农杆菌介导不同基因型大豆品种子叶节遗传转化条件的研究

以黑农46、黑农53和黑农56的子叶节为转化受体,对农杆菌介导大豆子叶节遗传转化中的6-BA浓度、草丁膦浓度、侵染时间、共培养时间以及伸长培养基进行筛选,确定适合不同基因型的最佳转化条件。结果表明:黑农46、黑农53和黑农56的最佳6-BA诱导浓度分别为1.7、1.6和1.7 mg.L-1;最佳草丁膦筛选浓度分别为2.0、3.0和2.0 mg.L-1;同时确定了侵染时间、共培养时间和伸长培养基类型的最佳组合是侵染时间25 min、共培养时间3 d和Ⅲ型伸长培养基。

农杆菌介导的小麦遗传转化条件的研究

利用来自小麦花药、幼胚愈伤组织和带有GUS基因的Ti质粒，对农杆菌转化小麦的条件进行了初步研究，证实适当浓度的乙酰丁香酮是诱发T－DNA转移的必需条件，其最低有效浓度为50μmol／L．在20～35℃，pH5．2～6．8条件下，均可有效诱导T－DNA的转移．农杆菌菌液密度以108ml－1细胞为宜，添加适当的表面活性剂有促进T－DNA转化的作用．对4种小麦材料的研究证明，T－DNA的转移效率常因受体材料基因型的不同而有很大差异；愈伤组织的活力与T－DNA转移的效率有密切关系．显微观察发现，胚状体细胞比非胚状体细胞群更容易发生转化．