黄芪多糖在长期骨髓细胞培养中支持体外造血的作用

目的:研究黄芪多糖(APS)在长期骨髓细胞培养中是否能刺激或支持体外造血作用及刺激基质细胞的增殖.方法:采用长期骨髓细胞培养法,研究APS对骨髓细胞的影响.结果:在APS作用下,培养体系中的非贴壁细胞数在5～8周增加19～168倍.第6周时,在APS处理的培养体系中,97% 非贴壁细胞为成熟中性粒细胞,而对照仅为8%.实验结束即第17周时,APS使贴壁细胞数从每瓶2.2×105增加到4.1×105.结论:黄芪多糖在长期培养骨髓细胞(LTBMC)中可支持体外造血作用.

长期培养后小鼠造血基质细胞差异表达基因的筛选

为了进一步研究长期培养体系 (long termculture ,LTC)中造血基质细胞调控造血的分子基础及其作用机制 ,并发现新型造血调控因子 ,以LTC体系培养后小鼠骨髓造血基质细胞 (LTC St)为被扣除杂交组 ,以未经培养的小鼠骨髓细胞 (BMC)为扣除杂交组 ,采用抑制性扣除杂交法 (SSH)进行杂交 ,将杂交产物克隆并测序 ,进行生物信息学分析。结果 :获得了 131个差异表达EST克隆 ,这些克隆代表了 2 6种已知或部分已知的不同基因和 7条无任何线索的全新基因 ,5条具有完整开放阅读框架 ,无功能线索的新基因中 3条有信号肽。结论 :通过本实验得到了LTC体系中特异性表达的一个消减文库 ,获得了几条可能与造血调控相关的新型基因或EST 。

MIP-1β对长期培养体系中造血祖细胞增殖的影响

目的 :探讨MIP - 1β对长期培养体系中造血祖细胞增殖的影响。方法 :在骨髓长期培养的第 3、4、5周 ,分别加入MIP - 1β ,每周半换液时换出上清进行细胞计数 ,做CFU -GM培养。第 6周做3HTdR自杀实验 ,检测CFU -HPP。结果 :加MIP - 1β组上清中有核细胞数 ,CFU -GM数较对照组略有增加 ,但无显著差异(P >0 .0 5 ) ;第 6周MIP - 1β组造血祖细胞3HTdR自杀率较对照组明显增高。 (P <0 .0 5 )。CFU -HPP与对照组无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :MIP - 1β可解除骨髓基质层的内源性抑制活性 。

混合脐血清在骨髓长期培养中的效应

目的 :揭示脐血清在骨髓长期培养中的效应 ,为脐血清的应用提供基础。方法 :以Dexter培养法 ,观察混合脐血清 (MCBS)、组合细胞因子 (CK)在长期骨髓培养中对骨髓单个核细胞 (BMMNC)形成鹅卵石造血区 (CAFC)、长期培养起始细胞 (LTC IC)、有核细胞 (NCC)的生长。结果 :10例人骨髓 ,10 6 BMMNC培养 5周后 ,CAFC、LTC IC分别为37.1± 12 .4/ (ml.well) ,40 .9± 10 .6 (ml.well) ,NCC由接种时的 10 6 (ml.well)增至 (1.63± 0 .17) 10 6 (ml.well) ,加入10 %MCBS则可使三者得到明显扩增 ,但不及组合CK ;10 %MCBS还能明显提高组合CK对三者的扩增 ;2 0 %MCBS不能取代骨髓长期培养中的血清和组合CK对三者的扩增。结论 :MCBS中含有类似GM CSF、SCF、IL 3、IL 6、EPO等一类能使CAFC、LTC IC、NCC得到明显扩增的“活性物质”

骨髓细胞体外长期培养前后特性比较及其临床意义

目的通过体外骨髓细胞的培养，观察其细胞特征，为临床治疗疾病提供新的帮助。方法对10例急性白血病患者和5例正常人进行体外长期骨髓细胞培养：结果获得了3株与基质细胞共生的有长期生存力的造血细胞，其形态原始，这些细胞均有造血干细胞标记，其细胞化学、细胞表面免疫标记及超微结构与培养前细胞相比均发生了很大的变化，其中1例急性白血病原有核型异常者经培养后只出现正常核型。这些细胞在体外可以增殖，培养3个月足够达到骨髓移植所需细胞数。结论初步分析这些细胞为正常造血细胞，可用于目前所进行的造血干细胞移植，为今后造血干细胞移植开创一个新的方法。

