人干细胞因子与其它造血生长因子对造血集落形成的协同作用

本文观察了含有人造血干细胞因子(rh-SCF)的重组质粒转染的COS7上清液,在半固体培养中,单独或协同rhGM-CSF、G-CSF、IL-3、EPO刺激人粒单系和红系造血祖细胞形成集落的影响。结果表明:单独rh-SCF对造血祖细胞集落形成无明显作用,SCF主要是协同其它因子,明显增加集落形成数量和集落的大小。

神经氨酸酶预处理对大鼠骨髓细胞分布及造血集落形成的影响

目的通过观察不同浓度的神经氨酸酶(neuraminidase,Neu)预处理供体骨髓细胞(donor bone marrow cells,dBMCs),经外周静脉注射后在受体内各主要组织器官的分布及对肝脏造血集落形成的影响,筛选出使dBMCs靶向性分布于肝脏的Neu最适浓度。方法以雄性SD大鼠为供体,Wistar雌性大鼠为受体。在dBMCs分布研究中,常规从雄性SD大鼠的股、胫骨制备dBMCs并用Neu处理。按Neu处理dBMCs的浓度将26只受体Wistar雌性大鼠分为4组,尾静脉注射99Tcm标记的dBMCs,5h后测定各组织器官的放射性活度。在造血集落形成研究中,受体Wistar雌性大鼠12只随机分为2组,尾静脉注射处理及未处理的dBMCs15d后,取受体各主要器官,行病理组织学检测,光镜下观察造血集落形成情况。结果在同一受体内,肝脏的dBMCs百分含量明显高于其他所测器官;以1·0U/ml浓度的Neu预处理时,受体肝脏内dBMCs百分含量高于对照组,差异显著(t=2·653,P=0·024),而肾脏内dBMCs百分含量低于对照组,差异显著(t=3·067,P=0·012),脾脏内dBMCs百分含量明显低于对照组,差异非常显著(t=3·265,P=0·009)。尾静脉注射15d后受体肝内可见造血集落形成,造血集落数量和形态上实验组与对照组无差别。结论在浓度为1·0U/ml时,神经氨酸酶预处理可增强骨髓细胞与肝脏的亲和性,使经外周静脉输注的骨髓细胞靶向性分布于受体肝脏内,但对肝脏内造血集落的形成无影响。

四物汤及各单味药的含药血清对粒系-巨系造血祖细胞集落(CFU-GM)的影响

目的 :研究四物汤及各单味药对粒系 -巨系造血祖细胞集落 (CFU - GM)的影响 ,更近于真实地反映药物在体内作用的实际情况 ,以进一步探讨四物汤补血作用的配伍机制。方法 :采用血清药理学体外实验法。结果 :四物汤能明显促进造血祖细胞的增殖 ,单味药当归的作用最强 ,单味药熟地黄、川芎的作用也较正常对照组有增强趋势 ,而单味药白芍对 CFU - GM的增殖似无作用。几种受试药的作用强弱顺序可排列如下 :当归 >四物汤 >川芎 >熟地黄 >白芍。结论 :上述结果提示在促进 CFU - GM的增殖方面 ,四物汤的生血补血作用源于当归 ,川芎与熟地黄似有一定的协同作用 ,而白芍不表现协同作用。

甲状腺素对脾虚小鼠肺、脾和胸腺细胞体外分泌造血细胞集落刺激因子的影响

造血细胞集落刺激因子(colony stimulating factor,CSF)作为一组糖蛋白,已被人们认识。它可由多种组织细胞产生,主要分为四大类,即 MU-CSF、GM-CSF、G-CSF 和M-CSF。CSF 在刺激骨髓细胞的增殖与分化,激活成熟粒细胞和巨噬细胞的功能,增强机体免疫力等方面有重要作用。材料和方法1 实验动物 BALB/C 6～8周龄纯系雄性小白鼠,体重16～22g,平均(19±3)g,由本校动物中心提供。2 药物利血平注射液,1mg/ml,上海医科大学红旗制药厂,批号930128。四君子汤:人参48g 白术36g 茯苓36g 炙甘草18g,水煎液浓度每毫升4g,本院中药房提供。3 试剂淋巴细胞培养液,美国 Gibc 公司产品;

