那如三味片防治类风湿性关节炎的有效成分预测与靶点通路分析

目的 本研究通过系统药理学方法和分子对接技术探讨那如三味片治疗类风湿性关节炎的有效成分、靶点及通路。方法 通过多个化学和天然产物数据库联合检索建立那如三味片成分和其作用靶点集合,并以此筛选类风湿性关节炎相关靶点,通过IPA软件预测那如三味片治疗类风湿性关节炎活性成分的作用通路和分子机制,对潜在靶点进行核心分析、网络构建,对交联度较高的化合物进行分子对接。结果 药-靶网络分析结果表明,从那如三味片各组成成分(草乌、诃子、荜茇)中筛选得到33个活性成分,对应靶点172个,其中涉及类风湿性关节炎靶点124个。利用IPA软件构建那如三味片治疗类风湿性关节炎的网络关系图,预测出47个那如三味片治疗类风湿性关节炎的作用靶点及各成分中有抗类风湿性关节炎作用的活性成分。这些作用靶点主要包括细胞/生长因子——CXCL8、TNF、IL6、IL10等;G蛋白偶联受体——ADRA2A、ADRA2B、ADRB2、ICAM1等;转运体——SLC6A3、SLC6A4等;代谢酶——MAOA、MAOB、CYP1A2等。分别对作用靶点进行Diseases and Functions和Pathway分析,得出作用靶点主要关联神经性疾病、组织损伤和畸形、心理障碍、炎症疾病、免疫调节失调等疾病,并且主要参与了5-羟色胺受体信号通路(HTR1B、HTR3A、SLC6A4、MAOA)、G-蛋白偶联受体信号通路(ADRA2B、HTR1B、CHRM1、ADRA1D)、磷酸腺苷活化蛋白激酶信号(ADRA2B、CHRM1、ADRA1D)等。这些生物过程和信号通路介导了那如三味片治疗类风湿性关节炎潜在机制。结论 利用系统药理学通过多种数据库与统计分析软件可以有效预测与分析药物的潜在作用与起效机制,为进一步深入研究那如三味片治疗类风湿性关节炎作用机制提供了重要依据。

蒙药那如三味片的质量标准研究

目的：对蒙药那如三味片中毒性药材及功效成分进行量化控制，为该制刺安全性、有效性提供控制依据。方法：采用薄层定量法对方中制草乌的毒性成分乌头碱进行定量控制，采用高效液相色谱法对方中荜茇的有效成分胡椒碱进行定量控制。结果：乌头碱可有效控制在安全剂量范围内，胡椒碱含量在0．1460～0．7300μg范围内呈良好的线性关系（r=0．9998）。结论：本法灵敏，准确，专属性强，重现性好，可作为该制剂的质量控制方法。

那如三味片药材提取工艺研究

目的:研究那如三味片药材提取的最佳工艺。方法:以草乌生物碱转移率为指标,采用正交设计法优选制草乌、荜茇、诃子药材提取的最佳工艺条件。结果:优选出的最佳提取工艺为70%乙醇加热回流提取2次,第一次2h,第二次1h,每次溶剂用量为8倍药材量。结论:确定了那如三味片药材提取的最佳工艺,为那如三味片的制备工艺及质量控制提供依据。

那如三味片对大鼠创伤性脊髓损伤后炎症作用的影响及相关机制研究

目的观察那如三味片(Naru-3)对创伤性脊髓损伤大鼠炎症作用的影响,并探讨相关机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、甲基泼尼松龙(MP,30 mg/kg)组和Naru-3低、中、高剂量(10、20、30 mg/kg)组,每组12只。假手术组仅进行手术暴露,不进行打击;其他组别采用Allen’s打击法建立大鼠脊髓损伤模型。术后30 min各组ig给药,假手术组和模型组ig等体积生理盐水,每天1次,连续21 d。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和western blotting法检测脊髓组织中白介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和蛋白的相对表达量;ELISA法检测血清中IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白含量;免疫组织化学法确定脊髓组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)定位及表达;流式细胞术分析脊髓组织M1及M2表型巨噬细胞比例。结果与模型组比较,Naru-3、MP显著减少血清中IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白含量,显著减少脊髓组织IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA、蛋白水平(P<0.05、0.001),Naru-3作用呈剂量、时间相关性;免疫组织化学结果显示,与模型组比较,Naru-3、MP可以明显减少脊髓中MCP-1表达;流式细胞术结果表明,与模型组比较,Naru-3、MP显著诱导M1表型巨噬细胞分化为M2表型(P<0.001)。结论 Naru-3可以有效降低脊髓损伤引起的炎症反应,机制与诱导M1表型巨噬细胞分化为M2表型相关。