固相萃取-气相色谱-质谱法分析尿液中邻苯二甲酸单酯和双酯

建立了固相萃取-气相色谱-质谱测定尿液中邻苯二甲酸单酯和双酯的分析方法。尿液经β-葡萄糖苷酸酶酶解后进行固相萃取净化,用乙腈、乙酸乙酯和乙醚-正己烷（1∶19,v/v）分别洗脱,合并洗脱液,氮气吹干后,用N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）对邻苯二甲酸单酯进行硅烷化处理,使用气相色谱-质谱法检测。邻苯二甲酸单酯和双酯的线性范围为5-1 000μg/L,检出限为0.3-1.1μg/L,回收率为77.9%-97.7%,相对标准偏差为3.7%-10.9%。应用该方法对50份尿液进行检测,检出邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）等7种邻苯二甲酸单酯和双酯类物质,平均质量浓度为6.0-142.7μg/L。该方法准确、可靠、灵敏度高,适用于尿液中邻苯二甲酸单酯和双酯的同时测定。

十二醇聚氧乙烯(9)醚邻苯二甲酸单酯钠盐的合成研究

采用正交试验法对合成十二醇聚氧乙烯(9)醚邻苯二甲酸单酯钠盐的工艺条件进行优化选择。结果表明,酯化反应最佳条件是在氮气保护下,以对甲苯磺酸为催化剂,其用量占原料总量的0.1%,原料十二醇聚氧乙烯(9)醚与邻苯二甲酸酐的摩尔比1:1.05,温度130℃,反应时间2.5 h,酯化率达96.92%;中和反应最佳条件是中和时间40 min,温度75℃,氢氧化钠水溶液含量30%。对十二醇聚氧乙烯(9)醚邻苯二甲酸单酯钠盐的表面活性性能进行了测定,结果表明,该产品具有优良的润湿性和乳化性等。

月桂醇聚氧乙烯(3)醚邻苯二甲酸单酯钠盐的合成与性能

在过渡金属有机酸盐复合催化剂作用下 ,使月桂醇聚氧乙烯 (3 )醚与邻苯二甲酸酐单酯化后经 Na OH中和 ,合成了新型表面活性剂月桂醇聚氧乙烯 (3 )醚邻苯二甲酸单酯钠盐 (PAES)。反应最佳条件为酯化 :醚 /酐 (摩尔比 )为 1∶ 1 .0 5 ,催化剂用量 (对醚 )为 0 .88g/mol,反应温度 1 40℃ ,反应时间 6h;中和 :反应温度 80℃ ,反应时间 0 .5 h。 PAES收率≥ 95 % ,总固体质量分数 3 5 .0 % ,对

烷基多苷邻苯二甲酸单酯钠盐的合成与性能研究

以烷基多苷(APG)为原料,用邻苯二甲酸酐单酯化后经NaOH中和,合成了标题化合物(PAPGS),对溶剂用量、催化剂种类和用量、反应温度、反应时间、原料配比等条件进行了探讨,在优化的实验条件下获得了81.33%的收率,经提纯后PAPGS的纯度可达93.20%;同时对产物的各项性能进行了测定和说明,测定结果表明PAPGS为比较优良的阴离子表面活性剂。

蔗糖邻苯二甲酸单酯的合成研究

采用TLC跟踪反应,对蔗糖邻苯二甲酸单酯的合成方法进行了系统研究。实验以蔗糖与邻苯二甲酸酐为原料,以氢氧化钾为催化剂,在室温反应3 h,得到了标题化合物,产率62%。

