慢性萎缩性胃炎及癌前病变复合造模法评价

目的 评价复合造模法构建慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis, CAG)及胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer, PLGC)大鼠模型的可行性。方法 将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)及模型组(n=50)。对照组正常饲养,模型组用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)自由饮用+水杨酸钠隔日灌胃+脱氧胆酸钠隔日灌胃+不定期禁食复合造模法构建慢性萎缩性胃炎大鼠模型,造模时间为6个月。于造模第3,4,5,6个月比较模型组与对照组大鼠胃黏膜病理程度,造模后采血,采用ELISA检测血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及胃泌素17(G-17)。结果 模型组大鼠复合刺激4个月开始出现胃腺体萎缩,5个月出现纤维化,6个月出现胃腺消失及异型增生,1只出现癌变。模型组6只大鼠异常死亡,造模死亡率为12%。与对照组比较,模型组血清PGⅠ升高(P<0.05),PGⅠ与PGⅡ比值(PG R)降低(P<0.05),G-17降低(P<0.05)。结论 采用复合造模法制备大鼠CAG模型成功率高,结果较稳定,但制备时间较长,且由于大鼠个体差异,造模进程难以完全统一,所有大鼠均出现胃黏膜萎缩,部分大鼠出现PLGC特征,个别大鼠出现癌变。

4种脾虚造模法的横向对比研究

[目的]通过对4种常见脾虚小鼠造模方法进行横向对比研究,评价各造模法脾虚损伤程度及其适用性。[方法]100只小鼠随机分为空白对照组(去离子水每只每天0.5 mL)、苦寒泻下组(100%番泻叶水浸液每只每日0.5 mL)、饮食失节组(喂饲甘蓝并每2日加喂猪脂1次)、劳倦过度组(每日捆尾力竭游泳1次)、利血平组(1%利血平,每日2 mL/kg,皮下注射),每组20只。持续造模10 d后,每组随机抽取10只取材,做相关指标检测,10只自然恢复10 d,通过对宏观体征、进食量、体质量及游泳时长的测定,观察各组宏观指标的稳定性。计算各组胸腺、脾脏指数,血液分析仪检测血液学指标,比色法测定血清D-木糖水平,碘-淀粉酶比色法测定血清淀粉酶活性,实时荧光定量PCR法检测相对mtDNA拷贝数及线粒体自噬相关蛋白Pink1、Parkin mRNA的表达,对各组小鼠进行线粒体功能评价。[结果]与空白对照组相比:1)苦寒泻下组、饮食失节组,利血平组宏观指标表现差异明显(P<0.05),以利血平组最为显著,指标稳定性以苦寒泻下组显著(P<0.05),差异均具有统计学意义。2)苦寒泻下组、劳倦过度组、利血平组胸腺指数明显降低(P<0.05),差异具有统计学意义,劳倦过度组变化显著;苦寒泻下组与利血平组脾脏指数明显降低(P<0.05),差异具有统计学意义,利血平组变化显著。3)利血平组和苦寒泻下组红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)下降明显,差异有统计学意义(P<0.05)。4)各模型组小鼠血清D-木糖水平均降低(P<0.05),差异具有统计学意义。5)苦寒泻下组、饮食失节组、利血平组血清淀粉酶活性均有所降低(P<0.05),差异具有统计学意义,利血平组最为显著。6)苦寒泻下组、饮食失节组、劳倦过度组mtDNA拷贝数均有所降低(P<0.05),差异具有统计学意义,饮食失节组最为显著;苦寒泻下组和饮食失节组线粒体自噬相关蛋白Pink1 mRNA转录水平均有所降低(P<0.05),差异具有统计学意义;利血平组Parkin mRNA转录水平有所上升(P<0.05),差异具有统计学意义。[结论]利血平组宏观指标和理化指标变化明显,但宏观指标稳定性差,其造模法为短期造模的首选。苦寒泻下组宏观指标、理化指标及线粒体功能变化明显,宏观指标稳定性好,其造模法,适合多种脾虚指标的广泛研究使用。饮食不节组理化指标和线粒体功能变化较明显,但宏观指标表现不明显,其造模法可以作为长期造模研究的脾家损伤,更贴近临床实际的一种方法。劳倦过度造模法,可用于多因素造模法复制脾虚损伤模型进行相关研究。

