醚型菊酯类农药通用抗原的合成及鉴定

以2-(4-乙氧基苯基)-2-甲基丙醇和氯乙酸钠为原料,合成了醚型菊酯类农药通用半抗原HaptenⅠ,经1H-NMR及13C-NMR鉴定后,分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,制得免疫原和包被原,经紫外光谱分析法计算得其偶联比分别为14∶1和35∶1,说明人工抗原合成成功。免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,效价达1.28×105,用半抗原经间接竞争ELISA检测人工抗原的免疫原性,IC50和IC10值分别为0.2653和0.0012 mg/L,证明人工抗原具有较好的免疫原性。交叉反应表明此多克隆抗体具有良好的特异性。

有机磷农药通用抗原的合成及鉴定

以二乙基膦酸乙酸作为通用结构半抗原,经活化酯法(NHS-DCC)、碳化二亚胺法(EDC)和混合酸酐法(MAH)合成了3种免疫原,用MAH法合成了1种包被原。人工抗原用紫外分光光度法初步鉴定偶联结果并计算克分子浓度分别为2.846×10-3、2.133×10-3、3.574×10-3、2.584×10-3。后用核磁共振P谱进一步确定偶联情况。偶联成功后免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,动物实验检测人工抗原的免疫原性,结果表明:NHS-DCC、EDC和MAH法所制得抗血清的最高滴度分别为24000、10000和32000,均获得免疫应答,以半抗原为研究对象建立的间接竞争ELISA法对半抗原的最低检测质量浓度IC10值为1.115×10-5g/L,抑制中浓度IC50值为7.176×10-4g/L。

硫代磷酸酯类农药通用抗原的合成与鉴定

【目的】合成具有硫代磷酸酯类农药共性结构的系列半抗原,制备此类农药的通用人工抗原。【方法】以烷氧基硫代磷酸盐和卤代羧酸为原料合成半抗原,采用1 HNMR、13 CNMR及EIS-MS谱图对其结构进行表征。将合成的半抗原分别通过活性酯法、混合酸酐法与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,制备免疫人工抗原和包被人工抗原。用紫外扫描法定性分析人工抗原的偶联情况,用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)法间接测定其偶联比。【结果】合成了H1～H6 6种具有硫代磷酸酯类农药共性结构的半抗原,其中H1、H2为包被半抗原,H3～H6为免疫半抗原。制备了H1-OVA、H2-OVA、H3-BSA、H4-BSA、H5-BSA、H6-BSA、H2-BSA、H4-OVA和H6-OVA 9种人工抗原,其偶联比分别为9∶1、10∶1、23∶1、26∶1、39∶1、43∶1、28∶1、14∶1和12∶1。【结论】成功合成硫代磷酸酯类农药的人工抗原,为下一步用其免疫动物制备抗体进而进行有机磷农药酶联免疫分析奠定了基础。

有机磷农药通用人工抗原的合成与鉴定

用O,O-二乙基硫代磷酰氯与4-氨基丁酸反应,合成了新型有机磷农药通用半抗原O,O-二乙基-N-(3-羧基丙基)硫逐磷酰胺酯(DENP),并进行了结构鉴定.然后采用碳二亚胺法将DENP与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,制备了通用人工抗原DENP-BSA,经鉴定,DENP-BSA结合比为12:1,适合进行动物免疫试验。

拟除虫菊酯类农药通用人工抗原的合成与鉴定

根据拟除虫菊酯公共结构设计合成一种拟除虫菊酯通用半抗原,所有中间体及半抗原经电喷雾电离质谱(ESI-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(1H NMR)鉴定确定结构。通过活化酯法将通用半抗原与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备出免疫原,紫外吸收法鉴定表明免疫原偶联成功,研究为建立拟除虫菊酯多残留免疫分析方法奠定了基础。

通用型肿瘤抗原的特性及应用

通用型肿瘤抗原是新近报道的一类只在绝大多数肿瘤细胞的癌变全过程中表达,而在正常组织中无表达的肿瘤抗原。以这类新抗原制备的广谱抗肿瘤疫苗可用于多种癌症的免疫治疗。文章对目前已鉴定的四种通用型肿瘤抗原的主要特性及其应用作一综述。

通用型嵌合抗原受体T细胞的研究现状及进展

通用型嵌合抗原受体T细胞(universal chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy,UCAR-T)属于通用型CAR-T中基于基因编辑的通用T细胞技术,通过基因编辑技术敲除T细胞信号受体因子,并使用经过改造的健康志愿者的T细胞制备CAR-T细胞,输注后不会引起移植物抗宿主病(graft versus host disease,GvHD)和宿主抗移植物反应(host versus graft reaction,HvGR)等免疫排斥反应。在动物实验和早期临床试验研究方面,UCAR-T技术显示出了良好的抗瘤效果、广泛的适用性和不可估量的应用潜力;在产业化方面,UCAR-T细胞技术显示出了质量可控、off-the-shelf、容易规模化制备等特点,解决了自体CAR-T的设计及培养制备成本过高、制备周期长、质量控制不易、细胞数量及扩增能力不足等问题。本文介绍了目前UCAR-T细胞的研究现状、进展及存在问题,并就存在问题进行了初步分析,为UCAR-T细胞的基础研究、产业化研究以及临床应用提供参考。

有机磷农药共性结构人工抗原的合成与鉴定

目的建立有机磷农药多残留的免疫分析方法。方法以O,O-二甲基硫代磷酰氯和4-羟基苯甲酸甲酯为原料,经两步化学反应合成了与有机磷农药化学结构相类似的一类半抗原O,O-二甲基-O-(4-羧基苯基)硫代磷酸酯(HP),并分别通过活泼酯法和混合酸酐法将HP与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联制备了HP的免疫原(HP-BSA)和包被原(HP-OVA)。结果经质谱和紫外光谱表征,证明所合成的产物为目标半抗原HP,并且与载体蛋白耦联比可达到15.6∶1(HP-BSA)和16.2∶1(HP-OVA)。结论半抗原HP及人工抗原合成成功,可以用于制备该类半抗原的广谱特异性单克隆抗体。

农药多残留免疫分析研究进展

农药多残留免疫分析在农药多残留分析中发挥越来越大的作用,其主要途径有设计通用半抗原、合成多决定簇人工抗原和混合使用多种抗体。介绍了农药多残留免疫分析的研究进展、各种方法的研究现状,讨论了其存在的问题和发展前景。