天津市孕妇胎盘中邻苯二甲酸单酯的分布特征

作为母体与胎儿间物质传递的重要器官,胎盘中化学品的分布特征可反映妊娠期胎儿对污染物的宫内暴露特征,并可作为评价胎儿暴露状况的一个重要指标.本研究在天津市共采集了78个孕妇胎盘样品,利用HPLC-MS/MS测定了孕妇胎盘中11种邻苯二甲酸单酯(phthalate metabolites,m PAEs)的含量,分析了其组成特征,并通过Spearman相关性分析探究了各m PAEs性质和社会人口统计学特征对胎盘中m PAEs含量的影响.本研究所检出5种m PAEs,分别是3-羟丙基邻苯二甲酸单酯(mono-(3-carboxypropyl)phthalate,MCPP),邻苯二甲酸单丁酯(mono-(n-butyl)phthalate,MBP),邻苯二甲酸单异丁酯(mono-(2-isobutyl)phthalate,Mi BP),邻苯二甲酸单乙酯(mono-ethyl phthalate,MEP)和邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP).胎盘中∑m PAEs含量中值(范围)为3.23(0.0138—17.8)ng·g^(-1)dry weight.不同种类m PAEs含量的Spearman相关性分析结果表明,Mi BP和MBP之间具有强相关性(r=0.804,P<0.01),这是由于它们具有相似的来源——其母体化合物互为同分异构体.同时,MBP和MCPP之间具有较强的相关性(r=0.292,P<0.05),这进一步印证了人体内部分MCPP是由MBP转化来的.胎盘中m PAEs含量与所选择社会人口统计学特征间无相关性(P>0.05),而与lg K_(ow)则显著相关(P<0.05),m PAEs在胎盘中的分布除了与化合物性质有关,还受到母体化合物用量、人体暴露、体内分布与代谢等多因素联合影响.

十二醇邻苯二甲酸单酯钠的合成与性能研究

采用十二醇和邻苯二甲酸酐经酯化和中和反应得到十二醇邻苯二甲酸单酯钠(PAS12),并通过1 H NMR确定了其分子结构。PAS12的Krafft温度为16.4℃,与十二酸钠(SL,15.5℃)相近,明显低于十六酸钠(SP,57.4℃);与SL相比,cmc(PAS12)<cmc(SL),γcmc(PAS12)<γcmc(SL),σcmc(PAS12)<σcmc(SL),PAS12的乳液稳定性、耐受Ca^2+、发泡力和泡沫稳定性更好,其原因可能是PAS12分子结构中位于亲水基(-COONa)和疏水基(C 12 H 25-)之间的苯环和酯键片段增加了PAS12疏水基的有效长度,且苯环和酯键片段同时兼具部分亲水性和疏水性,为PAS12分子本身的极性从强极性(-COONa)向弱极性(C 12 H 25-)转换提供过渡,有利于PAS12有效地降低气-液和液-液界面张力;再加上苯环上二羧酸邻位取代结构使得PAS12更好地耐受Ca^2+。因此,PAS12具有较好的低温水溶性、较低的表(界)面张力、良好的乳化性能、泡沫性能和一定的耐硬水性质。

超声萃取—液相色谱—质谱法测定人体血液中8种邻苯二甲酸单酯化合物

目的 建立人血清中8种邻苯二甲酸单酯(MPEs)的超声辅助-液液萃取-液相色谱-串联质谱联用测定方法,并用于广州市普通人群血液中MPEs的调查分析。方法 血清样品经乙腈沉淀蛋白后,采用不同极性混合溶剂超声辅助液液萃取,基质匹配内标法定量。实验比较了不同提取溶剂及其比例、色谱条件和质谱条件对8种MPEs测定的影响。结果 8种MPEs在0.2 ng/ml~100 ng/ml浓度内线性关系良好,相关系数(r)>0.99;检出限为0.002 ng/ml~0.10 ng/ml;定量限为0.007 ng/ml~0.30 ng/ml。8种MPEs在4个加标水平下的回收率为85.7%~114.5%,日内、日间RSD均<10%。采用本方法测定了广州市普通人群血清中的8种MPEs,∑8MPEs暴露水平为(114.3±222.8)ng/ml。MEHP、MiBP和MnBP为主要MPEs。结论 本方法准确、快速、简便,可准确测定人体血液中8种MPEs。广州市普通人群血清中MPEs测定结果表明,广州市居民存在广泛的邻苯二甲酸酯暴露,需引起一定的关注。

邻苯二甲酸单乙基己基酯暴露对肝脏脂质代谢的影响及调控机制

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)是一种重要的内分泌干扰物,对神经系统、生殖系统、内分泌系统等都具有特定的损伤作用.DEHP被机体摄入后,在肝脏和肠道中被消化酶代谢为邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)以发挥毒性作用.本研究采用体外HepG2暴露结合mRNA芯片以及生信分析的方法,探讨MEHP暴露对HepG2细胞脂质代谢的影响.首先,采用油红O染色法观察细胞内脂滴蓄积情况,发现MEHP暴露能够以浓度依赖性的方式增加HepG2细胞内脂质蓄积.为了探究其可能的机制,采用Agilent(人)表达谱芯片分析并筛选差异基因,共筛选出93个差异表达基因,其中上调基因57个,下调基因36个.在此基础上,通过DAVID在线数据库对差异表达基因进行基因功能富集分析,发现其主要参与细胞脂质代谢过程(cellular lipid metabolic process)、跨膜运输(transmembrane transport)、跨膜转运的调控(regulation of transmembrane transport)等生物学过程.随后,通过qRT-PCR法对关键基因的mRNA表达水平进行验证.最后,通过GEPIA在线验证上述基因在肝细胞癌(LIHC)中的表达.综上,MEHP暴露能够影响细胞脂质代谢通路中的基因FADS6、MVD、SC5D、PLA2G4E在HepG2细胞中的表达,在一定程度上促进了肝脏细胞中的脂肪蓄积,从而使肝细胞内脂质代谢紊乱.

