连翘挥发油纳米胶束对其水溶性成分连翘苷体外透皮、透黏膜吸收的影响

目的:采用纳米胶束增溶技术制备同时含有脂溶性挥发油与水溶性成分连翘苷(PN)等的全成分载药液体制剂,并考察连翘挥发油纳米胶束对水溶性成分PN体外透皮、透黏膜吸收的影响。方法:采用双提法提取连翘的挥发油与水溶性成分,并用GC-MS测定挥发油的主要成分;再将挥发油以纳米胶束的形式增溶于水溶性药液中制备全成分载药液体制剂(ACLL),采用透射电镜(TEM)、光子相关光谱仪(PCS)与激光共聚焦显微镜(CLSM)考察挥发油纳米胶束的药剂学性质;用高效液相色谱法测定PN含量,采用水平双室扩散池法考察连翘挥发油纳米胶束对PN体外透皮、透黏膜吸收的影响,并与连翘水溶性药液(HCLL)进行对照。结果:连翘挥发油的主要成分为β-蒎烯(49.01%)、α-蒎烯(15.78%)、β-罗勒烯(13.79%)、芳樟醇(5.91%)、α-侧柏烯(2.07%)、β-香叶烯(1.91%)与异松油烯(1.84%)等萜烯类混合物;挥发油胶束为圆球形,粒径为193.3 nm,Zeta电位为-83.8 m V;连翘药液为澄清透明的棕褐色液体,其中PN含量为0.225 mg/m L。实验表明,ACLL组的PN在整个透皮、透黏膜实验过程中的累积透过量始终高于HCLL;7.0 h时,对于透皮给药实验ACLL组PN累积透过量是HCLL组的2.04倍,透黏膜给药实验ACLL组PN累积透过量是HCLL组的1.16倍。结论:连翘挥发油纳米胶束能够促进水溶性成分PN的透皮、透黏膜吸收,体现了其全成分作用的优势,在一定程度上也阐明了中药全成分发挥协同作用的机理之一。

磷脂纳米囊泡的制备工艺及透黏膜能力

目的对比研究磷脂纳米囊泡的制备工艺,并以胰岛素为模型药物,研究了胰岛素磷脂纳米囊泡透口腔黏膜的能力。方法分别采用超声波法、高剪切法、高压匀质法制备磷脂纳米囊泡,用激光散射法研究了不同工艺条件对磷脂纳米囊泡粒径和多分散指数的影响;采用离体透黏膜实验评价胰岛素磷脂纳米囊泡的透口腔黏膜能力。结果超声波法制备的3个处方磷脂纳米囊泡平均粒径分别为97·39、85·60、100·60nm,高压匀质法制备的3个处方磷脂纳米囊泡平均粒径分别为58·7、88·7、91·9nm,多分散指数均小于0·4,体系稳定。而采用高剪切法制备的磷脂纳米囊泡粒径与多分散指数较大,且体系不稳定。电镜照片显示高压匀质法制备的磷脂纳米囊泡呈球形,其粒径小于100nm。透黏膜实验显示,胰岛素磷脂纳米囊泡和对照组的透黏膜速率分别为0·0024和0·0008IU·ml-1·min-1,在180min磷脂纳米囊泡组胰岛素的累积透黏膜量达到(0·436±0·010)IU·ml-1,是对照组胰岛素透黏膜量的2·46倍。结论高压匀质法制备的磷脂纳米囊泡具有粒径小、粒径分布狭窄、稳定性好、透黏膜能力强等特点,有望成为一种新型的胰岛素透黏膜纳米载体。

表柔比星固体脂质纳米粒的制备及透黏膜行为

制备表柔比星固体脂质纳米粒(EPI-SLNs),并考察其体外释放、透黏膜行为。采用复乳法制备EPI-SLNs,并以包封率为评价指标优化其处方及工艺;采用平衡透析法研究EPI-SLNs的体外释药行为;立式扩散池法考察其透黏膜行为。结果表明,在m(表柔比星)=1 mg、m(单硬脂酸甘油酯)=5 mg、m(大豆磷脂)=3.5 mg,V(油相)∶V(内水相)=5,初乳涡旋为30 s、初乳超声为40 s、复乳超声为60 s的条件下,所得EPI-SLNs呈橘红色、有光泽,平均粒径为148.6 nm,电位为-30.8 mV,包封率为72.4%;体外释药过程中,t=8 h累积释放度达65.02%;透黏膜实验中,t=8、12、36 h,EPI-SLNs的黏膜累计透过百分率分别为48.4%、55.12%、62.08%,为水溶液的2、1.96、1.79倍;t>36 h,EPI-SLNs的黏膜滞留百分量为13.84%,是EPI水溶液的0.504倍。表明EPI-SLNs不仅具有显著的缓释行为,且具有更好的黏膜透过性。

