通络救脑口服液对AD大鼠学习记忆能力及AChE表达的影响

目的:观察通络救脑口服液对β-淀粉样蛋白1-40诱导的AD大鼠学习记忆能力及乙酰胆碱酯酶(AChE)表达的影响。方法:140只SD大鼠随机分为空白对照组(正常组)、假手术对照组、阴性对照组(模型组)、阳性对照组(盐酸多奈哌齐组)、实验组(48、24、12mg.kg-1.d-1)共7组。采用大脑海马立体定向注射凝聚态β-淀粉样蛋白1-40诱导老年性痴呆(AD)动物模型。药物干预4周后,采用Morris水迷宫测试大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数。采用免疫组织化学染色和计算机图像分析技术测定海马区AChE蛋白阳性目标积分光密度。结果:Morris水迷宫实验:模型组大鼠在定位航行试验中隐匿平台平均逃避潜伏期较正常组显著延长,空间探索试验中跨越原平台位置次数明显减少(P<0.01),通络救脑口服液各剂量组平均逃避潜伏期较模型组显著缩短(P<0.05),跨越原平台位置次数明显增加(P<0.01)。免疫组化实验:模型组和正常组大鼠海马区AChE蛋白阳性目标积分光密度比较无显著性差异(P>0.05),但与通络救脑各剂量组比较差异显著(P<0.01)。结论:通络救脑口服液对Alzheimer病模型大鼠的学习记忆功能减退具有改善作用,可能与抑制海马神经元AChE表达,进而减少乙酰胆碱(ACh)的分解有关。

通络救脑口服液对老年性痴呆模型大鼠海马区生长抑素、胆碱乙酰化酶表达的影响

目的:通过研究通络救脑口服液对老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠大脑海马区生长抑素(somatostatin,SS)和胆碱乙酰化酶(choline acetyhransferase,ChAT)表达的影响,探讨通络救脑口服液抗AD的可能机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组、模型组、盐酸多奈哌齐对照组和通络救脑口服液高剂量组、通络救脑口服液中剂量组、通络救脑口服液低剂量组,采用海马立体定向注射凝聚态β-淀粉样蛋白_(1-40)制备AD大鼠模型。药物干预4周后,处死大鼠,取海马组织,应用免疫组化SABC方法检测SS和ChAT的蛋白表达,并通过病理图像定量分析研究。结果:与空白对照组比较,模型组SS、ChAT表达减少(P<0.05);与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、通络救脑口服液各剂量组SS、ChAT阳性目标积分光密度均明显升高(P<0.05)。结论:AD模型大鼠大脑海马区生长抑素和胆碱乙酰化酶表达均明显降低,通络救脑口服液能够提高海马SS和ChAT蛋白的表达水平,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。

海马注射β-淀粉样蛋白对BACE1 mRNA的影响及通络救脑口服液的干预作用

目的:探讨大鼠大脑海马注射β-淀粉样蛋白1-40对BACE1mRNA表达的影响及通络救脑口服液对其的干预作用。方法:采用大脑海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40诱导Alzheimer's病动物模型后,药物干预4周,第5周应用实时定量PCR法检测BACE1mRNA表达。结果:模型组BACE12-ΔΔCt为4.67±0.52,2-ΔΔCt显著多于假手术组(1.07±0.08,P<0.01),表明模型组BACE1mRNA表达上调;与模型组比较,盐酸多萘哌齐组(1.80±0.23)、通络救脑口服液48mg、24mg、12mg/kg·d分别为2.92±0.22、1.54±0.25和0.54±0.11,2-ΔΔCt显著减少,表明BACE1mRNA表达下调。结论:大脑海马注射β-淀粉样蛋白1-40后大鼠海马组织BACE1mRNA表达水平明显增高,通络救脑口服液可以抑制海马组织BACE1mRNA的表达,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。

