高效液相色谱-串联质谱法同时测定尿液中12种邻苯二甲酸酯类代谢物的含量

在2 mL尿液样品中加入4 mg·L^(-1)混合内标溶液0.01 mL、不低于850 U·mL^(-1)的β-葡萄糖醛酸酶溶液和1 mol·L^(-1)乙酸铵溶液0.5 mL,充分振荡后于37℃水解2.0 h,降至室温,用乙腈定容至5 mL,冷冻2 h,恢复至常温后,过0.22μm有机滤膜.采用高效液相色谱-串联质谱法同时测定其中12种邻苯二甲酸酯类代谢物的含量,基质匹配法消除基质干扰,内标法定量.结果表明,12种邻苯二甲酸酯类代谢物工作曲线的线性范围均为1.00~200μg·L^(-1),检出限(3S/N)为0.05~1.88μg·L^(-1).按标准加入法进行回收试验,回收率为75.3%~114%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.5%~10%.方法用于测定35份儿童尿液样品,其中检出11种邻苯二甲酸酯类代谢物,邻苯二甲酸单异癸酯(MDP)未检出.

固相萃取-气相色谱质谱联用法测定尿中邻苯二甲酸酯类代谢物

目的建立固相萃取-气相色谱质谱联用法测定尿液中邻苯二甲酸单甲酯、邻苯二甲酸单乙酯、邻苯二甲酸单丁酯、邻苯二甲酸单2-乙基己酯、邻苯二甲酸单苄酯等5种邻苯二甲酸酯类代谢物的方法。方法尿液通过β-葡萄糖苷酶酶解,固相萃取小柱净化,三氟化硼乙醚甲醇溶液衍生,最后通过DB-5毛细管色谱柱(30m×0.25 mm,0.25μm),气相色谱质谱联用法测定。结果该方法在25.0~1000μg/L浓度范围内,5种邻苯二甲酸酯的浓度与峰面积的线性关系良好,相关系数为0.9989~0.9996,方法检出限为10.0~15.0μg/L;在空白样品中添加15.0、200和500μg/L三个浓度水平,平均回收率为80.2%~97.8%,相对标准偏差为4.2%~10.2%(n=6)。采用该方法对81位孕妇的尿液进行了检测,检出率为98.7%。结论固相萃取-气相色谱质谱联用法适用于尿液中5种邻苯二甲酸酯类代谢物的同时检测。

孕妇尿中3种邻苯二甲酸酯类代谢物的含量及影响因素

目的了解孕妇的邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(butylbenzylphthalate,BBzP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]3种邻苯二甲酸酯类(phthalate esters,PAEs)暴露情况。方法抽取某直辖市一所三级甲等医院2010年5—7月间入院且排除有PAEs职业接触的50名孕妇进行问卷调查,调查内容包括孕妇基本信息(如年龄、身高、吸烟饮酒史等)及孕期PAEs的暴露信息等内容。采用固相萃取(SPE)-反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定孕妇孕期尿液中DBP、BBzP、DEHP的代谢物(phthalate metabolites)邻苯二甲酸单丁酯(mono-n-butyl phthalate,MBP)、邻苯二甲酸单苄基酯(mono-benzyl phthalate,MBzP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(mono-2-ethylhexyl phthalate,MEHP)的含量。采用多因素Logistic回归模型分析其主要暴露途径。结果孕妇尿液中MBP的检出范围为未检出～6 673.061μg/g Cr,中位数为19.487μg/g Cr,检出率为52.0%;MBzP的检出范围为未检出～6 227.937μg/g Cr,中位数为未检出,检出率为48.0%;MEHP的检出范围为未检出～2 139.802μg/g Cr,中位数为161.990μg/g Cr,检出率为78.0%。多因素Logistic回归分析结果显示,妊娠近期染烫发史、孕期使用化妆品和孕期饮食过程中使用塑料制品等因素是MBP暴露的危险因素(P<0.05),三者的偏回归系数分别是1.622、2.034和1.755;日常使用香水与妊娠近期染烫发是MBzP暴露的危险因素(P<0.05),二者的偏回归系数分别是1.921和1.771;近期进行室内装修(或更换家具)与孕期使用药物是高浓度MEHP暴露的危险因素(P<0.05),二者的偏回归系数分别是1.754和1.632。结论孕妇在日常生活中暴露于邻苯二甲酸酯类化合物。

