陆地棉重组自交系再生能力和遗传转化效率筛选

转基因工程育种是棉花种质创新的有效手段,为了拓展陆地棉可再生基因型,丰富棉花转基因受体,本研究以湖北省高产阔叶棉品种‘鄂棉22’(E22)为母本、高再生能力的鸡脚叶品种‘豫早1号’(YZ1)为父本,通过单籽传法构建了F9重组自交系群体(YE);利用棉花中比较成熟的IBA+KT(IK)和2,4-D+KT(DK)2种不同激素组合的培养体系,分别对重组自交系群体的164个家系的愈伤组织诱导率(CIF)、愈伤组织继代繁殖力(CSC)、愈伤组织的出胚率(CRE)以及愈伤组织出胚时间(CET)进行比较,共获得12个可再生的阔叶棉家系;利用目前成熟的棉花遗传转化体系对可再生阔叶棉家系进行遗传转化效率分析,同时对其进行田间农艺性状考察,最终获得了一个遗传转化效率为82.9%并且农艺性状更优良的家系YE3。本研究为棉花的遗传转化及基因功能研究拓展了陆地棉基因型种质资源。

影响发根农杆菌对野葛遗传转化效率的因素

研究了发根农杆菌R16 0 1对野葛 (Puerarialobata)进行遗传转化的影响因素 .结果表明 :叶片是转化效率较高的外植体 ,经发根农杆菌R16 0 1感染 12d后可获得毛状根 ;降低YEB活化液的pH值 ,或以肌醇 (10g L)代替酵母提取成分 ,可明显提高菌种的致根性 ;叶片预培养 2～ 3d可提前 3～ 4d出根 .表 5参

酚类化合物对大白菜遗传转化效率的影响

以大白菜纯合系河头早B为试验材料,用携带质粒pBinΩSCK的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404转化其无菌苗子叶,比较了8种酚类化合物对大白菜遗传转化效率的影响.结果表明,乙酰丁香酮和邻苯二酚对外植体的转化频率影响最大;阿魏酸和ρ-羟基苯甲酸的作用次之;芥子酸和焦性没食子酸有一定的促进作用;香草醛和丁香酸没有明显的作用.复合酚类化合物的促进作用优于单一酚类化合物的作用.

光照条件和共培养时间对大豆的遗传转化效率影响研究

选取不同大豆基因型的胚尖、子叶节和下胚轴为受体材料,运用农杆菌介导法转化GUS基因,通过对GUS基因瞬时表达率的比较,探讨大豆遗传转化的主要影响因素(光照条件和共培养时间等),以寻找适宜农杆菌和外植体的平衡点,并进一步对遗传转化条件进行优化。结果表明:提供10~16h·d-1光照均提高了转化效率,与完全黑暗差异显著;延长共培养时间,显著提高转化效率,以7~10d为宜。该结果对提高大豆的遗传转化效率有重要参考价值。

阿尔巴利诺葡萄（Albarifio）细胞悬浮培养中细胞生长曲线、营养消耗及遗传转化效率之间的相互关系

葡萄胚细胞悬浮被认为是进行遗传转化的最佳材料。然而，细胞悬浮液进行成功遗传转化的最佳阶段和生长时期并没有被研究过。研究人员利用4周的时间逐步启动和建立起了阿尔巴利诺葡萄细胞悬浮系统。在细胞悬浮培养18d中，试验测定了细胞的生长动力学曲线、细胞活力、

植物遗传转化新技术和新方法

目前通过遗传转化技术获得了许多植物的转基因植株,一些重要农作物转基因新品种已进入产业化阶段,展现出极好的应用前景。但随着研究的不断深入,在如何提高遗传转化效率和转基因安全性等方面,一些新的技术和方法不断出现并得到应用,如胚状体再生系统、叶绿体转化系统、超声波辅助农杆菌介导法、位点特异重组MATvector系统、正选择系统以及新的转基因分子检测方法,使遗传转化技术向高效、安全方向发展,新一代的转基因植物也将会更适应人们和生态环境的需求。

离子注入水稻愈伤组织提高农杆菌转化效率的初步研究

通过 GUS报告基因表达的组织化学染色分析 ,我们发现低能氮离子束注入水稻愈伤组织可显著提高根癌农杆菌介导转基因效率 ,这为克服单子叶植物对根癌农杆菌不敏感性、提高遗传转化效率的研究提供了一条新的途径。

花生遗传转化影响因素研究

研究表明,农杆菌介导花生外源基因遗传转化过程中影响转化效率的因素较多。本文在实现花生外源基因遗传转化的基础上,针对所利用的丛生芽、胚轴和子叶外植体等受体材料,就遗传转化中涉及的预培养时间、侵染时间、共培养时间等处理因素对转化效率的影响进行深入探讨,以探索提高花生遗传转化效率的方法和途径,为该领域研究提供理论依据和技术参考。