m6A甲基化对邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯诱导小鼠睾丸间质细胞自噬的作用

目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]致小鼠睾丸间质(TM-3)细胞自噬中m6A甲基化的作用。方法 将对数生长期的TM-3细胞暴露于浓度梯度(0、5、10、20、40、80μmol·L^(-1))的m6A甲基化抑制剂3-脱氮腺苷(3-Deazaadenosine,DAA)24 h,CCK-8法检测细胞活力,确定3-脱氮腺苷的染毒剂量后,梯度稀释为对照组(0μmol·L^(-1))、MEHP低剂量组(200μmol·L^(-1))、MEHP中剂量组(400μmol·L^(-1))、MEHP高剂量组(800μmol·L^(-1)),将TM-3细胞分别暴露于0、200、400、800μmol·L^(-1)MEHP,40μmol·L^(-1)DAA+400μmol·L^(-1)MEHP和40μmol·L^(-1)DAA染毒组24 h,光镜下观察TM-3细胞形态。CCK-8法检测细胞存活率;m6A RNA甲基化定量检测试剂盒检测m6A修饰水平;丹酰尸胺(MDC)荧光染色检测自噬形成情况;Western blot检测LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达水平。结果 与对照组相比,DAA浓度为5、10、20、40μmol·L^(-1)时,细胞活力均无明显变化(P均>0.05);DAA浓度为80μmol·L^(-1)时,细胞活力下降(P<0.01);各MEHP染毒组TM-3细胞活力和m6A甲基化水平均降低(P均<0.01),细胞空隙变大,圆形细胞增多,贴壁细胞的数量明显减少;DAA组m6A甲基化水平较对照组降低(P<0.01);与MEHP中剂量组相比,DAA+MEHP组细胞活力和m6A甲基化水平均下降(P均<0.01),细胞发生皱缩,细胞间隔稍有增大。与对照组相比,各MEHP染毒组、DAA+MEHP组和DAA处理组LC3-Ⅱ的蛋白表达水平均升高(P均<0.05),MEHP低剂量组MDC荧光信号强度、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达量均无明显变化(P均>0.05);MEHP中、高剂量组和DAA+MEHP组荧光强度、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的表达量均升高(P均<0.01);DAA组荧光强度和Beclin-1的表达水平均升高(P均<0.01),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ无明显变化(P均>0.05)。DAA+MEHP组荧光强度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ较MEHP中剂量组呈上升趋势(P<0.05)。结论 MEHP可能通过降低RNA甲基化m6A修饰的水平来诱导TM-3细胞发生自噬。

孕妇尿中邻苯二甲酸单酯含量及其对新生儿出生体重影响

目的检测孕妇尿液中邻苯二甲酸酯(PAEs)含量,分析其对新生儿出生体重的影响。方法收集来自天津某妇产医院80名孕妇尿液,采用固相萃取-三重四极杆高效液相色谱串联质谱技术检测孕妇尿中3种邻苯二甲酸单酯的含量;以问卷收集孕妇一般资料,应用多因素Logistic回归分析PAEs含量对新生儿出生体重的影响。结果邻苯二甲酸单甲酯(MMP)含量的P50为67.06μg/g cr,邻苯二甲酸单乙酯(MEP)含量的P50为28.51μg/g cr,邻苯二甲酸单丁酯(MBP)含量的P50为9.95μg/g cr。3种PAEs单酯中,孕妇体内MEP含量与新生儿出生体重相对较低有关(P<0.05),其OR(95%CI)为2.724(1.376～5.396)。结论本次调查的孕妇体内检出了PAEs,尿液中较高的MEP含量与新生儿出生体重较低有关。应减少孕妇PAEs暴露,保护母婴健康。