冷冻前后脐带间充质干细胞造血支持能力的比较

背景:低温冻存脐带间充质干细胞已成为研究热点,但关于冻存后其造血支持能力变化的报道甚少。目的:比较冷冻前后脐带间充质干细胞体外支持成人骨髓单个核细胞造血集落生成的能力。方法:分别将冷冻前后的人脐带间充质干细胞和人骨髓来源的间充质干细胞培养至第3代,经2.5g/L丝裂霉素C处理制备为细胞滋养层,与成人异体骨髓单个核细胞共培养。体外培养至35d应用甲基纤维素法检测造血干/祖细胞集落的增殖状态。结果与结论:冷冻人脐带间充质干细胞组集落形态、大小上与骨髓间充质干细胞组和未冷冻人脐带间充质干细胞组相似,3者均比空白组集落数量多,差异有显著性意义(P<0.05)。与未冷冻人脐带间充质干细胞组相比,冷冻人脐带间充质干细胞组集落数更少,差异有显著性意义(P<0.05)。实验结果说明冷冻前后人脐带间充质干细胞与骨髓间充质干细胞对骨髓单个核细胞均有造血刺激作用,但人脐带间充质干细胞冷冻后的造血支持作用有所减弱。

当归补血汤及其组成药味的含药血清对造血祖细胞(CFUGM)的影响

当归补血汤水煎剂（归∶芪＝１∶５）６．６、１３．２、１９．８ｇ生药／ｋｇｉｇ小鼠１次，１小时后采集腹主动脉的血清０．４ｍｌ，加入小鼠造血祖细胞体外培养体系中培养６天，观察对ＣＦＵＧＭ的影响。结果随给药剂量的增加ＣＦＵＧＭ集落数增多，其量效方程为ｙ＝－９８．９３＋１５９．６６ｌｏｇｘ，最低起效量为４．１７ｇ饮片／ｋｇ。拆方研究表明促进ＣＦＵＧＭ增生功效的顺序是当归１．３２ｇ／ｍｌ＞当归０．２２ｇ／ｍｌ≥当归补血汤１．３２ｇ／ｍｌ＞对照≈黄芪１．１０ｇ／ｍｌ＞黄芪１．３２ｇ／ｍｌ。

γδT细胞及其培养上清成份对骨髓造血细胞集落形成的影响

目的 研究γδＴ 细胞及其培养上清成份对骨髓造血细胞集落形成的影响。方法 运用体外半固体造血集落培养观察了人γδＴ 细胞及其分泌上清对自体骨髓造血集落（ＣＦＵＣ） 形成的影响。结果 γδＴ 细胞及其培养上清能刺激自体骨髓造血集落的形成；其培养上清中可检出ＩＦＮγ、ＴＮＦ、ＩＬ８ 等细胞因子。结论 γδＴ 细胞能分泌一系列具有不同效应的造血调控因子，但其共同的作用结果则具有一定的造血刺激效应，可能成为一种新型的ＣＴＬ 用于肿瘤的过继免疫疗法。

ConA、LPS对小鼠肺、脾和胸腺细胞体外分泌CSF的影响

现已证明,机体除骨髓基质细胞之外,其它的细胞也能分泌造血细胞集落刺激因子(CSF)。实验研究发现,体外培养的小鼠肺、脾及胸腺细胞在受到ConA或LPS的刺激作用后,CSF分泌量明显增加,在低剂量时(1.0μg/孔),即有促进CSF分泌的作用,在5.0μg/孔时,促进CSF分泌的作用达最高水平。结果表明,体内许多细胞受到丝裂原刺激时,CSF分泌量增加,有利于激活造血和免疫系统,增强机体的抵抗力。