骨髓体外长期培养的研究进展

长期骨髓培养（ＬｏｎｇＴｅｒｍＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＣｕｌｔｕｒｅ，ＬＴＢＭＣ）是一种骨髓细胞体外液相培养法。ＬＴＢＭＣ体系可视为体外模拟的造血微环境。它为造血微环境、细胞因子和造血干／祖细胞等造血调控理论的研究提供了一个重要手段；在再生障碍性贫血等血液病发病机理的研究、白血病骨髓净化以及早期造血细胞的体外扩增中也具有重要作用。

IDA对白血病骨髓基质培养体系中HL-60细胞杀伤效应的观察

目的 :研究细胞毒药物对体外残留白血病模型中HL 6 0细胞的杀伤效应。方法 :采用Dexter型骨髓培养体系形成白血病骨髓基质细胞贴壁层 ,接种HL 6 0细胞共培养 ,用去甲氧基柔红霉素 (IDA)处理后 ,动态观察HL 6 0细胞的活性变化。结果 :随着IDA剂量的增加及培养时间的延长 ,HL 6 0细胞活力逐渐减弱 ,去甲氧基柔红霉素 (IDA)与骨髓基质细胞层或单纯的培养基体外孵育对HL 6 0细胞杀伤能力减弱。结论 :急性白血病骨髓基质有助于HL 6 0细胞逃避化疗药物杀伤 ,对残留白血病的形成具有重要作用。

活体骨髓细胞镜检在新药长期毒性试验研究中的应用

1993年以来的中药新药非临床研究技术指导原则中,均要求长期毒性试验研究中组织病理检查应做骨髓检查,笔者8年来共进行上百个中药新药长期毒性实验,抽取Beagle犬3000余只、SD大鼠数千只、藏酋猴26只活体骨髓,镜下计数有核细胞,观察细胞形态学,评价新药对造血系统是否有影响,在血液系统检验中有实际意义。

双层细胞培养技术在粒系造血中的应用

双层细胞培养技术在粒系造血中的应用山东医科大学（２５００１２）张锑，徐从高，刘海鹏，韩祥淳，徐勇，张茂宏研究造血微环境及基质细胞对造血的影响，在生理和病理造血中均具有重要意义。我们建立了以人内皮细胞作铺层的半固体双层细胞培养技术，并观察了本方法对正常...

骨髓基质细胞及其与造血细胞的关系研究工作取得进展

很多血液病与骨髓造血功能的改变有密切关系,而造血功能又与造血微环境的改变有密切关系。1970年国外有学者提出一个多能造血干细胞之所以分化成为粒细胞、红细胞或巨核细胞是由它所处的造血微环境决定的。有的学者提出部分再生障碍性贫血可能是造血微环境的病变引起的。但造血过程中造血干细胞在发育中与造血微环境的关系如何,形态学基础是什么,还不清楚。

国产重组人粒细胞集落刺激因子对造血系统的刺激作用

采用整体和离体两种方法，研究了国产重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）对造血系统的影响。结果表明，国产ｒｈＧ－ＣＳＦ能减轻γ射线对小鼠外周血白细胞数的抑制，也能升高静注环磷酰胺恒河猴的外周血白细胞数；亦能直接刺激离体小鼠和人的骨髓细胞集落形成。说明国产品的作用性质和强度与进口品相似。

骨髓龛物理特性对造血干祖细胞命运的体外调控作用研究

目的造血干细胞是造血系统中所有免疫细胞和血细胞的共同前体。在成体中造血干祖细胞(fematopoietic stem and progenitor cell,HSPCs)主要定居于"骨髓龛",骨髓龛微环境中不同的细胞群、细胞因子、胞外基质成分及其他的生化小分子,对HSPCs的命运(静息、自我更新、增殖、分化、迁移、凋亡等)具有重要的调控作用。研究骨髓微环境的物理特征(包括基质刚度,空间限制/维度)对造血干祖细胞命运的体外调控作用,并剖析三维培养环境下的细胞分化走向。

