邪毒壅盛证H_(22)荷瘤小鼠肿瘤组织基因的表达特征研究

目的揭示H22荷瘤小鼠邪毒壅盛证肿瘤组织基因表达的特征。方法采用GeneChip Mouse Exon 1.0 STArray等技术及芯片分析方法,观察H22荷瘤小鼠邪毒壅盛、早期气虚、中期阳气虚及中晚期气阴阳虚证肿瘤组织基因表达的差异。结果筛选到邪毒壅盛证独特性高表达的基因32个,其中包括Tcte3、Phf7、Ldhc等参与睾丸发育、精子或卵子发生的基因22个,Adipoq、Nrcam、Tnfaip6等与肿瘤有关的基因4个,以及Atp8b3、Pnpla3、Retn等其他功能的基因6个。筛选到邪毒壅盛证独特性低表达的基因2个,有Cort和LOC668417。结论邪毒壅盛证H22荷瘤小鼠肿瘤组织中存在大量独特性表达的基因,可能是该证候与其他证候区别的内在特征。

邪毒壅盛证和气虚证荷瘤小鼠垂体上调与下调的基因

目的:揭示荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证与气虚证垂体基因表达的差异。方法:采用小鼠标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证3阶段4个证候垂体的基因表达,筛选邪毒壅盛和气虚两证候垂体基因表达与正常比较一致上调或下调的基因。结果:①邪毒壅盛证和气虚证垂体表达上调的基因有5个,其中邪毒壅盛证Alas2、Sgk、Cbln3表达高,十分突出,可能与该证候形成有关;②邪毒壅盛证和气虚证的垂体有13个基因表达几乎关闭,其中Abpg、Pip,以及Car6、Klk1b22、Klk1b3、Klk1b9、Muc10、Ren1、Hspa1a、Wfdc12等基因在正常组表达量大。结论:荷瘤小鼠垂体早期出现显著的衰退表现,而个别基因表达的增加,可能与邪毒壅盛有关。

乳酸脱氢酶C_4在早期邪毒壅盛证荷瘤小鼠肿瘤组织中的表达及意义

目的探讨乳酸脱氢酶C4(LDH-C4)在邪毒壅盛证荷瘤小鼠肿瘤组织的表达水平及其意义。方法采用Affy-metrix Gene Chip Mouse Exon 1.0 ST Array及其方法检测乳酸转运和氧化相关基因在H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛、早期气虚、中期阳气虚及中晚期气阴阳虚证肿瘤组织基因表达的差异,芯片重复两次;并采用实时荧光定量PCR对两种高乳酸亲和力的脱氢酶基因Ldhb和Ldhc在各种证候中的表达量进行检测。结果乳酸转运相关基因的表达要高于氧化相关基因,尤其以H22接种后早期最明显;Ldhb基因的表达在H22接种后早期、中期和晚期变化不明显,而Ldhc基因在H22接种后早期气虚、中期和晚期的表达也不明显,且与Ldhb表达量相近,但它在早期邪毒壅盛证荷瘤小鼠肿瘤组织中表达量显著升高。结论在荷瘤小鼠肿瘤组织中,尤其是H22接种后早期,肿瘤细胞产生的乳酸作用不仅在于氧化产能;LDH-C4可能代替LDH-B4参与了早期邪毒壅盛证荷瘤小鼠肿瘤组织缺氧肿瘤细胞的代谢拯救途径。

邪毒壅盛证H_(22)荷瘤小鼠胸腺独特上调的高表达基因

目的观察邪毒壅盛证荷瘤小鼠胸腺基因表达的特征。方法综合采用荷瘤小鼠及其标准化辨证方法,采用Gene-Chip Mouse Exon 1.0 STArray检测不同证候H22荷瘤小鼠胸腺组织基因的表达,并分别筛选2006年及2009年两批数据中邪毒壅盛证独特高表达的基因,进行理论研究。结果 2006年、2009年早期邪毒壅盛证荷瘤小鼠胸腺组织一致独特上调的基因108个,取各自最高表达的15个基因,有8个重叠:Trim30、Sept6、Mcm3、Supt16h、Vps35、Smc3、Rsl1d1、Pa2g4,另分别有Smc1a、Eif3s10、Phf6、Sesn1、Iws1、Lin7c、Itch,以及Tax1bp1、Ifi204、Pnn、Ptbp2、Ascc3、Ddx10、Luc7l2等非重叠基因,这些基因主要涉及细胞的增殖、基因的表达与调控。结论邪毒壅盛证荷瘤小鼠胸腺高表达的基因多涉及促进基因的表达与复制,这与该证候肿瘤增长迅速相关,提示胸腺尚处于被动且积极的免疫代偿状态;鉴于与邪毒壅盛证同期的气虚证,以及与其它对照比较,这些基因独特上调,提示荷瘤小鼠同病异证在胸腺层面是有其物质基础的。