中药槐花对溃疡性结肠炎小鼠肠道黏膜通透性的实验研究

目的研究槐花对肠道黏膜通透性的影响。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立小鼠溃疡性结肠炎模型,随机分为对照组、急性肠炎模型组、低浓度槐花给药组(低剂量1.04 g·kg^(-1))和高浓度槐花给药组(高剂量3.12 g·kg^(-1)),每组6只,除对照组小鼠给予蒸馏水饮用外,其他组每天自由饮用新鲜配制的3%DSS溶液连续饮用7 d以构建肠炎模型。低、高剂量槐花给药组分别通过灌胃不同浓度槐花悬液给药,对照组及模型组灌胃等体积生理盐水。给药期间,观察小鼠一般情况。给药结束后,对小鼠进行表型测定,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察结肠组织病理形态并进行组织学评分,采用血清异硫氰酸荧光素(FITC-dextran)检测肠道黏膜屏障完整性,采用免疫荧光检测两种紧密连接蛋白包括闭锁小带蛋白1(ZO-1)、咬合蛋白(occludin)的表达水平。结果(1)与对照组比较,模型组小鼠体质量、结肠长度明显降低,脾重量、粪便含水量和疾病活动指数(DAI)评分显著升高;与模型组比较,低、高浓度槐花给药组小鼠体质量、结肠长度均显著升高,脾重量、粪便含水量和活动指数(DAI)评分均显著降低。(2)与对照组比较,模型组结肠组织病理学评分升高(P<0.0001);与模型组比较,低、高浓度槐花给药组结肠组织病理学评分均显著降低(P<0.05或P<0.0001)。(3)与对照组比较,模型组小鼠肠道黏膜通透性显著升高;与模型组比较,低、高浓度槐花给药组黏膜通透性显著降低。(4)与对照组比较,模型组小鼠两种紧密连接蛋白ZO-1以及occludin表达水平明显降低;与模型组比较,低、高浓度槐花给药组两种紧密连接蛋白的表达水平有所升高。结论槐花对小鼠肠道黏膜通透性有恢复作用,并可改善小鼠溃疡性结肠炎状况。

肝硬化患者血清高迁移率族蛋白B水平变化及其与肠黏膜通透性的相关性

目的观察不同病情肝硬化患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肠黏膜通透性(IP)相关指标[D-乳酸(D-lac)、二胺氧化酶(DAO)、内毒素(ET)]水平变化,分析血清HMGB1水平与IP相关指标的相关性,以明确血清HMGB1水平与患者IP的关系。方法肝硬化患者63例,根据Child-Pugh评分分为3组,CP-A级组16例、CP-B级组32例、CP-C级组15例,同期收集体检健康者33例作为对照组。采用ELISA法检测各组血清HMGB1、ET、DAO、D-lac。分析肝硬化患者血清HMGB1与IP相关指标的相关性及血清HMGB1、IP相关指标与Child-Pugh分级的相关性。结果CP-A级、CP-B级、CP-C级组血清HMGB1、ET、DAO、D-lac水平均高于对照组,CP-C级组血清HMGB1、D-lac、ET水平高于CP-A级组,CP-B级组血清HMGB1、ET水平高于CP-A级组(P均<0.05)。肝硬化患者血清HMGB1与IP相关指标ET、DAO、D-lac呈正相关(r分别为0.371、0.854、0.623,P均<0.05);血清HMGB1、ET、DAO、D-lac水平均与Child-Pugh分级呈正相关(r分别为0.356、0.272、0.301、0.382,P均<0.05)。结论肝硬化患者血清HMGB1水平升高,IP增加,且随着病情程度加重而改变更明显;血清HMGB1水平与患者IP有正相关关系。

miRNA对IBS肠黏膜通透性影响的机制研究

随着人们生活水平的改善,肠易激综合征(IBS)逐渐成了困扰当代青壮年的疾病之一。IBS病因复杂,发病受心理和生理等多重因素的刺激,而肠黏膜通透性改变则是其主要的生理因素之一。miRNA是一类非编码小分子RNA,可调控基因的表达,在细胞分化、生物发育及疾病发生发展过程中发挥重要作用。研究显示,miRNA的表达与IBS的发病密切相关。本文就miRNA对IBS肠黏膜通透性的影响进行研究,有望为IBS的治疗提供新思路。

