依达拉奉对大鼠星形胶质细胞水通透性的影响

目的探讨依达拉奉对缺氧复氧大鼠星形胶质细胞模型水通透性和水通道蛋白4(AQP4)的影响。方法原代培养大鼠星形胶质细胞,通过95%(体积分数)N2培养8 h和95%(体积分数)的空气复氧培养6 h,构建缺氧复氧水肿模型。设置空白组(正常细胞)、对照组(水肿细胞未经受药物刺激)和刺激组(接受0.1、1、10或100μg/mL的依达拉奉溶液刺激)。采用细胞水通透性系数(Pd)检测、荧光定量PCR和Western Blot定量空白组、对照组和刺激组细胞水肿、AQP4 mRNA AQP4蛋白表达。结果缺氧8 h和复氧6 h后细胞水肿,且AQP4表达量上升。0.1μg/mL依达拉奉刺激后,模型细胞水通量、AQP4 mRNA水平和蛋白表达量与未刺激过的水肿星形胶质细胞比较,差异无统计学意义(P均>0.05),1、10或100μg/mL依达拉奉刺激后,水肿星形胶质细胞水通量、AQP4 mRNA水平和蛋白表达量显著低于未刺激过的水肿星形胶质细胞(P均<0.05),与正常的星形胶质细胞比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 1、10或100μg/mL依达拉奉可通过抑制AQP4 mRNA水平和蛋白表达,从而抑制细胞水肿。

数字胃肠道模型的建立及在硝苯地平缓释片人体吸收预测中的应用

以Excel 2003为平台,利用VBA程序建立数字胃肠道模型(DIM)。通过Ussing chamber大鼠肠吸收试验,研究不同肠段、不同pH、有无辅料存在条件下硝苯地平的吸收特性,获得DIM模型的输入层参数。再利用DIM模型预测硝苯地平缓释制剂人体的血药浓度-时间曲线并进行参数敏感性分析,找寻影响硝苯地平缓释制剂吸收的关键参数,为硝苯地平缓释制剂的处方设计提供参考和依据。实验结果表明,硝苯地平在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠的表观通透系数(Papp)均大于1.0×10-6cm/s。辅料能显著增高硝苯地平的Papp,而在大鼠同一肠段不同pH对硝苯地平的Papp差异无统计学意义。硝苯地平在大鼠各肠段吸收良好,未见明显吸收窗现象。DIM模型参数敏感性分析表明,吸收速率的变化对硝苯地平的血药浓度-时间曲线影响不大,吸收速率不是硝苯地平吸收的限速步骤,溶出速率和小肠迁移时间才是影响硝苯地平吸收的关键因素。DIM模型可以为硝苯地平缓释制剂的处方设计提供依据。