电喷雾液相色谱串联质谱法测定人尿中10种邻苯二甲酸单酯

目的建立同时测定人尿中10种邻苯二甲酸单酯的电喷雾高效液相色谱串联质谱法。方法尿样经β-葡萄糖醛酸酶水解,全自动固相萃取仪净化后,采用高效液相色谱串联质谱电喷雾电离,多反应监测模式检测,同位素内标法定量。结果本方法在0μg/L^100μg/L时具有良好线性关系,相关系数均≥0.995,检出限在0.003μg/L^0.11μg/L,回收率为77.6%~122.5%,精密度为1.40%~9.27%。结论本方法灵敏度好,准确度高,适用于实际尿样中多种邻苯二甲酸单酯的测定。

邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯诱导人卵巢颗粒细胞系KGN细胞铁死亡的作用研究

目的研究邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)是否诱导人卵巢颗粒细胞系KGN细胞铁死亡并影响其增殖。方法取对数增长期的人卵巢颗粒细胞系KGN细胞,给予不同浓度(0、100、200、400、800、1600μmol/L)MEHP处理24 h。通过普通光镜观察不同浓度MEHP处理后KGN细胞形态的改变;用CCK-8检测MEHP对细胞活力和增殖能力的影响;采用蛋白免疫印迹(WB)观察铁死亡相关蛋白(ACSL4、GPX4、SLC7A11、FTH1)在KGN细胞中的表达情况;使用细胞铁含量检测试剂盒、丙二醛(MDA)含量检测试剂盒、活性氧(ROS)荧光探针(DCFH-DA)及超氧化物阴离子荧光探针(DHE)分别检测对照组和400μmol/L MEHP处理组细胞的铁含量、MDA、ROS和超氧化物阴离子水平。结果(1)光镜观察显示,400μmol/L及以上MEHP处理使KGN细胞皱缩变圆,形态异常。(2)CCK-8结果显示400μmol/L及以上MEHP处理抑制细胞增殖,且具有剂量依赖性(P<0.05)。(3)100、200μmol/L MEHP处理组KGN细胞铁死亡相关蛋白表达无显著改变(P>0.05);400μmol/L MEHP处理组KGN中ACSL4蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而GPX4、SLC7A11、FTH1蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。(4)400μmol/L MEHP处理使得KGN细胞的铁含量、MDA水平显著上升(P<0.05),细胞ROS、超氧化物阴离子荧光染色强度明显增加。结论MEHP诱导KGN细胞铁死亡,抑制细胞增殖能力,但MEHP诱导铁死亡的具体作用机制还需进一步探讨。

邻苯二甲酸单甲酯双核铜配合物的强反铁磁性和磁构关联研究

以邻苯二甲酸单甲酯(mMP)为配体合成了一个新的双核铜配位化合物[Cu_2(mMP)_2(H_2O)_2]_2·2H_2O(1),并通过元素分析、红外光谱和X射线单晶衍射等方法对化合物晶体结构进行了表征.化合物1通过四羧酸桥联的方式形成了桨轮状双金属笼结构.每个Cu(Ⅱ)离子采用四方单锥的五配位构型,其中四个氧原子来自于四个不同的邻苯二甲酸单甲酯配体,轴向位置上的氧原子则来自于水分子.配化水分子和溶剂水分子与配体中未配位的氧原子形成了分子间氢键,并进一步形成三维网络结构.磁性数据显求双核铜内为强的反铁磁交换作用,磁耦合作用常数2J=-324 cm^(-1).通过与相关双核铜化合物的对比,详细分析了化合物的磁构关联并讨论了羧酸类双核铜中强反铁磁性作用的结构因素.研究表明,影响羧酸类双核铜强反铁磁性作用的主要结构因素是配体中桥联双核铜的O-C-O部分的电子结构.

邻苯二甲酸单乙基己基酯对原代培养大鼠睾丸Leydig细胞睾酮合成的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)的代谢产物邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对SD大鼠体外培养睾丸间质细胞(Leydigcells)睾酮合成的影响。方法:建立SD大鼠睾丸Leydig细胞体外原代培养模型,MEHP染毒剂量组分为对照(0μmol/L)、62.5、125、250、500、1000μmol/L,通过噻唑蓝(MTT)法观察线粒体活性,放射免疫法测定睾酮浓度,RTPCR法测定Leydig细胞类固醇合成急性调节蛋白(StAR)mRNA表达。结果:MEHP染毒24h后,Leydig细胞线粒体活性在250μmol/L时显著上升,1000μmol/L时显著下降,与对照组比较,差异均有显著性(P<0.01)。基础状态及人绒毛膜促性腺激素(hCG)刺激状态下,Leydig细胞睾酮合成水平均呈上升趋势,与对照组相比,250、500μmol/L剂量组差异均有显著性(P<0.01)。Leydig细胞StARmRNA的表达在62.5、125、250μmol/L时与对照组相比均未见有显著性改变,在500、1000μmol/L时显著下降(P<0.01)。结论:MEHP直接影响原代培养Leydig细胞线粒体活性及睾酮合成,胆固醇跨膜转运的调节因子StAR与MEHP引起睾酮合成上升的原因可能无关。