花椒和生姜及其提取物中邻苯二甲酸酯类检测方法及迁移规律的研究

研究提出了分散固相萃取-气相色谱质谱同时测定花椒、生姜及其产品中4种邻苯二甲酸酯类的方法,并研究了超临界生产过程中邻苯二甲酸酯类污染物迁移规律。花椒和生姜及其提取物样品使用异辛烷提取,经分散固相萃取净化,采用气相色谱分离后,在电子轰击电离(EI)源和多反应监测模式下检测,邻苯二甲酸二甲酯和邻苯二甲酸二异丁酯使用外标法定量,邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯使用内标法定量。结果表明:该方法在线性范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.992,线性范围在0.00~0.50μg/mL,平均回收率在94.0%~104.2%范围内。以花椒和生姜作为研究对象,研究了超临界萃取生产过程中塑化剂迁移规律,迁移率大多数在75%~120%之间。本法简便快速、准确可靠,适用于检测花椒、生姜及其产品中4种邻苯二甲酸酯类的测定,可作为日常生产过程中质量控制的方法。

固相萃取-高效液相色谱法测定人体尿液中邻苯二甲酸酯及其代谢物

建立了同时测定人体尿液中邻苯二甲酸酯及其代谢物的分析方法。对洗脱剂种类、洗脱体积、洗脱流速等影响因素进行考察,确定了最佳洗脱剂及洗脱体积为2 mL乙腈、2 mL乙酸乙酯和1 mL乙醚-正己烷(1∶19,V/V),洗脱流速1 mL/min。在最优化的固相萃取-液相色谱条件下测定5种邻苯二甲酸酯及其5种相应的单酯代谢物,线性范围为20～10000μg/L,相关系数均大于0.99;检出限为3.8～7.0μg/L;加标回收率为72.2%～102.3%;相对标准偏差均小于8%。利用本方法对5名育龄女性的尿液进行分析,除了邻苯二甲酸二甲酯和邻苯二甲酸二乙酯外,其余8种物质均在尿液中检出。

固相萃取-气相色谱法测定食品包装材料中邻苯二甲酸酯类物质

建立采用固相萃取-气相色谱法同时分析检测邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)和邻苯二甲酸二-2-乙基己酯(DEHP)4种邻苯二甲酸酯类物质的方法。研究塑料包装材料中邻苯二甲酸酯类在水、65%乙醇、4%乙酸、正己烷4种模拟液中的溶出及利用固相萃取技术对浸出液进行富集的情况,考察气相色谱操作条件对4种邻苯二甲酸酯类物质分离的影响。结果表明,该方法具有良好的线性相关性,线性相关系数在0.9986～0.9994之间;回收率在80.63%～95.50%之间;DBP、BBP、DCHP和DEHP的检测限分别是0.050、0.010、0.055μg/mL和0.012μg/mL。该方法样品预处理简便,测定方法灵敏、可靠,可用于食品包装材料中邻苯二甲酸酯类的监测。

超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定人尿中9种邻苯二甲酸酯代谢物

建立了人尿中9种邻苯二甲酸酯(PAE)代谢物的超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)测定方法。2 mL尿液样本酶解2 h后,经强阴离子固相萃取净化处理;选用Waters ACQUITY UPLC BEH Phenyl色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%(体积分数)乙酸乙腈和0.1%(体积分数)乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;在负离子电喷雾多反应监测模式(MRM)下测定9种PAE代谢物含量。8种PAE代谢物在0.39~200μg/L范围内、1种PAE代谢物在1.17~600μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.995。方法检出限为0.06~0.85μg/L,定量限为0.20~2.80μg/L。3个加标水平的加标回收率为84.1%~122%,精密度为4.5%~14.3%;日内精密度不高于9.3%,日间精密度不高于10.1%;基质效应和稳定性符合分析要求。应用该方法测定50份人尿液样本,邻苯二甲酸单环已酯(MCHP)和邻苯二甲酸单苄酯(MBZP)的检出率分别为0和44.0%,其余7种PAE代谢物的检出率为100%。该方法操作简单、定量准确、稳定性好,适用于人尿中9种PAE代谢物的定量分析。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定人尿液中7种邻苯二甲酸酯代谢物