阿莫西林在农杆菌介导甘蓝型油菜遗传转化中的使用和优化

旨在寻找一种应用于农杆菌介导的甘蓝型油菜转化体系中能替代羧苄青霉素(Carb)和头孢霉素(Cef)的高效抗生素。以甘蓝型油菜杂交种青杂5号的恢复系"1831R"为试验材料,对苗龄4~5 d的下胚轴进行侵染,培养并观察抑菌效果、芽再生状况以及对转化效率的影响。结果表明,较高浓度(500~600 mg/L)处理下,4种抗生素[Carb、Cef、特美汀(Tim)、阿莫西林(Amo)]都可以很好地抑制农杆菌的生长,浓度低于500 mg/L时,抑菌效果由大到小为Carb>Amo>Cef>Tim。随着4种抗生素浓度的增加,芽再生率呈先增加后降低趋势,300 mg/L时达到最大,且在相同浓度下,芽再生率由大到小为Amo>Carb>Tim>Cef。经草甘膦抗性筛选及PCR检测,转化体系中使用Amo的转化效率为1.9%,比Carb、Cef转化效率分别高58.33%、90.00%。因此,阿莫西林在有效脱除农杆菌的同时,对芽再生的抑制作用最小,并具有较高转化效率。本研究对提高农杆菌介导的油菜遗传转化效率、加快油菜种质资源创新将具有重要的作用和意义。

影响农杆菌介导大豆子叶遗传转化的条件

本试验对影响农杆菌介导大豆遗传转化的条件，包括种子活力、选择体系和共培养条件进行了研究。试验结果表明种子消毒时间与种子活力呈负相关，种子活力与外植体再生率呈正相关，这说明采用最短的消毒时间和高活力种子能提高遗传转化效率。我们评价了采用glufosinate和bialaphos作离体选择剂的试验，与bialaphos相比，Glufosinate选择能提高大豆遗传转化效率。

葡萄高效再生体系的建立及转LEAFY基因的研究

采用葡萄茎段为外植体建立起高频再生体系 ,随后建立了农杆菌介导的葡萄主栽品种玫瑰香的稳定遗传转化体系 ,获得了转基因植株 .将携带拟南芥菜 LEAFY基因的 p DC2 0 2载体转化到农杆菌菌株 GV310 3中 ,与茎段共培养 3d后 ,在附加利福平的培养基 GS+ZT(2 .0 mg/ L)上选择培养 4周 ,经压力选择培养初步筛选到转基因植株 ,且可以直接获得生根转化试管苗 ;从初步鉴定的转化植株上选取健壮幼嫩的新叶作为材料 ,提取葡萄基因组 DNA,借助 PCR、Southern杂交等分子生物学手段进一步鉴定 ,结果表明 LEAFY基因已成功整合到葡萄染色体 DNA上 。

CRISPR基因编辑技术加速蔬菜作物遗传改良

现代生物技术,特别是基于CRISPR/Cas系统的基因编辑技术,对作物遗传改良产生了深远影响。本文综合分析了CRISPR/Cas基因编辑系统的组成、机制,综述了基因编辑技术在蔬菜作物基因功能验证和作物遗传改良方面取得的突破性进展,及其在蔬菜作物如番茄、西瓜、甘蓝、胡萝卜和黄瓜等中的应用。CRISPR/Cas基因编辑系统是目前应用最广泛的基因编辑系统,为了加深对CRISPR/Cas基因编辑系统的了解、促进其在蔬菜作物改良中的重要作用,本研究探讨了影响遗传转化效率的因素,提出了提高转化效率的策略,讨论了当前技术的局限性,如作物转化再生难度和基因型的依赖性。本文强调,筛选易于遗传转化的品种、开发高效的植物转化和再生系统,以及创造更高效、精确和多功能的基因编辑工具是未来研究的关键方向。

根癌农杆菌介导的黄瓜转基因研究进展

黄瓜Cucumis sativus是世界性的重要蔬菜作物。农杆菌介导的转基因技术是研究植物基因功能及品种改良的重要手段。为进一步加快黄瓜的转基因研究和育种进程,文中针对农杆菌介导的黄瓜遗传转化方法,从黄瓜再生能力的影响因素、遗传转化条件和过程中各类添加物质等方面,阐述了根癌农杆菌介导的黄瓜转基因研究进展及存在的问题,并对提高黄瓜遗传转化效率和安全筛选标记的应用等前景进行了展望,以期为黄瓜抗逆育种和果实品质改良等研究提供参考。