酪酸梭菌对NAFLD小鼠肠黏膜通透性的影响及相关机制

目的探讨酪酸梭菌(CB)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肠黏膜通透性的影响及相关机制。方法使用高脂饮食构建NAFLD小鼠模型,将小鼠分为模型组(Mod)、酪酸梭菌低剂量组(CBL,0.5×10^(7) CFU/mL)、酪酸梭菌高剂量组(CBH,1.0×10^(7) CFU/mL),同时设置正常对照组(Con),每组8只,每周记录1次小鼠体质量。末次给药完成后小鼠禁食12 h,心脏取血,取肝脏组织、小肠组织,应用酶联免疫吸附法检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、二胺氧化酶(DAO)水平和肝脏组织IL-6、TNF-α水平;苏木精-伊红染色观察肝脏组织病理变化;Western blot检测小肠组织中紧密连接蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)蛋白表达。结果随着培养时间的延长,各组小鼠体质量均呈增长趋势,培养第4周开始,Mod小鼠体质量明显高于Con小鼠,CBL、CBH小鼠体质量较Mod小鼠均有降低(均P<0.05),CBH小鼠体质量下降幅度更为明显。Mod小鼠血清ALT、AST、TC、TG水平明显高于Con小鼠(P<0.01);CBL、CBH小鼠血清ALT、AST、TC、TG水平明显低于Mod小鼠(P<0.05),CBH小鼠下降幅度更明显。苏木精-伊红染色显示,CBL、CBH小鼠肝组织中纤维结构和肝小叶结构较Mod小鼠明显改善,脂肪沉积、细胞变性和坏死、炎症细胞浸润也明显减轻。Mod小鼠血清DAO水平及肝组织中IL-6、TNF-α水平明显高于Con小鼠(P<0.01);CBL、CBH小鼠血清DAO水平及肝组织中IL-6、TNF-α水平明显低于Mod小鼠,CBH小鼠明显低于CBL小鼠(均P<0.05)。Mod小鼠小肠组织中Occludin表达水平、ZO-1蛋白表达水平明显低于Con组小鼠(P<0.01);CBL、CBH小鼠小肠组织中Occludin、ZO-1蛋白表达水平明显高于Mod小鼠,CBH小鼠明显高于CBL小鼠(均P<0.05)。结论NAFLD小鼠肠黏膜屏障受损可导致纤维结构和肝小叶结构破坏,紧密连接表达减少,CB可通过上调Occludin、ZO-1蛋白表达增强紧密连接,进而改善肠黏膜通透性。

地衣芽孢杆菌活菌胶囊治疗溃疡性结肠炎的临床疗效及对患者肠道黏膜通透性和肠道菌群的影响

目的:探究地衣芽孢杆菌活菌胶囊在溃疡性结肠炎(UC)中的应用效果及对患者肠道黏膜通透性、肠道菌群的影响。方法:选取2019年1月至2021年5月的200例UC患者,按随机数字表法分为观察组和对照组,每组100例,观察组给予美沙拉嗪肠溶片+地衣芽孢杆菌活菌胶囊口服,对照组给予美沙拉嗪肠溶片口服,连续治疗12周后评价临床疗效,并比较两组治疗前后活动度分级、肠道黏膜通透性指标[内毒素(ETX)、二胺氧化酶(DAO)]、肠道菌群(大肠埃希菌、乳酸杆菌、双歧杆菌)菌落数及16SrDNA拷贝数、血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平,记录药物不良反应。结果:治疗12周后,观察组总有效率为89.00%,高于对照组的77.00%(P<0.05);两组活动度分级均明显优于治疗前(P<0.05),且观察组优于对照组(P<0.05);两组血清ETX、DAO水平均较治疗前明显下降(P<0.05),且观察组血清ETX、DAO水平均明显低于对照组(P<0.05);观察组大肠埃希菌菌落数及16SrDNA拷贝数明显低于治疗前及对照组治疗后(P<0.05),乳酸杆菌、双歧杆菌菌落数及16SrDNA拷贝数均高于治疗前及对照组治疗后(P<0.05);观察组血清IgA、IgM水平均明显高于治疗前及对照组治疗后(P<0.05);观察组不良反应发生率为9.00%,与对照组的13.00%比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:地衣芽孢杆菌活菌胶囊用于UC辅助治疗可提高临床疗效、减轻疾病活动度,且有利于改善肠道黏膜通透性、调整肠道菌群、调节免疫功能。