基于多因素造模法改良脾胃气虚型糖尿病胃轻瘫大鼠模型制备方法研究

目的:采用多因素造模法联合链脲佐菌素(STZ)配合高糖高脂饲料建立脾胃气虚型糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠模型,并对该模型进行评价。方法:20只SPF级Wistar大鼠依据随机数字表随机分为空白组8只和造模组12只,以多因素造模法复制脾胃气虚型大鼠模型,制定脾胃气虚型模型评价量表,将符合条件大鼠纳入实验;采用小剂量多次注射STZ联合高糖高脂饲料复制DGP大鼠模型,于实验6周末取材。观察大鼠随机血糖、体质量、胃排空率、小肠推进率;Elisa法检测血清中血清淀粉样蛋白(SAA)、D-木糖、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;光镜下观察脾脏病理结构改变。结果:与空白组比较,造模组大鼠一般情况(精神状态、粪便、饮食量)较差、体质量降低,差异有统计学意义(P<0.05);造模组随机血糖显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与空白组比较,造模组胃排空率、小肠推进率、SAA、D-木糖、LDH含量降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);光镜下显示造模组脾脏被膜增厚,红髓和白髓分界限不清,淋巴细胞减少。脾胃气虚型DGP证型评价:造模组大鼠有神疲倦怠、体质量降低、蜷缩、活动度差、眯眼、毛色暗淡、舌色偏暗等脾胃气虚证表现。结论:多因素造模法建立的大鼠模型符合脾胃气虚型DGP大鼠标准。

一种运用复合病因造模法复制大鼠肝郁脾虚证模型的研究

目的:探讨一种新的复合造模方法,建立中医肝郁脾虚证大鼠模型。方法:采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节法。结果:模型大鼠从造模第2周起即出现明显的饮食减少、大便溏薄、活动减少、倦卧、情绪低落等改变;D-木糖排泄率显著降低;海马5-羟色胺(5-HT)先降后升,去甲肾上腺素(NE)降低,多巴胺(DA)无明显变化;血浆生长抑素(SS)、血清胃泌素(GAS)显著升高;血浆胃动素(MTL)和血管活性肠肽(VIP)均先降后升。结论:该模型基本符合中医肝郁脾虚证的一些特征。

复合造模法建立大鼠胃癌前病变模型的实验研究

目的:建立大鼠胃癌前病变的动物模型,缩短造模时间,提高诱变率。方法:将雄性Wistar大鼠80只随机分成4组,即空白组,A组单纯MNNG造模,B组复合无酒精造模和C组复合加酒精造模。比较大鼠各组造模时间、病理变化情况及诱变率。结果:①C组造模时间为12周,造模时间最短。诱变率为72.23%,明显优于其他两组(P<0.01)。②酒精在40℃下,能提高MNNG溶解性和诱变率。结论:①复合造模法成功建立大鼠胃癌前病变的动物模型。②酒精可以促进MNNG溶解,提高诱发率,缩短造模时间。

复合造模法建立大鼠胃癌前病变模型的实验研究

目的:对复合因素诱发大鼠胃癌前病变模型进行探讨。方法:将雄性Wistar大鼠80只随机分成4组,即空白组,A组单纯N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)造模,B组复合无酒精造模和C组复合加酒精造模。比较各组大鼠体重变化、病理变化情况及诱变率。结果:造模后A、B、C组大鼠体重下降明显,与空白组比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。诱变率A组42.86%,B组诱变率50.00%,C组72.22%,C组诱变率明显高于A、B组,与A、B组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:复合造模法成功建立了大鼠胃癌前病变的动物模型;酒精可以促进MNNG溶解,提高诱发率,缩短造模时间。

