SDF—1α和c—MYC蛋白调控速激肽受体-1截短型mRNA表达的研究

目的 观察基质细胞衍生因子1α（stromal cell derived factor 1α,SDF-1α）、c-MYC蛋白对速激肽受体-1截短型（tachykinin receptor 1 trucated,TACRI-Tr）转录水平的影响.方法 构建c-myc基因shRNA表达载体;用小干扰RNA方法沉默乳腺癌细胞MCF-7的c-myc基因,分成c-myc＋细胞组和c-myc-细胞组,相关实验组加SDF-1α细胞因子中和抗体,用实时定量PCR检测TYACR1-Tr mRNA表达水平.结果 c-myc基因shRNA表达载体构建成功;在正常培养条件下,c-myc-细胞组的TACR1-Tr转录水平低于c-myc＋细胞组（P〈0.05）;加了SDF-1α中和抗体后,c-myc-组TACR1-Tr的mRNA表达水平高于c-myc＋组（P〈0.05）.结论 MCF-7细胞在正常培养条件下,c-MYC蛋白可以反式激活TACRI-Tr的转录;但加入SDF-1α因子中和抗体后,c-MYC蛋白失去了这种激活作用.

速激肽-1受体小干扰RNA对变应性鼻炎多种炎性因子表达的影响

目的探讨速激肽-1受体小干扰RNA(neurokinin-1 receptor small interfering RNA,NK-1R-siRNA)对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)鼻黏膜多种炎性因子表达的影响。方法将24只健康雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分为3组,分别为NK-1R-siRNA组、阴性小干扰RNA (negative control-small interfering RNA,NC-siRNA)组和生理盐水组,每组8只。将所有大鼠用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)建立AR动物模型,同时用NK-1R-siRNA、NC-siRNA和生理盐水滴鼻干预。观察各组大鼠的AR症状。酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中OVA特异性IgE。实时定量聚合酶链反应(real time PCR,RT-PCR)及免疫组织化学(免疫组化)法检测各组大鼠鼻黏膜中NK-1R的表达情况。通过蛋白芯片技术比较各组大鼠鼻黏膜局部炎性因子的表达。使用SPSS 11.0软件,以单因素方差分析进行数据分析。结果与生理盐水组比较,NK-1R-siRNA组大鼠AR症状明显缓解[挠鼻(31.4±8.9)次/15 min比(69.5±17.9)次/15 min,喷嚏(7.2±1.9)次/15 min比(23.7±9.2)次/15 min,鼻分泌物(7.1±2.3)mg比(24.1±4.4)mg,t值分别为38.100、17.125、16.837,P值均<0.01]。与生理盐水组比较,NK-1R-siRNA组大鼠血清中OVA特异性IgE水平明显降低[(8.56±0.73)ng/ml比(18.05±1.22)ng/ml,t=9.787,P<0.01]。RT-PCR和免疫组化显示NK-1R-siRNA组大鼠鼻黏膜中NK-1R表达较NC-siRNA组和生理盐水组显著下降。蛋白芯片结果显示NK-1R-siRNA干预后,AR大鼠鼻黏膜中白细胞介素(interleukin,IL)1α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-13等多种炎性因子表达受到抑制,而γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、IL-10的表达明显升高。结论 NK-1R-siRNA可通过调节多种AR相关炎性因子的表达,减轻鼻黏膜局部变应性炎症。