线粒体病血液氨基酸谱和酰基肉碱谱的改变特点

目的研究线粒体病患者血液氨基酸谱和酰基肉碱谱的变化特点。方法对50例线粒体病、20例多酰基辅酶A脱氢酶缺陷(MADD)患者和22名健康对照,使用串联质谱法检测血液中氨基酸和酰基肉碱水平。选取线粒体病组与MADD组、健康对照组分别比较差异均有统计学意义(均P<0.05),而MADD组同健康对照组比较差异无统计学意义(P≥0.05)的氨基酸、酰基肉碱相关指标绘制ROC曲线,选取曲线下面积(AUC)最大的指标,计算其诊断线粒体病的敏感度、特异度。结果线粒体病组谷氨酸及鸟氨酸水平分别为中位数89.80μmol/L、27.70μmol/L,均低于MADD组(中位数113.46μmol/L、33.52μmol/L,均P<0.05)和健康对照组(中位数107.33μmol/L、34.08μmol/L,均P<0.001),丙氨酸/谷氨酸比值(中位数2.72)高于MADD组(中位数1.86,P<0.05)和健康对照组(中位数1.55,P<0.001)。线粒体病组乙酰肉碱、羟丁酰肉碱、羟异戊酰肉碱、戊二酰肉碱、羟棕榈酰肉碱水平分别为中位数27.25μmol/L、0.28μmol/L、0.33μmol/L、0.10μmol/L、0.08μmol/L,均高于MADD组(中位数21.32μmol/L、0.17μmol/L、0.19μmol/L、0.09μmol/L、0.06μmol/L,均P<0.05)和健康对照组(中位数21.26μmol/L、0.18μmol/L、0.20μmol/L、0.07μmol/L、0.05μmol/L,均P<0.01)。对上述氨基酸、酰基肉碱指标绘制ROC曲线,其中丙氨酸/谷氨酸比值AUC 0.864,当丙氨酸/谷氨酸比值>2.17时诊断线粒体病的敏感度和特异度分别为76.00%和85.71%。结论线粒体病的血氨基酸和酰基肉碱改变具有一定规律,有可能作为该类疾病的辅助检查方法。

我国新生儿遗传代谢病串联质谱切值调查分析

目的调查中国新生儿遗传代谢病串联质谱16项指标的切值,为切值的设置提供参考。方法收集141家开展新生儿遗传代谢病串联质谱4项氨基酸和12项酰基肉碱切值的相关信息,包括实验室名称、指标切值、切值来源、方法学原理、仪器、试剂盒校准品及是否修改过切值。分析不同方法学原理和切值来源对16项指标切值的影响。结果141家临床实验室中,70.18%的实验室切值来源于试剂厂家说明书,约16%切值为实验室确定,约14%切值源于文献报道,49.12%~53.51%的实验室修改过切值;不同检测方法切值差异显著(P<0.05);衍生法切值变异系数为25.26%~172.05%,且未修改过的切值离散程度大于修改过的切值;非衍生法切值变异系数为18.15%~200.92%,除瓜氨酸低值外,其他未修改过切值与修改过切值的离散程度一致。结论目前中国筛查新生儿遗传代谢病串联质谱16项指标切值差异较大,实验室应进行定期评估和验证。

串联质谱技术在新生儿遗传代谢病筛查中的应用研究进展

近年来随着科学技术的发展,在新生儿遗传代谢病筛查过程中实施串联质谱技术的应用效果十分显著,其具有高敏感度和高特异性,还具有筛查时间短和筛查病种丰富的优势。串联质谱技术在国内外已广泛应用于新生儿疾病筛查中,该技术不但扩展了新生儿疾病筛查谱,也为疾病筛查开辟了新的领域。随着筛查技术的发展,人们对新生儿遗传代谢病的认识、诊疗也在不断更新中。串联质谱技术是出生缺陷防控的重要措施,本文对筛查结果的影响因素进行了总结。随着人们对各种遗传代谢性疾病机制认识的加深和质谱技术的日益成熟,串联质谱技术将会对更多的疾病进行筛查和诊断,临床应用意义重大。