大承气汤加味辅助治疗重症胰腺炎的效果及对炎性因子和肠黏膜通透性的影响

目的 观察重症胰腺炎行大承气汤加味辅助治疗的效果及对炎性因子和肠黏膜通透性的影响。方法 选择2020年1月—2022年7月于武夷山市立医院接受治疗的重症胰腺炎患者78例作为研究对象,采用随机数字表法分成大承气汤加味组(n=39)和常规西药组(n=39)。常规西药组予以常规西药治疗,大承气汤加味组在常规西药组治疗的基础上予以大承气汤加味治疗,2组患者均治疗7 d。比较2组患者症状恢复情况、治疗前后血清炎性因子[白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平、肠道功能指标[肠黏膜通透性、二胺氧化酶、D-乳酸]水平及不良反应。结果 与常规西药组比较,大承气汤加味组患者症状恢复时间均较早(P<0.01)。治疗7 d后,2组患者IL-6、IL-10、TNF-α水平均较治疗前降低,且大承气汤加味组更低(P<0.01);2组患者L/M、二胺氧化酶、D-乳酸水平均较治疗前降低,且大承气汤加味组更低(P<0.01)。大承气汤加味组患者不良反应总发生率为5.13%,低于常规西药组的20.51%(χ^(2)=4.129,P=0.042)。结论 大承气汤加味辅助治疗重症胰腺炎的效果较好,可有效促使临床症状消失,降低患者炎性因子水平,改善肠黏膜通透性及肠道功能,且不良反应较少,值得推广应用。

强化4周抗结核治疗中应用益生菌对结核病患者肠道黏膜通透性的影响分析

目的探讨强化4周抗结核治疗中应用益生菌对结核病患者肠道黏膜通透性的影响。方法回顾性选取2023年1—12月宁德市蕉城区医院收治的96例抗结核药物治疗的初治涂阳肺结核患者的临床资料,按照治疗方式不同分为研究组和对照组,各48例。两组患者均实施为期4周的强化抗结核药物治疗,研究组给予益生菌补充,对照组未给予益生菌补充。对比治疗前后两组患者的肠道黏膜通透性指标、肝功能指标、血清炎症因子指标水平。结果治疗后,研究组二胺氧化酶、D-乳酸、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶水平分别为(23.40±1.38)g/L、(16.43±1.07)mg/L、(32.48±2.97)U/L、(34.30±2.86)U/L、(67.95±5.19)U/L,均低于对照组的(24.97±1.40)g/L、(17.69±1.12)mg/L、(36.27±3.31)U/L、(37.92±3.17)U/L、(74.49±6.32)U/L,差异有统计学意义(t=5.533、5.636、5.904、5.874、5.541,P均<0.001)。治疗后,研究组经血清检测的C反应蛋白、白细胞介素-6、降钙素原水平均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论在初治涂阳肺结核患者抗结核治疗时,强化4周抗结核药物治疗会对患者的肠道黏膜通透性、肝功能造成不良影响,而采用益生菌补充治疗能够减轻抗结核药物对患者肠道黏膜通透性、肝功能的影响,有利于保证抗结核治疗效果,减轻炎症反应。