通络救脑口服液对AD大鼠海马单胺氧化酶活性、脂褐素含量的影响

目的从单胺氧化酶(MAO)活性和脂褐素含量两个方面探讨通络救脑口服液对海马注射β-淀粉样蛋白1-40建立的老年性痴呆(AD)模型大鼠的治疗作用。方法采用大脑海马立体定向注射凝聚态β-淀粉样蛋白1～40(Aβ1～40)诱导老AD动物模型。药物干预4w后,用分光光度法检测大鼠海马MAO活性,用荧光分光光度法检测脂褐素的含量。结果与假手术组比较,模型组海马MAO活性和脂褐素含量均明显升高(P<0.05);与模型组比较,通络救脑口服液低、中、高各剂量组MAO活性和脂褐素含量均明显降低(P<0.05)。结论通络救脑口服液能降低Aβ1～40建立的AD模型大鼠海马MAO活性和脂褐素含量,对AD有一定的治疗作用。

通络救脑口服液对实验性类AD大鼠血清细胞因子含量的影响

目的探讨大鼠大脑海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40对血清TNF-α和IL-1β含量的影响及通络救脑口服液对其干预作用。方法140只Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为空白对照组、假手术组、阴性对照组、阳性对照组、实验组（12,24,48 mg·kg^-1·d^-1）共7组。采用大脑海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40诱导Alzheimer＇s病动物模型后,药物干预4周,第5周应用双抗夹心酶联免疫吸附测定检测TNF-α和IL-1β含量。结果模型组TNF-α,IL-1β含量分别为（120.97±7.32）和（88.54±4.07）,TNF-α和IL-1β含量显著多于假手术组（TNF-α为85.43±6.55,IL-1β为68.29±4.37,P〈0.01）,表明模型组TNF-α和IL-1β含量升高;与模型组比较,盐酸多萘哌齐组（TNF-α为106.86±7.09;IL-1β为1.80±0.23）、通络救脑口服液12,24,48 mg·kg^-1·d^-1剂量组（TNF-α分别为100.08±9.29、99.97±6.09和85.90±4.40;IL-1β分别为（77.56±6.97）,（77.85±3.81）和（67.87±2.38）TNF-α和IL-1β含量升高显著减少。结论大鼠海马注射β-淀粉样蛋白1-40后大鼠血清TNF-α和IL-1β含量明显增高,通络救脑口服液可以降低血清TNF-α和IL-1β的含量,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。

通络救脑口服液对AD大鼠学习记忆能力及nNOS、SS表达的影响

目的观察通络救脑口服液对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导的AD大鼠学习记忆障碍的改善作用及对神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、生长抑素(Somatostatin,SS)蛋白表达的影响。方法采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)动物模型。采用Morris水迷宫测试大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数评价大鼠学习记忆能力及通络救脑口服液干预作用。采用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术测定海马区nNOS、SS蛋白阳性目标积分光密度。结果与假手术组比较,模型组平均逃避潜伏期显著延长,跨越原平台位置次数明显减少(均为P<0.01);与模型组比较,通络救脑口服液组(12,24,48mg·kg-1·d-1)平均逃避潜伏期显著缩短,跨越原平台位置次数明显增加(P<0.01)。免疫组化实验结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠海马区nNOS、SS蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,通络救脑口服液各剂量组nNOS、SS蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论通络救脑口服液通过上调nNOS、SS蛋白表达水平,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。

通络救脑口服液对快速老化模型小鼠RAGE和Aβ的影响

目的探讨通络救脑口服液对快速老化模型(SAMP8)小鼠晚期糖基化终末产物受体(RAGE)和淀粉样蛋白β(Aβ)表达的影响。方法 24只SAMP8小鼠随机分为模型组、通络救脑高、低剂量组(9,6 m L·kg^(-1)·d^(-1)),另设抗快速衰老亚系1(SAMR1)小鼠对照组(正常对照组),连续灌胃给药21 d。取海马区脑组织,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组织化学法检测小鼠大脑海马内Aβ以及RAGE的表达。结果与模型组比较,通络救脑高、低剂量组海马区脑组织RAGE和Aβ表达降低(P<0.01),RAGE蛋白含量明显降低(P<0.01)。结论通络救脑口服液可通过抑制海马区脑组织RAGE和Aβ的表达,以减轻RAGE和Aβ介导的神经病理损伤作用。