新疆地区新生儿遗传代谢病串联质谱检测氨基酸和酰基肉碱正常值参考范围的确立

目的 建立新疆地区新生儿遗传代谢病串联质谱筛查中氨基酸和酰基肉碱的正常值参考范围,为本地区新生儿遗传代谢病筛查结果的判读提供理论依据。方法 利用串联质谱非衍生化法检测试剂盒,对新疆地区符合筛查标准的33776例新生儿进行多种遗传代谢病筛查。利用SPSS 23.0软件进行统计分析,采用百分位数法计算新疆地区11种氨基酸和31种酰基肉碱的正常值参考范围(P0.5~P99.5);并采用Wilcoxon秩和检验与上海新华医院的正常值参考范围比较差异。结果 33776例新生儿的串联质谱筛查结果数据呈非正态分布,采用百分位数法(P0.5~P99.5)得到新疆地区正常新生儿氨基酸及酰基肉碱串联质谱检测指标参考范围(μmol/L);新疆地区与上海新华医院参考范围的上下限进行比较,结果显示丙氨酸(ALA)、瓜氨酸(CIT)、甘氨酸(GLY)、亮氨酸(LEU)、鸟氨酸(ORN)、戊二酰基肉碱+3-羟基-己酰基肉碱(C5DC+C6OH)等检测指标的上下限均差异显著(P<0.05)。结论 新疆地区串联质谱氨基酸、酰基肉碱正常值参考范围的建立,为筛查结果的分析提供了理论依据,并且随着数据的逐步积累,应定期对其进行相应的调整。

两种非衍生化串联质谱法检测试剂在遗传代谢病筛查中的性能比较及应用评价

目的评价两种非衍生化串联质谱法检测试剂(Neobase试剂盒及NSK试剂)筛查遗传代谢病(IMD)的性能。方法在同一台Xevo TQD串联质谱仪上,分别利用Neobase试剂盒及NSK试剂进行IMD筛查,对两种试剂的检测准确性、稳定性、精密度及临床标本检测性能进行验证和比较。结果NSK试剂与Neobase试剂盒相比,在内标种类、室内质控品、萃取液及流动相、进样方式等方面存在差异。准确性验证结果显示,NSK试剂检测的23个项目中,质控合格的(测定成绩≥80%)有21项,测定成绩达100%的项目占82.6%(19/23);Neobase试剂盒检测的23个项目全部合格,测定成绩达100%的项目占78.3%(18/23)。精密度验证中,Neobase试剂盒检测羟基异戊酰肉碱、戊二酰肉碱、己酰肉碱低水平标本和十四酰肉碱高水平标本的批内精密度>10.00%,而检测其余项目低、中、高水平标本的批内和批间精密度均优于NSK试剂。在稳定性验证中,两种试剂表现类似,在启用第15天检测各项目中、高水平质控品时表现出良好的稳定性。针对筛查结果未知的150份新生儿足底血标本与20份已经过IMD筛查的患儿足底血标本,NSK试剂和Neobase试剂盒在启用第3天、第15天、第28天的检测结果完全相符。结论对比Xevo TQD串联质谱仪配套的Neobase试剂盒,NSK试剂虽在检测准确性、精密度上稍有不足,但在稳定性上与Neobase试剂盒表现类似,且二者在临床应用中检测结果一致。

河南省新生儿11种氨基酸及31种酰基肉碱正常参考区间建立

目的:通过对河南省52979例新生儿遗传代谢病筛查,建立河南省正常新生儿11种氨基酸和31种酰基肉碱含量的参考区间。方法:采用串联质谱法对新生儿干血斑标本进行遗传代谢病筛查,对11种氨基酸和31种酰基肉碱的参考区间进行统计分析。结果:筛查的149943例新生儿中共确诊7种遗传性代谢病,其中28例苯丙酮尿症,13例甲基丙二酸血症,2例瓜氨酸血症(希特林蛋白缺乏症),2例原发性肉碱缺乏症(母源性),2例中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症,1例短链酰基辅酶A缺乏症,1例高甲硫氨酸血症。河南省大部分氨基酸和肉碱串联质谱检测结果与中国临床机构检测结果具有一致性,而缬氨酸(VAL)、精氨酸(ARG)、蛋氨酸(MET)、脯氨酸(PRO)差异较大。与甘肃地区相比发现11种氨基酸的参考区间差别较大。结论:通过筛查结果分析,建立了河南省正常新生儿干血斑中11种氨基酸和31种酰基肉碱的参考区间,为遗传代谢病实验室筛查提供参考依据。