邻苯二甲酸单醇酯钠盐的合成及性能研究

分别用十二醇、十四醇、十六醇和十八醇与邻苯二甲酸酐反应合成邻苯二甲酸单醇酯,再用氢氧化钠中和得钠盐。研究了催化剂、醇、原料配比、酯化温度及溶剂等对单酯酯化率的影响,用红外光谱和核磁共振波谱对产物结构进行了表征,测定其泡沫性能和界面性能。确定了最佳酯化条件为:以自制催化剂BN-1作催化剂,二甲苯为溶剂,n(醇)∶n(酸酐)=1∶1.6,酯化温度100℃,酯化时间5 h。随着醇碳链增加,邻苯二甲酸单醇酯钠盐泡沫能力降低,但界面活性增强。

邻苯二甲酸淀粉单酯的制备与表征

阐述由可溶性淀粉与邻苯二甲酸酐进行的酯化反应 ,探讨制备具有一定取代度的邻苯二甲酸淀粉单酯的方法 .研究反应温度和反应时间对产物取代度的影响 .试验用红外光谱法验证反应产物的结构 ,经X 射线衍射分析 ,结果表明淀粉酯化后 。

邻苯二甲酸-单-乙基己基酯对人卵巢颗粒细胞活性及分泌功能的影响

目的研究邻苯二甲酸-单-乙基己基酯[Mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]对人卵巢黄素化颗粒细胞的活性及分泌功能的影响。方法选取北京大学人民医院行体外受精-胚胎移植患者19例,收集其卵泡液,提取颗粒细胞进行原代细胞培养72h,并分为低剂量组(10例,MEHP25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)和高剂量组(9例,MEHP300μmol/L、500μmol/L),两组均于加药后48h,采用细胞计数试剂盒检测颗粒细胞的活性、放免法检测雌二醇及孕酮水平,均与DMEM/F12培养液+二甲基亚砜(对照组)比较。结果高剂量组中,当MEHP≥500μmol/L时,颗粒细胞活性较对照组明显降低(P=0.001);当MEHP≥500μmol/L时,雌二醇水平较对照组明显降低(P=0.000);低剂量组中,当MEHP为50μmol/L、100μmol/L时,孕酮水平较对照组明显降低(P分别为0.007和0.02);高剂量组中,当MEHP为500μmol/L时,孕酮水平明显降低(P=0.002)。结论高浓度MHEP(≥500μmol/L)不仅降低人卵巢颗粒细胞活性,而且抑制了雌孕激素合成的功能。但目前人体暴露范围内(≤50μmol/L)的MHEP对颗粒细胞活性及雌激素合成无影响,对孕激素合成有明显抑制作用。

果酒中邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯检测方法研究

邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯是使用最广泛的增塑剂邻苯二甲酸二-2-乙基己基酯在体内的主要代谢产物,对人体有一定的危害.建立了一种邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯的气相色谱-质谱联用检测方法,并采用该方法对荔枝酒中邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯的含量进行了检测.

热稳定剂邻苯二甲酸单异辛酯稀土的合成及性能

以邻苯二甲酸酐、异辛醇、氢氧化钠、氯化稀土、混合溶剂、助剂为原料 ,通过酯化反应、皂化反应、复分解反应以及复配制备了以邻苯二甲酸单异辛酯稀土为主要成分的液态稀土复合热稳定剂 ,其工艺条件为 :酯化反应的温度控制在 130～ 14 0℃ ,反应时间为 1h ;皂化反应的温度为 6 0℃ ,反应时间为 5min ;复分解反应的温度在 6 0～ 70℃ ,反应时间为 1h ;水洗温度控制在 6 0～ 6 5℃ ;混合溶剂的用量为 5 0 % ,稀土含量为 6 0 3% ;在复配过程中 ,采用亚磷酸酯作为辅助热稳定剂 ,其用量为 5 %～ 7% ,PVC中加入 2 %的这种稀土复合热稳定剂 ,在185℃下 ,其热稳定时间为 4 5min。