2及TIMP-2蛋白表达的变化。结果与正常对照组比较,戴镜组右眼近视屈光度增高(t=18.760,P=0.000),眼轴延长(t=-2.709,P=0.013),后极部巩膜MMP-2 mRNA及蛋白表达明显增加(t=-2.134,P=0.045;t=-6.315,P=0.000),TIMP-2 mRNA及蛋白表达明显降低(t=4.637,P=0.000;t=6.062,P=0.000)。与戴镜组比较,肾阳虚+戴镜组右眼近视屈光度增高(t=3.026,P=0.006),眼轴更长(t=-2.144,P=0.044),后极部巩膜MMP-2 mRNA及蛋白表达均增加(t=-4.094,P=0.001;t=-6.291,P=0.000),TIMP-2mRNA及蛋白表达均降低(t=5.524,P=0.000;t=3.951,P=0.001)。结论在负透镜诱导下,肾阳虚豚鼠较正常豚鼠近视程度更加严重,肾阳虚体质与近视的发生发展可能有密切联系。

豚鼠透镜诱导型近视视网膜色素上皮细胞钙离子的研究

目的激光扫描共焦显微镜(LSCM)检测豚鼠透镜诱导型近视模型视网膜色素上皮(RPE)细胞中Ca2+,探讨Ca2+在近视发病中的作用机制。方法取2周龄豚鼠10只,选取1只眼用-10.00D凹透镜诱导成近视模型为实验眼,对侧眼为对照眼。实验前后测各组豚鼠屈光度及眼轴长度(AL)。原代培养豚鼠眼球赤道前部及后极部RPE细胞,用角蛋白、波形蛋白、结蛋白、S-100抗体进行免疫细胞化学检测对培养细胞进行鉴定。对各组豚鼠眼赤道前部及后极部RPE细胞进行Fluo-3/AM负载,利用LSCM测定细胞中Ca2+的变化。结果豚鼠经过45d的透镜诱导,形成(-6.70±1.93)D的相对近视,AL延长了(1.53±0.31)mm,与诱导前的屈光度和AL相比,差异均有统计学意义(F=10.97,P<0.05;F=-15.64,P<0.05)。实验眼前部和后极部RPE细胞Ca2+的荧光强度明显高于对照眼,差异有统计学意义(P<0.05),而实验眼和对照眼各自前部和后极部的RPE细胞Ca2+的荧光强度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在实验性近视形成过程中,RPE细胞中Ca2+浓度增高。

电针干预后透镜诱导型近视豚鼠巩膜形态改变及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和脯氨酰羟化酶2(PHD-2)表达的变化

目的探讨电针干预后透镜诱导型近视(LIM)豚鼠巩膜形态变化及巩膜中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和脯氨酰羟化酶2(PHD-2)表达变化。方法将90只2周龄豚鼠随机分为正常对照(NC)组、LIM组和电针+透镜诱导型近视(LIM+EA)组,每组30只。NC组正常饲养,不干预;LIM组和LIM+EA组豚鼠右眼配戴-6.0 D透镜片,建立近视模型;LIM+EA组戴镜同时给予针刺合谷穴和太阳穴30 min。造模后2周和4周测量各组豚鼠的屈光度和眼轴长度,同时通过实时荧光定量PCR(q-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组豚鼠巩膜中HIF-1α和PHD-2的mRNA相对表达及蛋白含量。另外,于造模后4周利用电镜观察各组豚鼠巩膜超微结构变化。结果造模后2周和4周,与NC组(2.20±0.48)D、(1.63±0.41)D;(8.22±0.03)mm、(8.40±0.04)mm相比,LIM组(-4.23±0.43)D、(-5.88±0.49)D;(8.36±0.05)mm、(8.57±0.06)mm和LIM+EA组(-3.63±0.49)D、(-2.55±0.48)D;(8.32±0.03)mm、(8.51±0.03)mm豚鼠右眼屈光度均增加,眼轴均延长(均为P<0.05);与LIM组相比,LIM+EA组豚鼠右眼屈光度均减小,眼轴延长均减慢(均为P<0.05)。电镜观察结果显示,与NC组(82.94±26.03)nm相比,LIM组(48.90±23.38)nm和LIM+EA组(62.83±21.72)nm豚鼠巩膜胶原纤维直径变小(均为P<0.05);与LIM组相比,LIM+EA组巩膜胶原纤维直径变大(P<0.05)。q-PCR及ELISA检测结果表明,造模后2周和4周,与NC组相比,LIM组后极部巩膜HIF-1αmRNA和蛋白表达水平均增加(均为P<0.05),PHD-2 mRNA和蛋白表达水平均下降(均为P<0.05);与LIM组相比,LIM+EA组巩膜HIF-1αmRNA和蛋白表达水平均显著下降(均为P<0.05),PHD-2 mRNA和蛋白表达水平均上升(均为P<0.05)。结论电针干预近视豚鼠可影响巩膜胶原纤维直径及HIF-1α和PHD-2的表达水平,进而延缓近视的发展。