改良结扎法用于脊髓损伤造模的优势分析

背景:目前根据脊髓损伤的损伤方式不同衍生出不同的模型构建方法,传统物理损伤造模方法都有各自的优缺点,尚缺乏较为有效和稳定的脊髓损伤动物模型。目的:建立一种可复制、可调控、创伤小、死亡率低、模型更稳定、适用范围广、术后护理时间短的脊髓损伤大鼠模型。方法:将体质量和鼠龄相似的40只SD大鼠随机分为对照组和改良组,每组20只,对照组采用钳夹造模法构建脊髓损伤模型,改良组选用基于压迫法改良的结扎法,在开窗的基础上使用缝线结扎的方法进行脊髓损伤的造模。比较两组大鼠的排尿行为、血尿、脓尿(感染率)、死亡率、脊柱畸形率及术后1,3,5,7 d的BBB运动功能学评分。结果与结论:基于压迫法改良的结扎法建立的脊髓损伤大鼠模型比常规建模方法排尿行为恢复较快、血尿率低、感染率低、死亡率低、脊柱畸形率低,BBB评分结果更集中稳定(1周内均<2分),由此可证明基于压迫法改良的结扎法更适用于脊髓损伤大鼠模型的建立。

血虚证动物模型造模方法与评析

综述和评析20余年来血虚证动物模型造模方法。期间该模型的研发工作在持续发展,涉及到多手段、多技术。目前研究和发展趋势比较集中的是化学药物造模、γ射线造模,各造模方法比较集中的问题主要是各造模剂量、时间,以及造模后持续时间尚未确定,同时对血虚证模型的认识亦在不断深入。

慢性萎缩性胃炎大鼠N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍复合造模法模型评价

目的评价慢性萎缩性胃炎N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)复合造模法的稳定性及对动物肝脏的影响。方法 60只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为正常组8只及造模1组、造模2组各26只。造模1组用MNNG复合高盐热淀粉糊法、造模2组采用MNNG复合乙醇灌胃法制备慢性萎缩性胃炎大鼠模型,正常组正常饲养。造模时间28周。造模后比较造模1组、造模2组大鼠胃黏膜病理程度,血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及肝脏病理改变。结果造模1组大鼠24周出现腺体异型增生,26周出现灶性肠化生。造模2组大鼠26周出现个别腺体异型增生,28周出现灶性肠化生。模型1组死亡率为26.9%,模型2组为15.4%。造模后造模1组、造模2组大鼠胃黏膜病理改变差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,造模1组、造模2组血清PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ降低(P<0.05)。28周造模1组及造模2组大鼠肝脏细胞均出现水样变性。结论慢性萎缩性胃炎MNNG复合造模法造模时间较长,模型死亡率较高,并且对大鼠肝脏组织有一定影响。

Poresky造模法联合高糖高脂饮食建立痰湿型PCOS大鼠模型

目的:采用Poresky造模法联合高糖高脂饮食建立痰湿型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型。方法:20只雌性大鼠随机分为空白组和模型组。模型组采用Poresky造模法联合高糖高脂饮食建立痰湿型PCOS大鼠模型。观察各组大鼠阴道涂片、卵巢外观及病理切片,采用血糖仪测定空腹血糖,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清空腹胰岛素(FINS)及白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)等炎症因子,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测卵巢组织中可激活核因子κB(NF-κB)、Toll样受体4(TLR-4)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)表达水平,采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测子宫组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1)和晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠体质量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);动情周期失去规律性变化,均处于动情间期时相,卵巢外观苍白,体积增大,可见较多囊状扩张卵泡,病理切片见囊性扩张的卵泡增多,黄体及各种发育阶段卵泡减少,其卵泡内卵母细胞或放射冠消失,颗粒细胞层数减少至2~3层;模型组FPG、FINS和胰岛素抵抗指数(IRI)均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);血清IL-6、TNF-α和CRP浓度均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢组织中NF-κB、TLR-4和ox-LDL的mRNA表达量均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);HMGB1、RAGE蛋白的表达量高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:模型组持续处于动情间期,伴随卵巢组织病理切片明显多囊样改变、胰岛素抵抗以及血清炎症因子水平等指标的改变。该动物模型基本符合痰湿型PCOS患者的病理改变及其临床证候。

肺纤维化体外模型建立方法的研究进展

目前,有多种关于肺纤维化体外模型的建立方法。大量研究结果显示,体外物理环境中的博来霉素、百草枯、二氧化硅、碳纳米管、粉尘螨,以及体内细胞因子中的转化生长因子-β1、结缔组织生长因子、血管紧张素Ⅱ、血小板源性生长因子、胰岛素样生长因子,均可能是肺纤维化体外模型的诱导物质。