递送及储存条件对新生儿干血斑标本中氨基酸和肉碱浓度的影响

目的:探讨不同递送和储存条件对新生儿干血斑标本中氨基酸和肉碱浓度的影响,为提高串联质谱筛查新生儿遗传代谢病的准确性及可靠性提供依据。方法:根据不同递送和储存条件将1 254 616名在浙江省新生儿疾病筛查中心进行遗传代谢病筛查新生儿的干血斑标本分为3组:室温递送储存(室温组,n=338 467)、冷链递送+低温储存(冷链+低温组,n=480 021)、冷链递送+低温低湿储存(冷链+低温低湿组,n=436 128)。应用串联质谱技术检测干血斑标本中氨基酸和肉碱浓度,SPSS 24.0软件进行数据分析,分析递送和储存过程中温度和湿度对氨基酸和肉碱浓度稳定性的影响。结果:三组样本氨基酸和肉碱浓度均呈偏态分布,氨基酸和肉碱浓度组间差异均有统计学意义(均P<0.01)。酪氨酸浓度中位数冷链+低温组与冷链+低温低湿组相近,室温组较冷链+低温组和冷链+低温低湿组分别降低18%和16%;室温组的蛋氨酸浓度中位数与冷链+低温组相近,分别较冷链+低温低湿组降低15%和11%;3组精氨酸浓度中位数均有差异,室温组和冷链+低温组分别较冷链+低温低湿组降低12%和25%。室温组的游离肉碱浓度中位数与冷链+低温组相近,较冷链+低温低湿组增高12%。冷链+低温组的乙酰肉碱、丙酰肉碱、丙二酰肉碱+3-羟基-丁酰肉碱、戊二酰肉碱+3-羟基-己酰肉碱、十六碳酰肉碱等浓度中位数与冷链+低温低湿组相近,室温组较冷链+低温组和冷链+低温低湿组降低21%~64%。其他氨基酸和酰基肉碱浓度组间差异较小。除瓜氨酸、甲基丙二酰肉碱+3-羟基-异戊酰肉碱、戊酰基肉碱外,室温组其他氨基酸和肉碱浓度月中位数变异系数均高于冷链+低温组和冷链+低温低湿组。结论:使用冷链递送和低温低湿储存可以有效延缓干血斑标本中部分氨基酸和肉碱的降解速度,提高串联质谱检测结果的准确性和可靠性,从而保证新生儿遗传代谢病筛查质量。

液相串联质谱在遗传代谢病高危新生儿检测中运用研究

目的研究液相串联质谱在遗传代谢病高危新生儿检测中的意义。方法留取560例临床疑似遗传代谢病新生儿的干血滤纸片,经含氨基酸、酰基肉碱内标的甲醇萃取,盐酸正丁醇衍生后,进行液相串联质谱分析。结果 560例高危新生儿中检测出患儿48例,阳性率8.6%(48/560),包括脂肪酸代谢病11例(22.9%);氨基酸代谢病15例(31.3%);有机酸代谢病22例(45.8%)。结论液相串联质谱可以通过检测血滤纸片中的不同酰基肉碱浓度,一次分析快速检测30多种遗传代谢病,对于遗传代谢病高危新生儿的临床诊断具有重要的价值。

青少年起病的甲基丙二酸血症1例

甲基丙二酸血症（methylmalonic acidemia，MMA）是一种有机酸代谢性疾病，属于常染色体隐性遗传。MMA大多在1岁以内出现症状，但有部分晚发型患儿可在几岁甚至十几岁时才表现出症状.MMA的临床表现主要为神经、血液、皮肤等多系统的损伤，其中脑神经损伤较为严重，致残率较高。由于该疾病临床表现缺乏特异性，易漏诊或误诊，本文报道1例经基因确诊的青少年起病的MMA患者的病史资料及辅助检查，提高对该病的认识。