邻苯二甲酸酯染毒哺乳期母鼠对雄性仔鼠睾丸Leydig细胞形态及功能的影响

目的:观察邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对哺乳期雄性仔鼠睾丸子Leydig细胞(PLC)形态和功能的影响及作用机制。方法:SD孕鼠20只,随机均分为4组(n=5):正常对照组,低剂量组,中剂量组,高剂量组。仔鼠出生第1天起分别以0、10、100、750 mg/(kg·d)DEHP灌胃染毒母鼠,直到仔鼠出生后21 d。用化学发光法检测雄性仔鼠血清睾酮(T)水平;测量体重、睾丸重量、肛生殖器距离(AGD);光镜及电镜下观察睾丸Leydig细胞形态结构;免疫组化方法检测睾丸类固醇激素合成急性调节蛋白(St AR)表达;Real-time PCR法检测睾丸胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)mRNA的表达。结果:与正常组比较,低剂量组T无明显变化,中、高剂量组血清T水平明显降低(P<0.01)。低剂量组睾丸重量增加(P<0.05),高剂量组睾丸重量、仔鼠体重明显下降(P<0.01);中、高剂量组AGD明显缩短(P<0.01)。低剂量组睾丸Leydig细胞明显增生,呈簇状分布;中、高剂量组睾丸Leydig细胞灶区轻度增生,高剂量组部分生精小管生精细胞层次减少、生精细胞凋亡并脱落。电镜观察各给药组Leydig细胞胞浆脂质颗粒减少,线粒体、内质网减少。低剂量组IGF-ⅠmRNA表达增高(P<0.05);中、高剂量组睾丸St AR蛋白表达降低(P<0.05)。结论:哺乳期染毒DEHP可干扰仔鼠PLC的睾酮合成,St AR蛋白的降低和Leydig细胞的损伤可能是其机制。

DEHP对雄性仔鼠胚胎Leydig细胞雄激素合成的影响

目的:研究邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对雄性仔鼠胚胎Leydig细胞(FLC)雄激素合成的影响。方法:DEHP分别以低、中、高3组剂量(10、100、750 mg.kg-1.d-1)灌胃作用于怀孕12 d到产后1 d(GD12-PND1)的SD母鼠,观察DEHP对雄仔鼠血清睾酮(T)水平、睾丸FLC形态结构、睾丸FLC的类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)及胰岛素样生长因子1(IGF-I)mRNA的相对表达量(ΔΔCT法)。结果:低剂量组血清T水平显著高于对照组(P<0.01);而中、高剂量组血清T水平显著低于对照组(P<0.05)。光镜下低剂量组可见间质细胞聚集呈簇分布,中剂量组与高剂量组均可见间质细胞呈瘤样增生。电镜示低剂量组间质细胞椭圆形、长梭形,脂质颗粒减少,线粒体、滑面内质网丰富。中、高剂量组间质细胞呈梭形或椭圆形,大小不一,核大、圆,胞浆丰富,细胞聚集一起,胞质内可见丰富的脂质颗粒,脂质颗粒染色深,滑面内质网及线粒体扩张。高剂量组睾丸FLC的StAR mRNA的相对含量显著低于对照组(P<0.01)。低剂量组睾丸FLC的IGF-Ⅰ mRNA相对含量显著高于对照组(P<0.01)。结论:DEHP对新生雄性仔鼠睾丸FLC有毒性作用,可影响雄性仔鼠睾丸FLC的形态学及其生成类固醇的能力。其可能机制是低剂量DEHP宫内暴露后,促进睾丸FLC的IGF-ⅠmRNA表达从而引起血清睾酮升高,而高剂量DEHP可能通过抑制睾丸FLC StAR mRNA表达从而降低血清睾酮水平。

DEHP对新生雄性仔鼠毒性作用的实验研究

目的探讨邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对新生雄性仔鼠毒性作用及机制。方法 DEHP分别以低、中、高3组剂量[10、100、750mg/(kg.d)]灌胃作用于怀孕12天到产后21天(GD12～PND21)的SD母鼠,观察DEHP对产后1天(PND1)及产后21天(PND21)雄性仔鼠体重、睾丸重量、肛生殖器距离(AGD)和其对胚胎Leydig细胞形态结构、促黄体生成素受体(LHR)及类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)的蛋白表达水平的影响。结果 PND1中、高剂量组雄仔鼠的体重下降明显,分别与对照组和低剂量组相比较均有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸重量下降明显,与对照组相比较有显著性差异(P<0.05);中、高剂量组雄仔鼠的AGD均有不同程度缩短,与对照组和低剂量组相比缩短均有显著性差异(P<0.01)。PND21中、高剂量组雄仔鼠的体重下降明显,分别与对照组和低剂量组相比均有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸重量下降明显,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);中、高剂量组雄仔鼠的AGD缩短明显,分别与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。光镜下低剂量组可见胚胎Leydig细胞(FLC)聚集呈簇分布,中剂量组与高剂量组均可见胚胎Leydig细胞呈瘤样增生。电镜示低剂量组Leydig细胞椭圆形、长梭形,脂质颗粒减少,线粒体、滑面内质网丰富。中、高剂量组Leydig细胞呈梭形或椭圆形,大小不一,核大、圆,胞质丰富,细胞聚集一起,胞质内可见丰富的脂质颗粒,脂质颗粒染色深,滑面内质网及线粒体扩张。中、高剂量组睾丸FLC的LHR蛋白表达明显减弱,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸FLC的StAR蛋白表达减弱明显,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论 DEHP对新生雄性仔鼠具有毒性作用,其可能机制是DEHP宫内暴露后,抑制睾丸FLC的LHR蛋白和StAR蛋白的表达从而影响睾丸的发育。