基于TLR4/ERK通路探讨电针对功能性消化不良大鼠肠黏膜通透性的影响

目的:基于TLR4/ERK通路探讨电针对功能性消化不良(FD)大鼠肠黏膜通透性的影响。方法:选用50只SPF级8周龄SD雄性大鼠,按随机数字表法分为空白组(10只)、造模组(40只),造模组采用郭氏夹尾刺激法+不规则饮食法+冰生理盐水灌胃法的复合造模方法建立FD模型。选取造模成功的大鼠30只随机分为模型组、电针组、TAK242组,每组10只。电针组针刺“足三里“”太冲”穴后在足三里穴接电针仪干预,连续波,频率2 Hz,强度1 mA,每次干预30 min,1次/d,共14 d;TAK242组予以TLR4抑制剂TAK242(0.5 mg/kg)尾静脉注射,1次/d,共14 d。干预结束后比较各组大鼠胃内残留率、小肠推进率;ELISA检测血清中二胺氧化酶(DAO)浓度;生化检测方法检测脂多糖(LPS)、D-乳酸(D-LA)的浓度;免疫组化法检测MBP蛋白的表达;免疫印迹法检测TLR4、MyD88、MEK、ERK、p-MEK、p-ERK1/2蛋白的表达。结果:模型组大鼠胃内残留率较空白组明显上升(P<0.01);与模型组比较,电针组、TAK242组胃内残留率均下降(P<0.01);电针组胃内残留率低于TAK242组(P<0.05)。模型组大鼠小肠推进率较空白组显著下降(P<0.01);电针组、TAK242组小肠推进率较模型组明显增加(P<0.01);电针组小肠推进率高于TAK242组(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠十二指肠TLR4、MyD88蛋白相对表达量显著增加(P<0.01);与模型组比较,电针组、TAK242组十二指肠组织TLR4、MyD88蛋白相对表达量显著降低(P<0.01);TAK242组TLR4蛋白相对表达量低于电针组(P<0.05),TAK242组MyD88蛋白相对表达量与电针组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,模型组大鼠十二指肠组织MEK、ERK、p-MEK、p-ERK1/2蛋白相对表达量显著上调(P<0.01);电针组、TAK242组大鼠十二指肠组织MEK、ERK、p-MEK、p-ERK1/2蛋白相对表达量均较模型组降低(P<0.01);电针组MEK、ERK、p-MEK、p-ERK1/2蛋白相对表达量低于TAK242组(P<0.05)。模型组大鼠十二指肠组织MBP平均光密度值显著高于空白组(P<0.01),电针组、TAK242组大鼠十二指肠组织MBP平均光密度值较模型组明显下调(P<0.01),电针组十二指肠组织MBP平均光密度值低于TAK242组(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠血清DAO、D-LA、LPS水平显著增高(P<0.01);电针组、TAK242组大鼠血清DAO、D-LA、LPS水平均降低(P<0.01);电针组大鼠血清DAO、D-LA、LPS水平低于TAK242组(P<0.05)。结论:电针可减轻FD大鼠十二指肠组织炎症反应,恢复肠黏膜屏障功能,其机制可能与下调TLR4-ERK通路相关蛋白表达有关。

胆囊切除后感染对患者肠黏膜通透性及免疫应激的影响

目的分析胆囊切除术后不同程度感染对患者肠黏膜通透性和免疫应激反应的影响。方法回顾性分析2021年1月至2024年1月期间本院接受胆囊切除术的800例患者,其中21例患者发生感染,将21例依据感染部位和临床表现分为浅层感染A组12例、深部感染B组9例。通过乳果糖-甘露醇试验和ELISA测定术前及术后第3天、第7天的肠黏膜通透性和免疫应激指标并对数据进行统计分析。结果术后第3天和第7天,深层感染组的肠黏膜通透性和免疫应激指标显著高于浅层感染组(P<0.05)。感染程度与各指标呈显著正相关(P<0.01)。结论胆囊切除术后感染程度显著影响肠黏膜通透性和免疫应激反应,需加强术后感染管理以改善患者预后。

鼻腔灌流法比较葛根素及其衍生物透鼻黏膜吸收差异

目的采用鼻腔灌流考察葛根素及其水溶性、脂溶性两种衍生物的透鼻黏膜吸收能力,探讨药物透鼻黏膜吸收效率与其分子量、溶解性等不同性质之间的关系。方法SD雄性大鼠麻醉后安装鼻腔灌流循环系统,取7 mL鼻腔灌流液加入循环系统,按预定时间点取样,采用高效液相色谱法测定葛根素及其水溶性、脂溶性两种衍生物的各时间点样品浓度,计算吸收速率常数,判断各化合物透鼻黏膜效率。结果葛根素、3′-(二甲基氨基)甲基葛根素盐酸盐浓度、7-O-(6-溴己基)-葛根素的线性范围分别为17.0~170.0μg·mL^(-1)、5.0~200.0μg·mL^(-1)、5.1~202.0μg·mL^(-1);三者透鼻黏膜吸收速率常数分别为(7.10±1.15)×10^(-3)、(6.83±0.55)×10^(-3)、(6.76±1.66)×10^(-3),K(葛根素)>K[3′-(二甲基氨基)甲基葛根素盐酸盐]>K[7-O-(6-溴己基)-葛根素],葛根素透鼻黏膜效率最高。结论透鼻黏膜吸收效率可能和分子量有关,分子量较小可能更有利于透黏膜吸收,同时过度亲水或亲脂的药物可能都不利于透黏膜吸收。因此葛根素鼻用制剂有希望成为临床应用新选择。

