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猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的MARC-145细胞中外泌体的分离与鉴定
被引量:
2
1
作者
张亮
王帅帅
+5 位作者
陈忍霞
陶佳丽
范阔海
段马魁
扆妍妍
姜俊兵
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期1300-1305,共6页
旨在寻找有效方法,能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中分离细胞产生的外泌体,并为探索外泌体在PRRSV感染细胞时的作用奠定基础。使用试剂盒提取MARC-145细胞产生的外泌体,利用电镜负染色法和Western blot技术对MARC-145细胞产生的外泌体...
旨在寻找有效方法,能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中分离细胞产生的外泌体,并为探索外泌体在PRRSV感染细胞时的作用奠定基础。使用试剂盒提取MARC-145细胞产生的外泌体,利用电镜负染色法和Western blot技术对MARC-145细胞产生的外泌体进行鉴定;采用碘克沙醇速率区带离心分离MARC-145细胞产生的外泌体,并用Western blot技术检测外分泌体的分布区间。用PRRSV感染MARC-145细胞后,使用试剂盒对MARC-145细胞产生的外泌体进行初步分离后,采用免疫磁珠捕获技术进行进一步纯化,并使用Western blot进行验证。Western blot结果显示MARC-145细胞产生的外泌体存在特异性标记蛋白CD63、Tsg101和Alix,不存在外泌体非标记蛋白EEA1、GRP94和Cytochrome C;电镜负染色结果显示MARC-145细胞产生的外泌体尺寸大小处于30~100nm,符合外泌体特征。利用Western blot对碘克沙醇速率区带离心中收集到的样品进行分析,结果显示MARC-145细胞产生的外泌体分布于7.2%~18%碘克沙醇密度区间。Western blot结果显示免疫磁珠捕获法获得的对照组不存在外泌体标记蛋白Tsg-101。以上结果表明MARC-145细胞能够产生外泌体,并且通过免疫磁珠捕获法能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中将其分离。
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关键词
MARC-145细胞
外泌体
PRRSV粒子
速率区带离心
免疫磁珠
下载PDF
职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的MARC-145细胞中外泌体的分离与鉴定
被引量:
2
1
作者
张亮
王帅帅
陈忍霞
陶佳丽
范阔海
段马魁
扆妍妍
姜俊兵
机构
山西农业大学动物科技学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期1300-1305,共6页
基金
山西省科技攻关项目(20100312016)
文摘
旨在寻找有效方法,能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中分离细胞产生的外泌体,并为探索外泌体在PRRSV感染细胞时的作用奠定基础。使用试剂盒提取MARC-145细胞产生的外泌体,利用电镜负染色法和Western blot技术对MARC-145细胞产生的外泌体进行鉴定;采用碘克沙醇速率区带离心分离MARC-145细胞产生的外泌体,并用Western blot技术检测外分泌体的分布区间。用PRRSV感染MARC-145细胞后,使用试剂盒对MARC-145细胞产生的外泌体进行初步分离后,采用免疫磁珠捕获技术进行进一步纯化,并使用Western blot进行验证。Western blot结果显示MARC-145细胞产生的外泌体存在特异性标记蛋白CD63、Tsg101和Alix,不存在外泌体非标记蛋白EEA1、GRP94和Cytochrome C;电镜负染色结果显示MARC-145细胞产生的外泌体尺寸大小处于30~100nm,符合外泌体特征。利用Western blot对碘克沙醇速率区带离心中收集到的样品进行分析,结果显示MARC-145细胞产生的外泌体分布于7.2%~18%碘克沙醇密度区间。Western blot结果显示免疫磁珠捕获法获得的对照组不存在外泌体标记蛋白Tsg-101。以上结果表明MARC-145细胞能够产生外泌体,并且通过免疫磁珠捕获法能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中将其分离。
关键词
MARC-145细胞
外泌体
PRRSV粒子
速率区带离心
免疫磁珠
Keywords
MARC-145 cells
exosomes
PRRSV particles
rate-zonal centrifugation
immune magnetic
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的MARC-145细胞中外泌体的分离与鉴定
张亮
王帅帅
陈忍霞
陶佳丽
范阔海
段马魁
扆妍妍
姜俊兵
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
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