电针对透镜诱导型近视豚鼠脉络膜血流和内皮素-1及其受体表达的影响

目的:观察透镜诱导型近视豚鼠脉络膜毛细血管密度的变化,探讨脉络膜内皮素-1(ET-1)、内皮素受体A(ETAR)及受体B(ETBR)的表达变化及电针治疗机制。方法:将54只豚鼠随机分为正常对照组(NC组)、透镜诱导组(LIM组)和电针+透镜诱导组(LIM+EA组)。NC组正常饲养,不干预;LIM组和LIM+EA组右眼配戴-6.00D透镜片,建立近视模型。造模2、4wk测量各组豚鼠屈光度、眼轴和脉络膜毛细血管密度,实时荧光定量PCR(q-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组化检测各组脉络膜ET-1、ETAR和ETBR mRNA及蛋白表达水平。结果:造模2、4wk后,与NC组相比,LIM组和LIM+EA组近视屈光度和眼轴均增加(均P<0.001);LIM+EA组与LIM组相比,屈光度和眼轴均减小(均P<0.05)。造模2、4wk后,与NC组相比,LIM组脉络膜毛细血管密度均降低(P<0.001),脉络膜ET-1、ETAR及ETBR mRNA和蛋白水平均增加(均P<0.05);而LIM+EA组与LIM组相比,脉络膜毛细血管密度升高(P<0.01),脉络膜ET-1、ETAR及ETBR mRNA和蛋白水平均降低。结论:在透镜诱导型近视豚鼠中,随着屈光度和眼轴的增长脉络膜血流减少,而电针可能通过神经调控改善了脉络膜的血流,影响了血管剪切力,下调ET-1及其受体含量以延缓近视的发生发展。

电针对负透镜诱导型近视豚鼠睫状肌中表皮生长因子及其受体表达的作用

目的观察表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)及其受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)经电针干预后在近视豚鼠睫状肌中的表达变化,探讨其在近视发生发展中的作用。方法将90只2周龄健康三色短毛豚鼠随机分为正常对照(normal control,NC)组、透镜诱导型近视(lens-induced myopia,LIM)组和透镜诱导型近视电针(lens-induced myopia+electroacupuncture,LIM+EA)组,每组各30只。NC组豚鼠正常饲养,不做任何干预;LIM组和LIM+EA组豚鼠右眼均戴-6 D透镜诱导近视,左眼作为自身对照不做任何处理;LIM+EA组豚鼠在戴镜同时选取双侧太阳穴、合谷穴进行电针干预。各组豚鼠造模后2周、4周进行屈光度和眼轴长度的检测,分别制备组织病理切片观察睫状肌的形态;通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,q-PCR)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组豚鼠睫状肌中EGF mRNA、EGFR mRNA及其蛋白表达水平。结果造模后2周、4周,LIM组和LIM+EA组造模眼分别与自身对照眼及NC组右眼相比,近视屈光度均增加,眼轴均延长,LIM+EA组造模眼较LIM组造模眼近视屈光度减小,眼轴延长减缓,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。病理检测结果显示,NC组睫状肌纤维完整、排列有序;LIM组睫状肌纤维断裂、溶解,排列混乱;LIM+EA组睫状肌纤维相对完整,排列有序。q-PCR及ELISA检测结果表明,LIM组右眼睫状肌中EGF mRNA、EGFR mRNA及其蛋白表达水平与NC组和LIM+EA组相比均明显降低(均为P<0.05),而LIM+EA组和NC组EGF mRNA、EGFR mRNA及其蛋白表达水平差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论电针干预近视豚鼠可影响睫状肌中EGF和EGFR的表达水平并能延缓近视发展。