3种方法评价椎动脉型颈椎病大鼠模型

目的:通过3种方法评价椎动脉型椎颈病模型.方法:将80只Wistar大鼠随机分为空白对照组、植骨压迫法造模组、力学平衡失调法造模组及混合造模法组各20只,通过检测造模前、造模后第2周、第4周颞叶软脑膜微循环血流量、血氧饱和度实验数据的比较,免疫组化检测椎动脉组织中NF-κB表达,评价3种CSA大鼠模型.结果:实验大鼠全部呈现颈椎缩短、偏斜甚至扭曲等椎动脉型颈椎病症状;混合造模法、植骨压迫造模法及力学平衡失调造模法与空白组比较,具有统计学意义(P<0.05);混合造模法分别与植骨压迫造模法及力学平衡失调法比较,具有显著统计学意义(P<0.01).各组大鼠血氧饱和度变化比较无统计学意义(P>0.05),血流量与血氧饱和度无直线相关性(P>0.05).混合造模法椎动脉组织中NF-κB表达最显著(P<0.01).结论:3种造模方法均可成功复制CSA模型,其中以混合造模法较为优异,值得推广.

改良硬化剂注射法大鼠椎动脉颈椎病模型建立的实验研究

目的:对硬化剂注射法制作法制作椎动脉颈椎病(cervical spondylosis of vertebral artery type,CSA)大鼠模型进行改良,评价改良硬化剂造模法制作大鼠CSA模型的有效性。方法:健康SPF级SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为空白组20只,模型组20只。模型组采用改良硬化剂造模法造模,造模4周后观察大鼠的一般情况,经颅多普勒超声(transcranial Doppler,TCD)检测大鼠椎动脉血流速度、搏动指数、阻力指数,旷场试验检测大鼠精神紧张度。结果:造模后1~2 d,模型组大鼠均出现不同程度蜷缩喜卧、颤抖、眯眼、眼分泌物增多等情况,实验过程中未出现大鼠脱落及死亡情况。模型组的平均血流速度比空白组低(P<0.05),模型组的搏动指数、阻力指数比空白组高(P<0.05),模型组大鼠精神紧张度较空白组明显增高,组间差异具有统计学意义。结论:改良硬化剂造模法可成功制备CSA大鼠模型,具有成功率高、稳定性高、死亡率低、操作简单等优势。

多囊卵巢综合征大鼠和小鼠模型的生殖与代谢特点及选择应用

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄期妇女常见的生殖内分泌疾病,临床表现主要包括生殖和代谢方面的异常,如月经稀发或闭经、高雄激素血症、卵巢多囊样改变、多毛、肥胖、胰岛素抵抗等。动物模型的选择与研究结果密切相关。本文通过对已有的PCOS大鼠和小鼠模型的文献进行分类及梳理,比较常见的PCOS大鼠和小鼠模型生殖和代谢两方面的异常表征,阐述PCOS模型建立的机制,探讨各模型在PCOS研究中的应用和价值,以期帮助研究者根据研究目的准确地选择PCOS动物模型。

两种多囊卵巢综合征大鼠模型比较

目的:比较两种多囊卵巢造模方法(雄激素造模方法和芳香酶抑制剂造模法)的实验差异。方法:通过监测2组造模大鼠动情周期、体质量、血清激素水平、卵巢大体解剖及光镜形态,比较两种造模方法各项指标的变化差异。结果:⑴DHEA组阴道脱落细胞为角质细胞;来曲唑组为小而圆的有核细胞。⑵体质量:DHEA组体质量增加幅度更显著。⑶血清激素水平:DHEA组血清T、P浓度增加更明显;DHEA组血清E2浓度升高而来曲唑组降低。⑷卵巢组织学:来曲唑组卵巢包膜增厚更明显,卵巢体积大;光镜下来曲唑组囊状扩张的卵泡沿包膜下排列,大小基本一致;DHEA组囊状扩张的卵泡占据卵巢髓质,体腔扩张明显。结论:脱氢表雄酮造模法更适合用来研究多囊卵巢综合征在体质量和血清激素水平方面的改变;来曲唑造模法则在卵巢组织学改变方面更突出。

