长期深低温冷冻对外周血造血干与祖细胞采集物中细胞活性及淋巴细胞亚群的影响

目的探讨长期深低温冷冻保存对动员后外周血造血干/祖细胞采集物中有核细胞活性、粒、巨噬细胞-集落形成单位(CFU-GM)生成能力及淋巴细胞免疫表型的影响。方法新鲜采集的标本作为对照组(12例),实验组按冷冻保存时间分为两组:实验1组(保存3～5年,26例)、实验2组(保存5～7年,9例)。冷冻标本经解冻、新鲜标本经裂解红细胞后流式细胞术(FCM)测病死率(7AAD+)和凋亡率(caspase-3+),CFU-GM 培养,流式细胞术检测淋巴细胞免疫表型:CD3/CD4/CD8/CD19/CD16+56,CD4/CD45RA/CD45RO,CD8/CD28。结果对照组有核细胞(NC)坏病死率和凋亡率显著低于两实验组(P<0.05),实验2组凋亡率(35.60±17.51)%高于实验1组(24.14±16.87)%(P=0.031)。CFU-GM/105NC在这三组分别为:139.25±122.7、117.26±182.08、29.51±48.65。CD34+细胞的比例对 CFU-GM/105NC有显著相关性(对照组 r=0.76,P=0.029;实验1组 r=0.849,P=0.000)。三组中淋巴细胞免疫表型分析差异无统计学意义。结论长期冷冻保存会影响有核细胞的活性和造血干与祖细胞的功能,但仍可保持一定的淋巴细胞免疫表型。