玻璃体内注射双调蛋白抗体对透镜诱导型近视豚鼠屈光度、眼轴长度及视网膜中双调蛋白表达的影响

目的探讨双调蛋白(amphiregulin,AREG)对透镜诱导型近视豚鼠屈光度、眼轴长度以及视网膜中AREG蛋白和mRNA表达的影响。方法选取2周龄健康英国三色短毛豚鼠30只,随机分为正常对照组、近视组、AREG低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组各6只。除正常对照组外,其余组均右眼配戴-10.0 D透镜,左眼作为自身对照与正常对照组均不做任何处理,戴镜2周后分别测量各组的屈光度及眼轴长度。第3周开始,近视组豚鼠右眼玻璃体内注射Linger注射液3μL,低剂量组、中剂量组、高剂量组豚鼠右眼分别注射500 mg·L-1AREG抗体(R&D:MAB989-500)1μL、2μL、3μL,对侧眼作为自身对照,不做任何处理,每周注射1次,连续注射3周,期间继续配戴眼镜,3周后分别测量各组豚鼠的屈光度和眼轴长度。采用免疫荧光标记法检测豚鼠视网膜AREG蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测豚鼠视网膜AREG mRNA的表达。结果入组前各组豚鼠的初始屈光度及眼轴长度差异均无统计学意义(均为P>0.05);与正常对照组相比,透镜诱导2周后近视组、低剂量组、中剂量组、高剂量组豚鼠右眼屈光度下降,眼轴延长(均为P<0.05);各组左眼屈光度和眼轴长度差异均无统计学意义(均为P>0.05)。玻璃体内注射AREG抗体3次后,与近视组相比,低剂量组屈光度和眼轴长度差异均无统计学意义(均为P>0.05);中剂量组屈光度差异无统计学意义(P>0.05),但眼轴缩短,差异有统计学意义(P<0.01);高剂量组屈光度上升且眼轴缩短,差异均有统计学意义(均为P<0.05);各组对侧眼的屈光度和眼轴长度差异均无统计学意义(均为P>0.05)。免疫荧光标记法在各组豚鼠眼球后极部、赤道部以及后极部与赤道部之间的视网膜均检测到AREG蛋白,说明AREG主要分布在眼球视网膜组织,且无部位特异性。AREG蛋白在近视组豚鼠视网膜高表达,正常对照组低表达,玻璃体内注射AREG抗体后低剂量组、中剂量组和高剂量组AREG蛋白表达逐渐下降。将正常对照组视网膜AREG mRNA表达量标准化为100%,近视组、低剂量组、中剂量组、高剂量组右眼AREG mRNA表达量分别与标准化后的正常对照组比较得到目的基因的相对表达量。近视组AREG mRNA相对表达量最高,正常对照组其次,低剂量组、中剂量组和高剂量组AREG mRNA的表达呈剂量依赖性下降。结论玻璃体内注射AREG抗体后,豚鼠眼轴缩短,屈光度增加,视网膜中AREG蛋白和mRNA呈剂量依赖性表达下降。AREG在近视发生发展过程中起重要作用。