肝郁脾虚证模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质的变化

目的:探讨复合造模法复制肝郁脾虚证大鼠模型的HPA轴变化及特点。方法:大鼠采用慢性束缚+过度疲劳+饮食失节法,连续三周,自然恢复一周。观察造模期间各不同时间点大鼠肾上腺重量及指数、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)及皮质酮(CORT)的变化。结果:与正常组比较,模型大鼠肾上腺重量第一周显著增加(P<0.001),第三、四周显著减低(P<0.001和P<0.01),其肾上腺指数在实验各周均显著高于正常组(P<0.05和P<0.01);下丘脑CRH第三周显著低于正常组(P<0.05),第四周回升并显著高于正常组(P<0.05);血浆ACTH在第一、三、四周均显著降低(P<0.05);血浆CORT第一周显著降低(P<0.05),第二周有所回复,第三、四周仍显著降低(P<0.05和P<0.001)。结论:该肝郁脾虚证大鼠模型存在HPA轴的功能减低,垂体对上位激素调节的反应能力减低可能是该模型的一个重要的生物学特征。

3种椎动脉型颈椎病大鼠模型的建立与评价

目的通过对3种椎动脉型颈椎病(CSA)模型大鼠学习记忆能力、焦虑抑郁度及神经精神紧张度的测定,对CSA大鼠造模方法进行比较和评价。方法将120只大鼠随机分为混合造模组、植骨压迫造模组、力学平衡失调造模组和空白对照组,每组30只,通过Morris水迷宫、高架十字迷宫实验及旷场实验对大鼠的学习记忆能力、焦虑抑郁度及神经精神紧张度进行检测和比较,对3种CSA大鼠模型进行评价。结果与空白对照组比较,混合造模组、植骨压迫造模组及力学平衡失调造模组的大鼠学习记忆能力明显下降,焦虑抑郁度及神经精神紧张度明显增高(P<0.05);与植骨压迫造模组及力学平衡失调造模组比较,混合造模组能更好的还原CSA发病特征。结论 3种造模方法均可以成功复制CSA动物模型,其中混合造模法更为优异,值得推广。

慢性低灌注大鼠P300的变化与记忆功能

目的观察慢性低灌注大鼠P300值及记忆功能的改变并探讨其意义。方法采用双侧颈总动脉结扎造模法在大鼠术前及术后四周分别进行P300的测定及水迷宫试验。结果双侧颈总动脉结扎4周后大鼠水迷宫游出时间(72.5±10.6)s较正常组大鼠(22.4±2.8)s显著延长(t=16.13,P<0.01),进入盲端的错误次数(8.3±2.7)次较正常组大鼠(2.2±1.0)次也显著增多(t=7.36,P<0.01);P300各组分潜伏期均显著延长,以P3波潜伏期(385±13)ms延长最为显著(t=6.61,P<0.01)。海马CA1区锥体细胞苏木精-伊红染色显示锥体细胞肿胀坏死较正常组增多,细胞排列紊乱。结论头皮针电极可以获得令人满意的P300图形,慢性低灌注能明显影响大鼠的认知功能,导致P300的改变。P300可作为评定血管性痴呆的可靠指标。

SD大鼠骨关节炎造模方法的筛选及优化探究

通过几种具有代表性的造模方法诱导膝关节骨性关节炎动物模型,筛选出理想的骨性关节炎造模方法。将32只SPF级健康雌性SD大鼠随机分为空白组、手术组、关节腔注射1组、关节腔注射2组,每组8只。手术组:Hulth造模法复制膝骨性关节炎动物模型,切断右侧膝交叉及内侧副韧带;关节腔注射1组:右侧注射4%木瓜蛋白酶溶液0.3 mL;关节腔注射2组:右侧注射1 g/L碘乙酸钠溶液0.1 mL。于术后第4周抽取关节液作一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)测定;处死动物,采用骨性关节炎软骨病理变化评价系统(OARSI)评价关节软骨的病变;采用光镜观察软骨细胞生长情况;运用免疫组化法测定关节软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的含量,对比各组数据。术后第4周,手术组病理改变OARSI评分、软骨细胞的MMP-1阳性表达和关节液中的NO、PGE2,与关节腔注射组相比均有极显著性差异(P<0.01);关节腔注射1组与关节腔注射2组相比,各项指标水平无显著性差异(P>0.05)。试验结果提示:手术组Hulth造模法复制膝骨性关节炎动物模型(通过切断右侧膝交叉及内侧副韧带建立骨性关节炎动物模型)是建立膝关节骨性关节炎动物模型的理想方法。