用骨髓细胞培养净化法对白血病人进行自体骨髓移植

对白血病人的骨髓细胞进行长期培养可以选择性地对白血病细胞抑制，而有利于正常造血组细胞的增长。我们利用此特点进行对白血病人自身骨髓移植前的骨髓净化。

急性白血病骨髓基质细胞生物学特点的观察

目的探讨白血病骨髓基质对白血病形成的作用机制。方法白血病患者和正常人的骨髓单个核细胞行基质细胞培养,动态观察贴壁时间、小丛形成时间、集落形成时间、融合形成时间等生长特性,计数CFU-F集落,检测基质细胞VCAM-1、Fn及培养上清液中的IL-6、TNF-α含量。结果急性白血病骨髓基质细胞生长延迟,贴壁形成时间、小丛形成时间、集落形成时间和融合形成时间均明显晚于正常骨髓基质组(P<0.05);CFU-F计数和VCAM-1表达水平均明显低于正常对照组(P<0.05),Fn与正常对照组无显著性差异(P>0.05);骨髓基质细胞培养上清液中IL-6、TNF-α含量明显高于正常对照组(P<0.05)。结论急性白血病存在造血微环境异常。

IL-3体外造血支持效应的初步研究

目的 :探讨IL 3体外促进脐血造血细胞增殖分化的效应。方法 :连续 2次Ficoll Hypaque分离 ,初步纯化脐血造血细胞 ,将其单个核细胞接种于经γ射线预处理的成人骨髓基质细胞层上 ,加入适量IL 3,并设不加IL 3的对照组 ,持续培养 6w ,定期检测非粘附细胞和集落形成细胞 (CFC)。结果 :IL 3组 3～ 6w非粘附细胞数和CFC产率显著高于对照组 ,分别为对照组的 2 .7～4.5倍和 1.6～ 2 .3倍。结论 :IL

骨髓基质干细胞及其在内耳移植中的应用

骨髓包括造血系统和基质系统，骨髓基质干细胞（bonemarrowstromalstemcells，BMSC）是来源于基质系统并且具有多向分化能力的一类细胞。Friendenstein于1968年首先利用贴壁培养法分离获得BMSC，并对其分化能力进行了研究[1]。

骨髓长期培养的造血基质祖细胞的辐射敏感性

骨髓的长期培养体系使造血干细胞等所有造血细胞活存数周。这是由于培养过程中所形成的贴壁细胞层起到了造血微环境作用所致。把培养的这种贴壁细胞层接种到同系小鼠的肾包膜下,造血基质祖细胞形成异位造血灶。问题是培养的基质祖细胞在转移造血微环境的能力上是否和骨髓基质祖细胞相一致?辐射敏感性是细胞的最重要的特征之一。新鲜骨髓中转移造血微环境的细胞辐射敏感性的特征已有详细介绍。

本期导读

异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是当前治疗血液系统恶性肿瘤最有效的方法之一,患者allo-HSCT后总体生存率逐渐提高,越来越多患者实现长期生存。研究发现,移植前、移植期间和移植后相关因素的暴露均有可能降低其预期寿命,导致晚期并发症的发生。一些晚期并发症直接导致非复发死亡率增加,而另一些并发症会损害生活质量,因此对移植患者进行终身随访很有必要。本期约请浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心罗依副主任就allo-HSCT后长期生存患者的生存现况、晚期并发症及生活质量等作一述评,欢迎阅读!

健康老年人骨髓红系和粒－单系祖细胞的体外培养研究

采用造血祖细胞培养技术研究了健康老年人骨髓红系和粒－单系祖细胞的增殖能力及骨髓红系和粒－单系祖细胞分别对红细胞生成素（Ｅ_（ｐｏ））和粒－单系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的反应能力。发现健康老年人红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）、红系集落形成单位（ＣＦＵ－Ｅ）和粒－单系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）的集落数比健康非老年人明显减少；ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｅ对Ｅ_（ｐｏ）以及ＣＦＵ－ＧＭ对ＧＭ－ＣＳＦ的反应曲线低平。表明健康老年人骨髓红系和粒－单系祖细胞的增殖能力以及分别对刺激因子（Ｅ_（ｐｏ）、ＧＭ－ＣＳＦ）的反应能力减低。