电针干预对透镜诱导型近视豚鼠睫状肌中MMP-3、TIMP-3及Col3α1表达的影响

目的探讨电针干预对透镜诱导型近视豚鼠睫状肌中基质金属蛋白酶(MMP)-3、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-3和III型胶原α1(Col3α1)表达的影响。方法2周龄三色豚鼠90只随机分为正常对照(NC)组、透镜诱导型近视(LIM)组以及LIM+电针干预(LIM+EA)组;其中,NC组豚鼠不作任何干预,LIM组和LIM+EA组豚鼠右眼均配戴-6.00 D透镜作为造模眼,左眼不戴镜作为自身对照;LIM+EA组豚鼠右眼戴镜的同时在太阳、合谷穴给予电针刺激。各组豚鼠于造模后1周、2周和4周均进行屈光度和眼轴长度测量,制备病理组织切片观察各组豚鼠睫状肌的形态变化,并应用q-PCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组豚鼠睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1的mRNA及蛋白表达。结果造模后1周、2周和4周,与NC组相比,LIM组豚鼠造模眼与自身对照眼近视屈光度和眼轴长度的差值均显著增加(均为P<0.001);与LIM组相比,LIM+EA组造模眼与自身对照眼近视屈光度和眼轴长度的差值均减小(均为P<0.05)。病理组织切片结果发现,NC组豚鼠睫状肌纤维排列均匀、紧密有序;LIM组豚鼠睫状肌纤维排列松散混乱、有机纤维溶解断裂;LIM+EA组豚鼠睫状肌纤维排列相较于LIM组更为有序,相对完整。q-PCR和ELISA检测结果显示,造模后1周和2周,与NC组相比,LIM组豚鼠造模眼睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1 mRNA及蛋白相对表达水平均明显升高(均为P<0.05);与LIM组相比,LIM+EA组豚鼠造模眼睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1 mRNA及蛋白相对表达水平均明显下降(均为P<0.05)。造模后4周,与NC组相比,LIM组豚鼠造模眼睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1 mRNA及蛋白相对表达水平均降低(均为P<0.05);与LIM组相比,LIM+EA组豚鼠造模眼睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1 mRNA及蛋白相对表达水平均升高(均为P<0.05)。结论近视发展初期,电针干预可显著下调透镜诱导型近视豚鼠睫状肌中MMP-3、TIMP-3和Col3α1的表达,明显延缓近视的发生发展。

电针干预对透镜诱导型近视豚鼠视网膜和视皮层中BDNF、NGF及AchE表达的影响

目的探讨电针干预对透镜诱导型近视(LIM)豚鼠视网膜和视皮层中脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)及乙酰胆碱酯酶(AchE)表达变化的影响。方法将90只2周龄雄性豚鼠随机分为正常对照(NC)组、LIM组和LIM+电针治疗(LIM+EA)组。NC组豚鼠正常饲养,不进行干预;LIM组和LIM+EA组豚鼠右眼均配戴-6.0 D镜片,左眼作为自身对照建立近视模型;LIM+EA组豚鼠在戴镜的同时在太阳穴和合谷穴给予电针干预治疗。造模2周和4周后测量各组豚鼠的屈光度和眼轴长度,并应用qPCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组豚鼠视网膜和视皮层中BDNF、NGF和AchE的mRNA及蛋白相对表达水平;AchE测试盒检测各组豚鼠视网膜和视皮层中AchE活力。结果造模2周和4周后,LIM组豚鼠造模眼(右眼)与自身对照眼(左眼)的差值与NC组相比,近视屈光度和眼轴长度均显著增加(均为P<0.01);LIM+EA组豚鼠造模眼与自身对照眼的差值与LIM组相比,屈光度减小,眼轴增长减缓(均为P<0.05)。qPCR和ELISA检测结果显示,造模2周和4周后,LIM组豚鼠右眼视网膜和视皮层中BDNF和NGF mRNA、蛋白表达与NC组相比均明显降低,而AchE mRNA、蛋白表达均明显升高(均为P<0.05);LIM+EA组豚鼠右眼视网膜和视皮层中BDNF和NGF mRNA、蛋白表达与LIM组相比均明显升高,而AchE mRNA、蛋白表达均明显降低(均为P<0.05)。AchE活力检测结果显示,造模2周和4周后,LIM组豚鼠右眼视网膜和视皮层中AchE活力与NC组相比均明显升高(均为P<0.01);LIM+EA组豚鼠右眼视网膜和视皮层中AchE活力与LIM组相比,均明显降低(均为P<0.01)。结论近视豚鼠视网膜和视皮层中BDNF、NGF的表达水平降低,AchE的表达水平升高。电针干预近视豚鼠可明显提高BDNF、NGF的表达水平,降低AchE的表达水平,从而延缓近视的发生发展。

