GA118系列遗传分析仪校准方法研究

在JJF 1838-2020《遗传分析仪校准规范》的基础上,结合GA118系列遗传分析仪的工作原理和关键技术参数,研究了科学规范、操作简单、满足实际应用需求的校准方法,为GA118系列遗传分析仪的普及应用和实验室的规范化管理打下了基础。

国产GA系列遗传分析仪配套耗材性能验证

为验证国产GA系列遗传分析仪配套耗材的性能,在GA118-24B遗传分析仪上与进口耗材进行平行比对测试,通过184个实际样本的电泳数据,对电泳电流、分型准确性、分辨力、峰高、电泳时间等参数进行比较分析,同时对国产耗材进行重复性和一致性实验。结果显示,国产耗材与进口耗材的主要性能指标基本一致,数据无明显差异,在电泳精度、灵敏度等方面满足检案需求,同时缩短了电泳时间。

基于CEQ遗传分析仪的AFLP条件的优化试验

对AFLP选择性扩增反应的dNTP和MgCl2浓度进行了优化试验,产物检测与分析在CEQ遗传分析仪上进行。结果表明:在0．2mMdNTP和2．0mMMgCl2的条件下获得的扩增结果最佳,即AFLP条带最多,毛细管电泳的信号强度最高。

310型遗传分析仪的应用

使用ABI公司ProfilerPlus、Cofiler试剂盒及310型遗传分析仪(以下简称310)检验各类案件2000余起,简化了ABI公司推荐的检验步骤,节约了成本,缩短了检验时间,讨论分析常见问题并提出解决办法,使结果分析更为客观准确。

国产24通道法医遗传分析仪的研制

采用单波长固态长寿光纤分束激光器作为激发光源,基于激光诱导荧光检测和STR复合扩增技术,研制了首台国产24通道法医遗传分析仪,型号GA118-24B。该仪器满足24通道毛细管阵列空间校正功能需求,成功创建了DS-33和DS-36光谱校正文件,对Allelic Ladder、内标等标准品以及阳性对照9947A的复合扩增产物进行电泳检测,检测结果准确无误,分辨力达到1bp,可用于法庭科学的案件检测和数据库建设。

GA118-16A型遗传分析仪原理及展望

介绍一种16通道法医DNA检测仪器——GA118-16A型遗传分析仪。该仪器是国内研制成功的第一个法医DNA检测平台,它基于"激光诱导荧光检测"和荧光标记多基因座STR复合扩增检测技术,针对法医DNA鉴定应用进行了专门设计。该仪器主要用于个体识别和亲缘鉴定,可在侦查破案、查找被拐卖儿童和无名尸源、死亡案件的个体识别以及证实犯罪等方面发挥显著作用。

国产法医遗传分析仪的适用性研究

目的研究和分析"GA118-16A型"国产法医遗传分析仪对试剂盒和不同类型样本的适用性情况。方法由美国3130xl遗传分析仪和"GA118-16A型"国产法医遗传分析仪分别建立两个实验平台,使用国内外4种试剂盒分别对两个平台进行适用性检测。结果"GA118-16A型"国产法医遗传分析仪能适用于不同DNA标准物检测,16根泳道均一性良好;检测精确度小于0.15 bp的阈值标准;对不同试剂盒配套的阳性对照标准物分型准确,且适用于实际案件检材和建库样本的检测。结论"GA118-16A型"国产法医遗传分析仪对不同试剂盒和不同类型样本均有良好的适用性,仪器运行均一性和检测精确度达到了国外同类产品的性能水平。

国产遗传分析仪测试专用等位基因标准物的新型制备方法研究

利用定点突变技术,以D2S441基因座为靶位点,通过体外克隆重组的方法建立包含该STR位点重复单位为8-17的等位基因克隆库,调整模板的浓度后,采用荧光标记引物,对上述模板混合物进行复合模板PCR扩增,最终获得了高质量的等位基因分型标准物。测试结果表明,该方法制备的等位基因标准物可完全满足GA118-16A等国产遗传分析仪的测试和验证要求。

ABI PRISM^(TM) 3100型遗传分析仪最佳反应体系探讨

目的探讨ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的最佳反应体系,使DNA序列测定高效且经济。方法运用含有重组质粒的饱和大肠杆菌E.coli菌液,采取碱裂解法提取质粒。依据测序原理,分别通过调整模板量、BigDye Mix的用量和反应体系的体积来确定ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的最佳反应条件。结果针对该样本,测定DNA序列的最佳反应体系为:模板量100 ng,BigDye Mix 2μL,引物1.6 pmol,双重蒸馏水补足总体积为10μL。结论该反应体系保证了ABI PRISMTM 3100型遗传分析仪的测序质量,且大大节约了成本。

ABI310遗传分析仪自动检测多重聚合酶链反应扩增短串联重复序列产物及数据分析的应用特征

背景:以往聚合酶链反应产物检测多采用EB染色、银染色等技术,由于肉眼观察容易产生误差,尤其对片段长度差距较小、谱带位置相距较近的电泳图谱分析更加困难。目的:通过ABI310遗传分析仪检测多重聚合酶链反应扩增短串联重复序列产物,评价其数据分析的准确性。设计、时间及地点:2003-09/2004-01在四川农业大学分子遗传实验室完成。材料:凉山半细毛羊20只,取耳组织。方法:采用多重重聚合酶链反应扩增凉山半细毛羊基因组上的Y染色体上SRY,MCM158,MAF45和X染色体上MILVET09,AE25序列后,进行ABI310遗传分析仪检测。主要观察指标:5个基因座的基因型和片断大小。结果:通过ABI310遗传分析仪检测准确获得5个基因座的全自动分型结果和片断大小。结论:ABI310遗传分析仪检测多重聚合酶链反应扩增短串联重复序列产物,得到的数据准确可靠。