通络救脑口服液对AD大鼠海马CA3区超微结构及C-反应蛋白表达的影响

目的观察通络救脑口服液对β-淀粉样蛋白1～40(Aβ1～40)诱导的老年性痴呆(AD)模型大鼠海马CA3区超微结构及C反应蛋白(CRP)表达的影响。方法140只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、阴性对照组、阳性对照组及3个实验组(12、24、48 mg.kg-1.d-1剂量组),共7组。采用大脑海马立体定向注射凝聚态Aβ1～40诱导AD动物模型,药物干预4 w后,透射电镜观海马组织超微结构的变化,免疫组织化学染色和计算机图像分析技术测定海马区CRP阳性目标积分光密度。结果电镜观察结果显示:模型组大鼠海马变性,通络救脑口服液能改善大鼠海马神经元病理改变。与假手术组比较,模型组大鼠海马区CRP蛋白表达增高(P<0.05);与模型组比较,通络救脑口服液低、中、高各剂量组CRP蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论通络救脑口服液对AD模型大鼠脑内海马组织超微病理改变具有改善作用,并且能明显降低大脑海马组织CRP蛋白的表达,具有抗炎作用。

Aβ_(1-40)脑内注射对大鼠海马超氧化物歧化酶丙二醛的影响及通络救脑口服液的干预作用

目的观察通络救脑口服液对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导的AD模型大鼠海马SOD活性和MDA蛋白表达的影响。方法选用140只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组、通络救脑口服液各剂量组(12,24,48mg·kg-1.d-1)共7组,每组20只。采用海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40建立老年性痴呆(Alzhei-mer'sdisease,AD)动物模型。药物干预4周,第5周应用分光光度法检测大鼠大脑海马组织SOD、MDA蛋白的表达。结果与空白对照组比较,模型组SOD活性明显降低(P<0.05),而MDA含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,盐酸多萘哌齐组、通络救脑口服液各剂量组SOD活性明显升高(P<0.05),而MDA含量明显降低(P<0.05)。结论通络救脑口服液通过上调SOD的活性和抑制MDA的表达而发挥其抗氧化治疗老年性痴呆的作用。

通络救脑口服液对AD模型大鼠Bax和Bcl-2 mRNA的影响

目的:探讨大鼠大脑海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40对Bax和Bcl-2mRNA表达的影响及通络救脑口服液对其干预作用。方法:140只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为空白对照组、假手术组、阴性对照组、阳性对照组、实验组(12、24、48mg.kg-1.d-1)共7组。采用大脑海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40诱导Alzheimer's病动物模型后,药物干预4周,第5周应用实时定量PCR法检测Bax和Bcl-2mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组Bax2-ΔΔCt明显升高,而Bcl-22-ΔΔCt明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),表明模型组Bax mRNA表达上调,而Bcl-2mRNA表达下调。与模型组比较,盐酸多萘哌齐组、通络救脑口服液各剂量组Bax2-ΔΔCt显著降低,表明Bax mRNA表达下调;而盐酸多萘哌齐组、通络救脑口服液各剂量组Bcl-22-ΔΔCt显著升高,表明Bcl-2mRNA表达上调。结论:大脑海马注射β-淀粉样蛋白1-40后大鼠海马组织Bax mRNA表达水平明显增高,Bcl-2表达明显降低,而通络救脑口服液可以抑制海马组织Bax mRNA的表达和促进Bcl-2mRNA表达,从而发挥其抗老年性痴呆神经细胞凋亡的作用。