源于脾干细胞的破骨细胞诱导生成及培养

目的 建立一种可以获得大量破骨细胞或破骨样细胞的方法 ,以便进行原发性骨质疏松有关破骨细胞的研究。方法 C5 7雌性小鼠经尾静脉注射 5 氟脲嘧啶后 ,取脾细胞悬液在含有rmIL 3 ,rhIL 6和胎牛血清(FCS)以及牛血清白蛋白 (BSA)的α MEM 琼脂半固体培养 7d左右 ,获得脾脏造血干细胞集落 ;此集落再以粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)诱导生成破骨样细胞。结果 经活体观察、酒石酸 抗酸性磷酸酶 (TRAP)染色、扫描电镜检查 ,证实所得细胞为破骨细胞。结论 建立了一种获得大量破骨细胞或破骨样细胞方法 。

几种MK－CSA活性物质对小鼠CFU－MK体外形成的影响

几种ＭＫＣＳＡ活性物质对小鼠ＣＦＵＭＫ体外形成的影响黄成龙王亦流１柳晓兰邱丽玲张卿西毛秉智（军事医学科学院放射医学研究所，北京１００８５０；１海军总医院）自从１９７５年Ｍｅｔｃａｌｆ及１９７９年Ｖａｉｎｃｈｅｎｋｅｒ等人分别建立起小鼠和人类骨髓巨...

造血细胞集落刺激因子在临床上的应用

1985正Welte.K成功地从人膀胱癌细胞株5637的培养上清液中纯化并精制出人粒细胞集落刺激因子G-CSF(hG-CSF),然后Welte.K与美国的AMGEN公司Souza.L.M又进一步确定这种hG-CSF的N段氨基酸排列顺序,将来源于5637细胞株的hG-CSF基因克隆化,采用基因工程技术将该基因插入大肠杆菌成功地表达出hG-CSF,从而开发出重组人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF).

脐血单个核细胞与骨髓间充质干细胞滋养层的共培养

背景:骨髓间充质干细胞具有维持骨髓正常造血功能,在造血调控中发挥重要的作用。目的:观察骨髓间充质干细胞的生物学性状和多向分化能力,并检测其在体外支持造血的能力。方法:利用密度梯度培养法分离骨髓单个核细胞进行培养,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表型;接种脐血单个核细胞于骨髓间充质干细胞滋养层培养板上共培养,观察粒-单系祖细胞集落变化。结果与结论:骨髓间充质干细胞呈典型的成纤维样细胞形态,强表达CD44,CD29,不表达CD34和CD106。可促进脐血单个核细胞扩增并形成造血祖细胞集落。提示骨髓间充质干细具有造血支持作用。

五例胎盘血收集及CFU－GM祖细胞体外培养的初步探讨

本文探索了五例胎盘血（ＰＢ）的收集及位一单系祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ体外培养观察。结果表明：每个胎盘可收集约８０±ｍｌ血。ＣＦＵ－ＧＭ培养３天后集落开始生长。１４天后体积增大，细胞数增多，多数集落细胞＞４０个。提示ＰＢ中有丰富的ＣＦＵ－ＧＭ祖细胞。因此，本实验将为我们下一步临床应用ＰＢ治疗有关疾病或重建造血功能打下基础。

骨髓基质细胞株SC2－4和SC2－5培养上清对各种干细胞集落形成作用的探讨

骨髓基质细胞株ＳＣ２－４和ＳＣ２－５培养上清对各种干细胞集落形成作用的探讨侯丽君，远藤一靖，金田京子，营原知，穴户友明骨髓基质细胞是构成骨髓造血微环境的重要组成成分之一，具有与造血干细胞直接接触，促进其增殖和分化的作用，同时分泌一些细胞因子作用于造血...