一种新型速效人胰岛素类似物的构建、制备及性质研究

目的:构建和制备出一种新型速效人胰岛素类似物(PIns),进行其性质研究。方法:采用加端PCR的方法,扩增出在天然人胰岛素原N端添加精氨酸、脯氨酸、赖氨酸、脯氨酸4个氨基酸残基的重构胰岛素原基因片段,将其插入通用表达载体pET28 a后,再将经过改构后的硫氧还蛋白(1-20 aa)的基因片段与重构胰岛素原基因的5′端通过赖氨酸连接,成功构建了速效人胰岛素原类似物融合蛋白(FKPPIns)的表达载体(pET28 a-FKPPIns)。此融合蛋白在大肠杆菌BL-21(DE3)中以包涵体的形式表达,经包涵体洗涤和DEAE阴离子交换树脂纯化后进行复性、酶切。酶切产物经RP-HPLC纯化后,质谱法测定其分子量;等电聚焦法测定此蛋白的等电点;凝胶过滤法测定其自身的缔合性质。对新西兰大白兔肌肉注射纯化后PIns,进行初步的药效学评价。结果:获得了结构为R-P-K-P-Insu lin的PIns纯品,其等电点为7.3,自身缔合性较标准胰岛素显著下降。结论:PIns与标准人胰岛素相比,起效快、达峰时间及持续时间短。

胰岛素蛋白质工程:[B16Ala]胰岛素和[B26Ala]胰岛素——两个新型的速效人胰岛素

用大动物（猪）降血糖实验证明田[B16Ala]胰岛素和[B26Ala]胰岛素是快速降血糖胰岛素.它们的前体[B16Ala]PIP和[B26Ala]PIP,在甲醇酵母体系中的分泌表达量分别为650和130 mg/L.由于它们是新型的分别保留全部和几乎全部胰岛素体内生物活力的速效胰岛素,且在甲醇酵母表达体系中得到比较高的表达量,所以具有很好的临床应用前景.

速效与长效人胰岛素类似物联合治疗儿童Ⅰ型糖尿病30例分析

目的观察分析速效人胰岛素类似物联合长效人胰岛素类似物治疗儿童1型糖尿病的疗效。方法Ⅰ型糖尿病患儿30例,用速效人胰岛素类似物诺和锐与长效人胰岛素类似物蓝特司联合治疗,并与普通胰岛素加中效胰岛素治疗对比。结果速效与长效人胰岛素类似物联合治疗后4、8、12月,糖化血红蛋白值比治疗开始时明显降低,有统计学意义(P<0.05);严重低血糖和轻中度低血糖出现次数减少,有统计学意义(P<0.05)。结论长效人胰岛素类似物蓝特司和速效人胰岛素类似物诺和锐联合治疗儿童Ⅰ型糖尿病疗效较好。

人胰岛素B27K-DTrI前体在毕赤酵母中发酵条件的优化

B27K-DTrI(B27位突变为赖氨酸的去三肽胰岛素)具有单体性质好,生物活性高等特点,是潜在的速效人胰岛素药物。在前期实验中,筛选到了一株高拷贝、高表达B27K-DTrI前体的S菌株。为提高人胰岛素B27K-DTrI前体在重组毕赤酵母S菌中的表达量,优化了S菌5 L发酵条件(温度、pH)。结果显示:pH 5.0,温度25℃,诱导108 h后,人胰岛素B27K-DTrI前体蛋白的表达量最高,可达114 mg/L。

胰岛素家族的新面孔

胰岛素的临床应用可以追溯到20世纪20年代初．迄今已有80多年的历史。

新一代治疗与控制糖尿病药物首次进入中国

日前,世界糖尿病治疗领域头牌“大腕”诺和诺宣布:由该公司研制生产的“诺和锐”注射液作为糖尿病治疗与控制方面新一代药物的速效人胰岛素类似物首次进入中国市场,即日起面市。 此举意味着在中国已经具备相当水准的糖尿病治,将再有获新的进展。据糖尿病防治专家介绍,随百姓生活条件的日渐优越。