肝硬化患者肠黏膜通透性改变与肝功能分级的关系研究

目的探讨肝硬化患者肠黏膜通透性改变与肝功能分级的关系。方法以2020年11月至2022年4月经郑州市第六人民医院医学检验科收治肝硬化患者96例为观察组,按Child-Pugh肝功能分级分为A组(35例)、B组(43例)、C组(18例)3个亚组;同期选择无肝硬化的健康体检者40例为对照组。A组男25例、女10例,年龄(55.01±8.71)岁;B组男30例、女13例,年龄(55.19±8.76)岁;C组男14例、女4例,年龄(55.34±8.81)岁;对照组男27例、女13例,年龄(54.52±8.56)岁。收集粪便标本,通过细菌培养测定肠道主要菌群变化,测定肠黏膜通透性指标[D-乳酸(D-LAC)、内毒素(ETX)及二胺氧化酶(DAO)]。Pearson相关性分析分析肠黏膜通透性指标之间的相关性,Spearman相关性分析分析肠黏膜通透性指标与Child-Pugh肝功能分级的相关性,并使用受试者工作特征曲线(ROC)分析肠黏膜通透性指标的预测价值。计量资料采用F检验、独立样本t检验,计数资料采用χ^(2)检验。结果A、B、C组肠杆菌[(8.61±0.42)lgCFU/g、(8.95±0.39)lgCFU/g、(9.22±0.56)lgCFU/g]、肠球菌数目[(7.75±0.46)lgCFU/g、(8.42±0.87)lgCFU/g、(9.28±0.63)lgCFU/g]均高于对照组[(8.12±0.68)lgCFU/g、(7.18±0.71)lgCFU/g],乳杆菌[(9.08±0.63)lgCFU/g、(8.60±0.48)lgCFU/g、(8.04±0.76)lgCFU/g]、双歧杆菌数目[(9.15±0.58)lgCFU/g、(8.54±0.61)lgCFU/g、(7.96±0.82)lgCFU/g]均低于对照组[(9.85±1.01)lgCFU/g、(9.97±0.96)lgCFU/g],差异均有统计学意义(均P<0.05)。随Child-Pugh肝功能分级提高,肠杆菌、肠球菌数目呈上升趋势,乳杆菌、双歧杆菌数目呈下降趋势,差异均有统计学意义(均P<0.05)。A、B、C组D-LAC[(5.83±2.63)mg/L、(8.75±3.27)mg/L、(10.16±3.58)mg/L]、ETX[(10.53±4.36)U/L、(12.67±5.12)U/L、(23.08±9.37)U/L]、DAO水平[(34.06±10.36)U/L、(40.12±11.72)U/L、(43.07±14.20)U/L]均高于对照组[(3.92±2.27)mg/L、(3.72±2.51)U/L、(3.65±1.63)U/L],差异均有统计学意义(均P<0.05)。B、C组D-LAC、DAO水平均高于A组(均P<0.05),但B、C组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05);C组ETX水平均高于A、B组(均P<0.05),但A、B组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。经Pearson相关性分析显示,D-LAC与ETX、DAO呈正相关(r=0.595、0.489,均P<0.05);ETX与DAO呈正相关(r=0.353,P<0.05);经Spearman相关性分析显示,D-LAC、ETX、DAO与Child-Pugh肝功能分级呈正相关(r=0.468、0.470、0.236,均P<0.05)。经ROC分析显示,D-LAC预测Child-Pugh肝功能分级的诊断价值最高,曲线下面积(AUC)为0.772,最佳截断值为6.60 mg/L,灵敏度、特异度分别为78.69%、65.71%。结论肝硬化患者因肠道菌群紊乱、肠黏膜通透性改变导致肠道微生态失调可使病情加重,不利于预后。通过无创、可靠且实用肠黏膜通透性指标监测有助于为肝硬化患者诊疗提供重要指导。