电针对负透镜诱导型近视豚鼠视网膜中Basigin及RdCVF表达的调控作用

目的检测基质金属蛋白酶诱导因子(basigin,Bsg)和视杆细胞源性视锥细胞生长因子(rod-derived cone viability factor,RdCVF)经电针干预后在近视豚鼠视网膜中的表达变化,探讨其在近视发生发展中的作用。方法将45只2周龄雄性(110~120 g)豚鼠随机分为正常对照(normal control,NC)组、透镜诱导型近视(lens-induced myopia,LIM)模型组和透镜诱导+电针(lens-induced myopia+electroacupuncture,LIM+EA)干预组。NC组豚鼠正常饲养,不做任何干预;LIM组和LIM+EA组豚鼠右眼均配戴-6.0 D镜片以建立近视模型,左眼作为自身对照不做任何处理;同时,LIM+EA组豚鼠在戴镜同时每日给予针刺合谷穴和太阳穴干预处理。各组豚鼠干预2周和4周时测量各组豚鼠的屈光度和眼轴长度,并分别制备组织病理切片观察视网膜的形态;同时通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,Q-PCR)和酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组豚鼠视网膜中Bsg和RdCVF mRNA及蛋白表达水平。结果造模2周和4周后,与NC组[2周(3.00±0.62)D,(8.21±0.03)mm;4周(2.35±0.43)D,(8.32±0.03)mm]相比,LIM组[2周(-4.00±0.46)D,(8.38±0.05)mm;4周(-4.95±0.63)D,(8.57±0.04)mm]和LIM+EA组[2周(-2.06±0.48)D,(8.28±0.02)mm;4周(-2.50±0.61)D,(8.43±0.05)mm]豚鼠右眼屈光度均增加,眼轴延长(均为P<0.05)。与LIM+EA组相比,LIM组豚鼠右眼屈光度均增加,眼轴延长(均为P<0.05)。病理学检测结果显示,NC组豚鼠视网膜组织各层分界明显,结构清晰、完整,排列整齐;LIM组豚鼠视网膜整体结构变薄,排列不规则,各层出现细胞数目减少;LIM+EA组豚鼠视网膜整体结构有明显改善,排列相对规则完整,细胞数量增加。Q-PCR及ELISA检测结果表明,造模2周和4周后,与NC组比较,LIM组视网膜Bsg和RdCVF mRNA及蛋白水平均增加(均为P<0.05);与LIM+EA组相比,LIM组视网膜Bsg和RdCVF mRNA及蛋白水平显著增加(均为P<0.05)。结论近视豚鼠视网膜中的Bsg和RdCVF的表达水平显著升高,与近视的发生发展有关;电针干预可明显降低近视豚鼠视网膜中Bsg和RdCVF的表达水平,并能延缓近视发展。

养眼方对透镜诱导型豚鼠眼部结构的影响

目的:观察养眼方对透镜诱导型近视豚鼠眼部结构的影响。方法:将3周龄英国三色短毛豚鼠随机分为空白对照组、近视造模组、养眼方干预组,每组10只。除空白对照组外,近视造模组、养眼方干预组右眼行-8.00 D透镜诱导。养眼方干预组每日灌胃养眼方混悬液(2 mL/200 g),药物浓度(0.126 g/mL);空白对照组和近视模型组灌胃等量的生理盐水(2 mL/200 g)。分别于干预前、干预第2、4周测量豚鼠右眼屈光度和眼轴长度。干预4周后处死豚鼠,取所有豚鼠右眼进行检测,利用光学显微镜和投射电镜对视网膜、巩膜的形态学和超微结构特征进行评价。结果:养眼方干预组可控制近视度数及眼轴长度的增长,相较于近视造模组有统计学差异(P<0.01)。负透镜诱导4周后,近视造模组豚鼠巩膜明显变薄,视网膜神经节细胞及膜盘排列紊乱、巩膜成纤维细胞出现溶解,密度明显降低;养眼方组巩膜厚度略薄,但成纤维细胞排列致密、无溶解。结论:养眼方具有延缓实验性近视发展的作用,可改善豚鼠近视眼底视网膜及巩膜的形态学结构,为养眼方在近视防控的研究中提供初步依据。

中药养眼牛奶对透镜诱导型豚鼠近视化发育的影响

目的观察中药养眼牛奶对抑制透镜诱导型豚鼠近视发生发展的疗效,为临床推广提供理论依据。方法选取3周龄豚鼠55只,均分为5组:除空白组外,每组豚鼠右眼予以-8.00D凹透镜诱导近视,每日分别予以中药养眼牛奶、普通牛奶、养眼方、生理盐水各2mL灌胃。分别在干预前、第2、4周测量5组屈光度及眼轴长度。结果干预4周后5组间眼轴长度与屈光度比较有显著差异(P<0.01);与空白组相比,其余4组近视度数不同程度增高,眼轴长度增长(P<0.05);中药养眼牛奶组近视度数及眼轴长度增长均低于其余3组(P<0.05)。结论中药养眼牛奶组与中药组、普通牛奶组均可明显延缓豚鼠实验性近视化发育,在控制眼轴及屈光度方面,中药养眼牛奶组优于中药组,中药组优于普通牛奶组(P<0.01)。