GA118系列遗传分析仪数据采集软件的设计和实现

GA118系列法医DNA专用检测平台包括GA118系列法医DNA遗传分析仪、法医DNA遗传分析仪配套耗材和数据采集软件。主要应用于法医DNA鉴定实验室,实现PCR产物的基因分型。用户通过此平台中的数据采集软件控制法医DNA遗传分析仪,实现DNA荧光光谱数据采集,生成通用数据格式的DNA数据文件,提供给后续的DNA分析软件使用。文章从整体的角度介绍了GA118系列数据采集软件,包括软件的总体设计思路、软件架构设计、软件接口设计、软硬件之间的通讯及控制方式、软件中各模块实现的功能说明等。

多通道遗传分析仪实验过程中常见问题解决方法探索

由于多通道遗传分析仪结构的精密和复杂性,其日常操作中时常会出现一些问题直接影响检测结果,以国产24道遗传分析仪结合国产毛细管阵列操作为例,列举了实验操作中此类仪器比较常见的几种问题,并提出了相应的解决方案,后续在各型号遗传分析仪中运用良好,对不同检材均能获得正确、完整的检验结果,验证了解决方案的广泛适用性和有效性,为多通道遗传分析仪的推广和使用提供实践参考。

国产法医DNA系列遗传分析仪在实战中的发展与完善

DNA遗传分析仪是开展法医DNA检验工作必不可少的核心仪器,公安部第一研究所研制的GA118系列遗传分析仪打破了国外技术垄断,实现了国产化替代。通过回顾国产遗传分析仪的研制及发展历程,分析国产遗传分析仪的现状和发展趋势,总结国产仪器研制过程中解决的关键技术,为大型精密仪器设备的国产化研制和应用提供借鉴。

国产与进口遗传分析仪法医DNA检验的比较分析

基于chelex法提取检材DNA,利用Identifiler Plus试剂盒扩增,使用GA118-16A型遗传分析仪及3130xl型遗传分析仪对102份血迹检材、208份脱落细胞检材和119份唾液检材进行检测。结果表明,GA118-16A型遗传分析仪对实际案件中不同类型检材的检出率均略低于3130xl型遗传分析仪,但两者准确度一致。GA118-16A型遗传分析仪仪器运行平稳,操作简单,检测能力接近国外同类型产品,基本满足公安机关日常检案需要。

法医DNA遗传分析仪毛细管阵列评价方法及实验比对

毛细管阵列是法医DNA遗传分析仪的关键耗材,影响着DNA检验的成败。通过空间校正评判阵列检测窗口性能;以LIZ500内标和Ladder为研究对象,确定重现性评价标准和RSD值;同时考察阵列分离效率,并检测扩增样品分型能力,旨在确定毛细管阵列品质评判的性能指标。实验证明,各项性能指标能够满足对毛细管阵列产品的评价需求,从而为其质量鉴定及在刑侦领域的实际应用提供理论依据和参考,并通过实际对比试验对国产毛细管阵列的应用推广提供了可信的数据支撑。

GA118-16A型遗传分析仪的法医学有效性验证

从毛细管空间校正能力、恒温炉温度、荧光标准物Matrix的生成、内标准确性、基因分型软件的测试及980份现场检材、3500份数据库样本的平行检测等方面,对国产遗传分析仪进行法医学有效性验证,结果表明其与国际同类产品性能一致,可用于法医科学的案件检验和数据库建设。

GA118-24B遗传分析仪性能验证

通过荧光定量实验选定一系列浓度不同的标准品,分别在国产和进口遗传分析仪上进行平行实验,结果表明二者之间无明显差异,国产遗传分析仪的主要技术指标能满足检案需求。

法医DNA遗传分析仪毛细管间信号串扰的研究

目的毛细管电泳是STR分型检验的主要技术手段,但多道毛细管的法医DNA遗传分析仪毛细管间有时会出现信号串扰,需要对此进行研究和分析应对。方法以具有24道毛细管的3500xL遗传分析仪为例,实验组:每次电泳,选择1个毛细管泳道对阳性样本的过量扩增产物进行电泳,1个毛细管泳道对等位基因Ladder进行电泳,其余22个毛细管泳道全部对空白对照进行电泳;对照组:选择1个毛细管泳道对等位基因Ladder进行电泳,其余23个毛细管泳道全部对空白对照进行电泳。结果过量阳性样本电泳时,其相邻的含空白样本的毛细管可以检测到峰值较低的串扰信号;去除阳性样本后,串扰信号消失。结论STR分型毛细管电泳检测过程中,相邻毛细管间可能会发生信号串扰。毛细管内的电泳样本过载时,相邻的空白样本或低浓度样本所在的毛细管可能会检测到峰值较低的串扰信号。荧光接收相关硬件的故障、空间校准的失败也有可能导致毛细管间低峰值串扰信号的产生。

GA118-16A型遗传分析仪在案件检验中的应用

2010年,国内首台具有自主知识产权的法医DNA检测仪研制成功,命名为"GA118-16A型遗传分析仪"。2017年8月,我中心正式在案件检验中试用GA118-16A型遗传分析仪,对上千份检材进行实际检验后,发现该仪器操作简单、方便,灵敏度、稳定性较好,基因分型结果完整准确、图谱清晰,可用于一线公安机关DNA实验室实际检案和数据库建设。

3100型遗传分析仪的应用和维护

随着分子生物学的发展,测序技术以及片断分析技术的应用越来越广泛。本文简要介绍了3100遗传分析仪的特点,并对3100遗传分析仪的正确使用及日常维护提出了自己的观点。