通络救脑口服液对AD大鼠学习记忆能力及突触素蛋白表达的影响

目的通过研究通络救脑口服液对老年性痴呆(AD)模型大鼠学习记忆能力及突触素(SYP)表达的影响,探讨通络救脑口服液抗AD的可能机制。方法将SD雄性大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组以及通络救脑口服液低、中、高3个剂量(12、24、48mg/kg)组,采用海马立体定向注射凝聚态β-淀粉样蛋白1-40制备AD动物模型。药物干预4周后,采用Morris水迷宫测试大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数。应用免疫印迹法检测海马区SYP蛋白的表达,电镜观察海马组织超微结构的变化。结果与假手术组比较,模型组平均逃避潜伏期显著延长,跨越原平台位置次数明显减少(均为P<0.01);与模型组比较,通络救脑口服液3组平均逃避潜伏期均显著缩短,跨越原平台位置次数均明显增加(均为P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠海马区SYP蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,通络救脑口服液3组SYP蛋白表达均显著升高(P<0.05)。电镜观察结果显示:模型组大鼠海马神经元变性,通络救脑口服液能改善大鼠海马神经元病理改变。结论通络救脑口服液对AD大鼠的学习记忆功能减退具有改善作用,可能与其上调SYP蛋白的表达有关。

大鼠大脑海马注射β-淀粉样蛋白对caspase-3蛋白表达的影响及通络救脑口服液的干预作用

目的:探讨大鼠大脑海马立体定向注射β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)对caspase-3蛋白表达的影响及通络救脑口服液的干预作用。方法:140只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组、通络救脑口服液低、中、高剂量组(12、24、48mg.kg-1.d-1)共7组。采用大脑海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆动物模型,药物干预4周后,电镜观察海马组织超微结构的变化,实时免疫印迹法检测caspase-3蛋白的表达。结果:电镜观察结果显示:模型组大鼠海马神经元变性,通络救脑口服液能改善大鼠海马神经元病理改变。免疫印迹结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠海马组织caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,通络救脑口服液组(12、24、48mg.kg-1.d-1)大鼠海马组织caspase-3蛋白表达均显著减少(P<0.05)。结论:海马注射Aβ1-40后大鼠海马组织caspase-3蛋白表达水平明显增高,而通络救脑口服液可以抑制海马组织促凋亡基因caspase-3蛋白的表达,从而发挥其抗老年性痴呆神经细胞凋亡的作用。

海马注射β-淀粉样蛋白-40对AD大鼠脑组织MAO、脂褐素表达的影响及通络救脑口服液对其的干预作用

目的探讨大鼠大脑海马注射β-淀粉样蛋白1--40对MA0、脂褐素表达的影响及通络救脑口服液对其的干预作用。方法140只Sprague--Dawley（SD）大鼠随机分为空白对照组、假手术组、阴性对照组、阳性对照组、实验组（48，24，12mg·kg^-1·d^-1）共7组。采用大脑海马立体定向注射凝聚态β-淀粉样蛋白14。诱导老年性痴呆（Alzheimer’Sdisease，AD）动物模型。药物干预4周，第5周应用分光光度法检测大鼠大脑组织MA0酶活性的变化，采用荧光分光光度法检测脂褐素的含量变化，以及通络救脑口服液对上述指标的影响。结果模型组大鼠脑组织MA0、脂褐素含量分别为（7．88±0．76）和（5．42士0．24），MAO、脂褐素含量显著多于假手术组MA0含量为（5．38±0．52），脂褐素含量为（4．16±0．18），P〈0．05），表明模型组MA0、脂褐素表达水平升高；与模型组比较，盐酸多奈哌齐组MA0含量为（7．08±0．39），脂褐素含量为（4．91±0．23）、通络救脑口服液低、中、高各剂量组MAO分别为（7．07±0．81，7．13士0．53，6．36±0．36）；脂褐素分别为（4．89±0．17，4．52士0．20，4．23±0．35），MAO与脂褐素含量显著减少。结论大脑海马注射β-淀粉样蛋白1-40后大鼠脑组织MAO、脂褐素表达水平明显增高，而通络救脑口服液可以降低海马组织MA0、脂褐素的含量，通过其抗氧化而发挥其抗老年性痴呆的作用。