MFN1在透镜诱导豚鼠近视模型视网膜上的表达及其意义

目的建立豚鼠光学离焦近视动物模型,初步探索线粒体融合蛋白1(mitochondrial fusion protein 1,MFN1)在光学离焦豚鼠近视动物模型视网膜上的表达。方法给15只4周龄幼年豚鼠单眼配戴-7.00 D凹透镜,制作光学离焦性豚鼠近视模型,戴透镜眼作为实验眼,另一眼为自身对照眼。戴镜前及戴镜后1周、2周、3周分别进行检影验光和眼轴长度检查,同时于各时间点分别随机处死5只豚鼠,采用免疫组织化学染色检测视网膜中MFN1的表达,双眼眼球参数检查结果比较采用t检验,对免疫组织化学检查结果做描述定性分析。结果屈光度:豚鼠戴镜前屈光状态均为远视状态,实验眼和对照眼屈光度差异无统计学意义(P>0.05);用-7.00 D凹透镜经1周、2周、3周光学离焦可以造成豚鼠远视屈光度数逐渐下降,戴镜后1周两组比较差异无统计学意义(P=0.380);戴镜后2周及3周实验眼与对照眼比较,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。眼轴长度:戴镜前豚鼠双眼眼轴长度比较,差异无统计学意义(P>0.05);戴镜后1周、2周、3周对照眼和实验眼的眼轴均较戴镜前明显延长,实验眼与对照眼的眼轴长度比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。免疫组织化学检测结果:双眼视网膜均可见部分视网膜神经节细胞胞浆及胞膜呈黄色或棕黄色着色,但实验眼免疫阳性细胞着色较深,阳性细胞数相对较多;早期豚鼠近视动物模型视网膜上MFN1阳性表达主要见于视网膜神经节细胞,随着透镜诱导时间的延长,MFN1在视锥视杆细胞中也出现表达,而对照眼无此现象。结论采用-7.00 D凹透镜能成功诱导光学离焦豚鼠近视动物模型,豚鼠视网膜上可见MFN1表达,随着透镜诱导时间的延长,表达强度和部位逐渐发生变化,提示MFN1可能在近视的发生发展过程中起着一定的作用。

红景天苷对近视豚鼠脉络膜厚度及HIF-1α和多巴胺及其受体表达的影响

目的:探讨红景天苷(SA)对透镜诱导型近视(LIM)豚鼠脉络膜厚度及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、多巴胺及其D1受体表达的影响。方法:将18只2周龄豚鼠随机分为正常对照(NC)组、LIM组和透镜诱导型近视+红景天苷(LIM+SA)组,每组6只。NC组正常饲养,给予2mL/d生理盐水灌胃;LIM组豚鼠右眼前配戴-5D透镜,建立近视模型,给予2mL/d生理盐水灌胃;LIM+SA组豚鼠右眼前配戴-5D透镜同时给予2mL/d红景天苷(100mg/kg)灌胃。造模4wk后测量各组豚鼠右眼屈光度、眼轴长度及脉络膜厚度,通过实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫组织化学(IHC)检测各组豚鼠右眼脉络膜视网膜HIF-1α mRNA及蛋白表达量,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)和Western blot法检测多巴胺浓度及其D1受体表达量。结果:造模4wk后,与NC组比较,LIM组和LIM+SA组豚鼠右眼屈光度均负向增加,眼轴均延长,脉络膜厚度均减小,脉络膜视网膜HIF-1α mRNA和蛋白表达量均增加,多巴胺浓度及其D1受体表达量均降低;与LIM组比较,LIM+SA组豚鼠右眼近视屈光度明显减小,眼轴长度较短,脉络膜厚度增加,脉络膜视网膜HIF-1α mRNA和蛋白表达量均降低,多巴胺浓度及其D1受体表达量均增加。结论:红景天苷干预近视豚鼠可通过影响脉络膜厚度及HIF-1α、多巴胺及其D1受体的表达延缓近视进展。