邪毒壅盛和气虚证H22肝癌荷瘤小鼠肾上腺基因转录的差异

目的揭示H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证肾上腺基因表达的特征。方法采用小鼠标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共4个证候肾上腺基因表达的差异,重点关注早期2个证候表达量大、差异显著的基因。结果①筛选邪毒壅盛证上调和下调基因20条和7条,气虚证上调和下调基因4条和7条。②邪毒壅盛证上调的基因涉及到信号转导与免疫应答的Pomc1、Tnfaip6、Ccrl2、Rgs1等,调控转录的Bhlhb2、Ell2、Atf3、Hivep2、Klf4等,参与代谢调节的Usp37、Chka、Dusp10等;邪毒壅盛证下调基因有Hbxip、H2-T22、Ndufs6,Tgfb1、Mgat4b、Cdkl3等。③气虚证独特上调基因有Pde10a、Ol-fr1305、Olfr46、Cyp3a13等;气虚证独特下调基因涉及到激素类Gh、Pomc1、Prl、Cga和原癌基因Junb。结论荷瘤小鼠邪毒壅盛证和气虚证肾上腺存在大量基因表达的改变,这可能是证候内在的本质之一。

不同证候荷瘤小鼠睾丸差异表达基因的特征

目的:观察荷瘤小鼠肿瘤发生后不同阶段4个常见证候睾丸独特上、下调的基因。方法:采用荷瘤小鼠及其标准化四诊与辨证方法,及GeneChip Mouse Exon ST 1.0 Array等技术,检测早期邪毒壅盛证及气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证睾丸基因的差异表达,重点关注那些表达较高的基因。结果:共捡出独特上调和下调的基因28个,其中有5个基因在不同证候中上下调不一致。肿瘤发生后早期邪毒壅盛证上调的基因8个:AbPg、Pip、Muc10、Car6、2310057J18Rik、Klk1b3、Klk1、Wfdc12,下调的基因5个:Spcs1、Dtx3、Rasa3、Sec11l3、F5;早期气虚证上调的基因4个: Gpx5、Wbp5、Lcn5、Apls2,下调的基因1个:Klklb26;中期阳气虚证无上调基因,下调基因3个,分别为Klk1b27、Spag5、Gpx5(在早期气虚证上调);中晚期气阴阳虚证上调基因2个,分别为Saa3、S100a8,下调基因5个;Abpg、Pip、Muc10、Car6、Cuzd1(前4个在邪毒壅盛证上调)。结论:荷瘤小鼠在早期阶段,邪毒壅盛证与睾丸基因表达的紊乱关系较为密切;中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证睾丸基因以下调为主,提示中、晚期虚实夹杂证的荷瘤小鼠其睾丸功能下降。

甲型H1N1流行性感冒47例的中医诊疗与临床证候分析

目的 通过分析甲型H1N1流行性感冒病例的中医临床证型特征和治疗特点,探索其最佳治疗措施。方法 对2009年5月至7月成都地区收治的47例甲型H1N1流行性感冒确诊病例进行中医动态观察和辨证论治并总结其中医证型特征和治疗特点。其中30例给予奥司他韦抗病毒联合中医辨证治疗;13例采用单纯中医辨证治疗,未使用奥司他韦;2例患者单用奥司他韦治疗;另2例患者仅给予对症治疗,未使用奥司他韦或中药。结果 47例患者临床表现局限于中医"温病"卫气分阶段,分风温袭表证(36例/76.6%),湿温证(8例/17%),邪入气分、热毒壅盛证(3例/6.4%)三种证型。所有患者痊愈出院。结论 成都地区夏季甲型H1N1流行性感冒病例病情较轻,无重症患者;单纯中医治疗和(或)奥司他韦治疗均有效,中西医结合疗法具有优势。