实验性血小板微粒对葡聚糖硫酸钠结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响

目的探讨血小板微粒(PMPs)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎小鼠肠道炎症程度及肠黏膜通透性的影响。方法实验分为正常对照组(n=10,饮用无菌蒸馏水+腹腔注射0.9%氯化钠溶液)、PMPs组(n=10,饮用无菌蒸馏水+腹腔注射PMPs)、DSS模型组(n=10,饮用DSS溶液+腹腔注射0.9%氯化钠溶液)、实验组(n=15,饮用DSS溶液+腹腔注射PMPs)。收集炎症性肠病(IBD)患者外周血制备PMPs悬液。小鼠自由饮用5%DSS溶液1周构建结肠炎模型,连续7 d腹腔注射PMPs,每天记录疾病活动指数(DAI)评分,实验结束后取结肠标本,HE染色计算小鼠病理组织学评分(HI)评估肠道炎症的严重程度,结肠匀浆检测髓过氧化物酶(MPO)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、组蛋白H3(citH3)及游离DNA水平,透射电镜观察肠黏膜结构,采用异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-D)法检测肠黏膜通透性。结果与正常对照组相比,PMPs组小鼠结肠黏膜水肿、上皮结构破坏严重、炎细胞广泛聚集,总体HI升高(P<0.01);PMPs组小鼠结肠组织匀浆IL-1β、TNF-α等炎症因子水平升高(P<0.05),NETs表达增加(P<0.05);PMPs组小鼠血浆FITC-D水平明显增高(P<0.05),肠黏膜通透性增加。与DSS组相比,实验组小鼠血浆FITC-D水平更高(P<0.05)、电镜下结肠上皮损伤更重。结论PMPs可在小鼠体内诱导NETs形成,促进小鼠结肠炎症的产生,增加DSS结肠炎小鼠的肠黏膜通透性,加重肠道炎症。

肠道菌群对肠黏膜通透性调控机制的研究进展

肠黏膜作为人体肠道的第一道屏障与外界直接接触,同时在调节肠道免疫反应、抵抗外来病原体入侵等生理功能中起着至关重要的作用。肠道菌群及其代谢产物在这一过程中发挥的作用不容忽视。研究表明,肠道调节并维持肠道微生物的定殖与分布,肠道微生物也影响肠道的多种屏障功能,二者通过一系列细胞分子机制紧密联系,共同维持肠道稳态。一旦肠道菌群失衡,会伴随肠黏膜组织发生破坏、紧密连接蛋白表达降低、肠黏膜通透性增加等病理变化。因此,判断肠黏膜结构和功能正常与否,肠道内环境中的菌群是考虑的首要因素。本文基于近年的研究,综述肠道菌群对肠道通透性的影响及其机制的研究进展,为进一步研究和临床应用总结了理论基础,以期为肠道相关疾病的治疗提供参考。

黄藤素柔性纳米脂质体的制备及体外透黏膜给药研究

目的制备黄藤素柔性纳米脂质体(PFNL),并考察其药剂学性质与体外透黏膜给药的行为特点,为进一步应用奠定基础。方法以薄膜分散法制备黄藤素柔性纳米脂质体,采用鱼精蛋白凝聚与高效液相色谱仪测定包封率,考察卵磷脂、胆固醇与丙二醇对脂质体包封率的影响;用透射电镜(TEM)、光子相关光谱仪(PCS)与激光共聚焦显微镜(CLSM)评价脂质体的粒径和结构;通过测定脂质体透过微孔滤膜的相对速率评价其变形性;用恒温电导率法测定脂质体的凝聚速度常数(K)以评价其物理稳定性。采用水平双室扩散池考察黄藤素柔性纳米脂质体通过猪阴道黏膜的给药行为,并考察其对大鼠阴道组织中细胞因子SLPI、LF和SP-D表达的影响,与黄藤素普通脂质体(PCL)及其溶液剂(PL)进行对比。结果卵磷脂、胆固醇和丙二醇的质量分数分别为3%、0.02%、20%时,制备的黄藤素柔性纳米脂质体对黄藤素的包封率为(78±2.13)%;黄藤素柔性纳米脂质体为圆形或椭圆形的多层状囊泡结构,粒径为(185±19)nm,Zeta电位为(-53±2.27)m V,变形性为(79±5.75)%;黄藤素柔性纳米脂质体K值始终低于黄藤素的普通脂质体的K值。6.0 h时,黄藤素柔性纳米脂质体的药物累积透过量分别为黄藤素的普通脂质体和其溶液剂的1.53与2.86倍,且药物在阴道组织中的滞留量也高于黄藤素的普通脂质体和其溶液剂;黄藤素柔性纳米脂质体不影响大鼠阴道组织中SLPI、LF和SP-D表达,组织切片未显示异常。结论黄藤素柔性纳米脂质体对黄藤素的包封率高、稳定性好,能够促进药物通过阴道黏膜并在黏膜组织中形成药物储库,对阴道安全无刺激,因此,可作为黄藤素阴道给药的一种新型给药载体。

