遗传性因子V缺乏症的基因研究

研究一个遗传性凝血因子 (FV)缺乏症重型患者的基因缺陷。方法 :采用 RT- PCR及 PCR技术 ,对先证者FV c DNA序列全长和基因组 DNA中第 11和第 13外显子的序列进行了 PCR扩增 ,PCR产物回收纯化后直接测序。结果 :对先证者 FV基因组 DNA的部分序列的 PCR扩增 ,经 DNA测序 ,发现有两个基因突变位点 ,其中 2 86 3G→ A为中性多态性位点 ,另一个 336 6 C→ G为同义突变。对先证者 FV c DNA序列全长进行分段扩增均未见目的条带。结论 :推测先证者 FV缺乏可能为 FV基因某种新的突变导致 m RNA不稳定或转录调控异常所致。

人血浆因子V蛋白免疫印迹分析及其临床应用

目的 建立人血浆因子Ｖ（ＦＶ）蛋白免疫印迹分析，对遗传性ＦＶ缺乏症家系成员血浆ＦＶ含量进行分析。方法 以３３％饱和硫酸铰从多克隆兔抗人ＦＶ抗血清中纯化ＩｇＧ，待测血浆行４％～１２％梯度的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，继之电转印至硝酸纤维膜上。结果 在３３０ ｋＤ附近，正常人混合血浆呈现一明显的条带，患者母亲对应条带的显色强度明显弱于正常对照，而患者则完全缺如，且未能检出其他较小的ＦＶ片段产物。结论 我们建立的人血浆ＦＶ蛋白免疫印迹分析法对于遗传性ＦＶ缺乏症的辅助诊断及分型具有重要作用。该家系属于Ｉ型遗传性ＦＶ缺乏。