^(125)I-眼镜蛇神经毒素透鼻黏膜吸收及冰片的促进作用研究

目的:考察125I-(a-cobratoxin,Nt)透鼻黏膜吸收的情况及冰片的促进作用。方法:以大鼠、家兔、狗和羊为研究对象,以放射性活性(每分钟计数,count per minute,cpm)为指标,采用离体渗透鼻黏膜实验、在体渗透鼻黏膜重循环实验等方法,研究125I-Nt对不同动物透鼻黏膜吸收的情况及冰片的促进作用。结果:研究发现,Nt很难透过鼻黏膜吸收,但在冰片作用下吸收显著增加。结论:冰片对Nt透鼻黏膜吸收有显著促进作用。

MFG-E8减轻梗阻性黄疸大鼠肠道细胞凋亡和黏膜通透性损害

目的:观察梗阻性黄疸大鼠血浆乳脂球上皮生长因子-8(milk fat globule-EGF factorⅧ,MFG-E8)水平,小肠组织MFG-E8蛋白表达情况;明确补充MFG-E8能否减轻梗阻性黄疸大鼠肠道细胞凋亡和肠黏膜通透性损害。方法:大鼠梗阻性黄疸模型通过手术结扎胆总管(common bile duct ligation,BDL)建立,32只雄性成年SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、梗阻性黄疸组(BDL组)、MFG-E8治疗组(MFG-E8组)、治疗对照组(Vehicle组)。MFG-E8组和Vehicle组于BDL后第1、3、5天腹腔内注射rmMFG-E8(20μg/kg)或等体积的生理盐水;建模后第7天收集血及组织标本,Western blot检测血浆MFG-E8水平和肠道MFG-E8蛋白表达;原位末端转移酶标记(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL)法染色观察肠道细胞凋亡情况,Western blot检测肠道Cleaved Caspase-3水平;异硫氰酸荧光素标记葡聚糖(fluorescein isothiocyanate-dextran,FITC-D)法评估肠黏膜通透性,ELISA检测血浆肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。结果:与Sham组(5.675±0.638,1.24±0.157)比较,BDL组血浆MFG-E8水平(3.087±0.272)明显降低(P=0.001),小肠MFG-E8蛋白表达水平(0.484±0.090)明显减少(P=0.000);与Vehicle组(22.333±5.085,0.887±0.132)比较,MFG-E8组小肠细胞凋亡比例(14.467±3.722)以及Cleaved Caspase-3蛋白表达(0.582±0.145)明显下降(P=0.048,P=0.024);Vehicle组FITC-D水平(4.515±0.601)以及血浆TNF-α水平(233.84±21.21)较Sham组(1.519±0.346,78.24±13.75)均明显升高(P=0.000,P=0.000),MFG-E8组FITC-D水平(2.826±0.588)较Vehicle组明显降低(P=0.000),同时,血浆TNF-α水平(109.90±24.06)较Vehicle组下降了53%(P=0.000)。结论:补充MFG-E8明显减轻了梗阻性黄疸大鼠小肠细胞凋亡和肠黏膜通透性损害,以及全身炎症反应。

脓毒症患者肠道黏膜通透性的临床研究

目的探讨脓毒症患者肠道黏膜通透性的变化。方法前瞻、随机抽取符合入选条件的脓毒症患者和健康志愿者各20例。入选的患者和健康志愿者均给予口服含乳果糖10g、甘露醇5g的测试液,用高效液相色谱仪示差折光检测器测定6h后尿中乳果糖和甘露醇水平,计算出它们的比值(L/M);留取尿液的同时抽取血液标本测定血浆D-乳酸和血清前降钙素(PCT)水平。观察并对比脓毒症患者和健康志愿者以上指标,并对尿L/M比值、血浆D-乳酸和PCT进行相关分析。结果脓毒症患者的尿L/M比值、血浆D-乳酸和PCT水平较健康志愿者明显偏高(P<0.001);而脓毒症患者的尿L/M比值、血浆D-乳酸和PCT呈正相关(P<0.01或P<0.001)。结论脓毒症患者的肠道黏膜通透性明显增加,肠道黏膜通透性的增高程度与脓毒症的严重程度有密切关系。