建立了同时检测人尿液中7种邻苯二甲酸酯代谢物的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法。尿液经酶水解后,采用萃取柱净化,以2%（v/v）甲酸甲醇溶液为洗脱剂,经苯基柱分离,以0.1%（v/v）乙酸水溶液和0.1%（v/v）乙酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源负离子模式和多反应监测模式采集信号,用同位素内标法进行定量分析。尿液中7种邻苯二甲酸酯代谢物在0.2-200.0μg/L范围内定量离子的相对峰面积比值与质量浓度均呈良好线性关系（r≥0.999 76）;检出限（LOD）为13.43-80.21 ng/L,定量限为44.77-267.37 ng/L;3个水平的加标回收率为88.8%-108.9%,日内和日间精密度均不大于17.05%。该方法可同时准确、灵敏、简便地测定人尿液中7种邻苯二甲酸酯代谢物的暴露水平。

东北地区青年人群尿液中邻苯二甲酸酯代谢物的残留和健康风险评价

为了了解东北地区青年人群体内邻苯二甲酸酯(PAEs)的暴露水平,在黑龙江、吉林和辽宁省共采集了25个青年人群尿液样品,采用高效液相色谱—质谱联用仪(HPLC-MS/MS)分析了尿液样品中10种PAEs代谢物的浓度水平。结果表明,东北地区青年人群尿液中PAEs代谢物的残留非常普遍,黑龙江、吉林和辽宁省青年人群尿液中PAEs代谢物的总浓度分别为114、495和422ng·m L-1。不同省份青年人群尿液中PAEs代谢物的组成特征不同,mi BP、m BP和DEHP分别为黑龙江、吉林和辽宁省青年人群尿液中浓度比例最大的代谢物。东北地区青年人群体内单个PAE的暴露量均小于容许参考暴露剂量,但是,吉林和辽宁省部分青年人群体内PAEs的总暴露危险指数超过了人体PAEs的累积风险阈值,可能存在健康风险。

固相萃取-超高效液相色谱/串联质谱法检测人体血清中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯代谢物

建立了固相萃取-超高效液相色谱/串联质谱法检测人体血清中邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)代谢物。血清样品中加入乙酸钠溶液及内标13C4邻苯二甲酸单乙基己基酯(13C4MEHP)后,在37℃条件下用β-葡萄糖醛苷酶酶解提取12h,提取液经MAX固相萃取小柱净化并浓缩到纯水中。以甲醇-5mmol/L乙酸铵溶液为流动相,经Waters UPLC?HSS T3色谱柱分离后,在电喷雾离子源负离子模式下,以多反应监测(MRM)方式进行扫描,内标法定量。DEHP代谢物在1.0~100.0μg/L范围内线性关系良好,检出限均为0.1μg/kg,回收率89.6%~103.2%。该方法灵敏度高,准确度好,可作为监测人群内暴露的重要技术支撑。

食品中邻苯二甲酸酯类化合物检测方法研究进展

邻苯二甲酸酯类化合物(phthalic acid esters,简称PAEs)主要用于提高食品塑料包装物的韧性和耐用性,在一定的条件下这些化合物会迁移至食品中去,从而干扰人体激素的分泌,在体内长期积累可导致畸形、癌变和突变。本文对近年来国内外食品中的内分泌干扰物邻苯二甲酸酯类化合物检测方法的研究进展进行了综述,概括了食品中PAEs的样品前处理技术和检测技术的发展近况,并特别对蜂产品中PAEs检测分析发展进行了展望。

气相色谱法同时测定涂料中的苯系物和邻苯二甲酸酯类环境激素

建立了涂料中苯、甲苯、二甲苯异构体、邻苯二甲酸酯类化合物(DEP、DBP、BBP、DEHP、DNOP)多种有毒有害成分同时检测技术 ;用化学和吸附/脱附惰性膜除去样品中的大部分树脂成膜物质、颜填料及各种微粒助剂 ;用毛细管柱气相色谱分离 ,内标法定量 ;苯系物的线性范围为1×10-2～100μg,邻苯二甲酸酯类增韧剂为5×10-2～20μg;苯系物的回收率为97 %～103 % ,相对标准偏差 (RSD)的范围为0.12 %～0.95 % ;邻苯二甲酸酯类增韧剂的回收率为96 %～102 % ,相对标准偏差 (RSD)的范围为0.92 %～2.46 %。结果表明 :该方法简便、快速、灵敏、精密度好。

多功能离子液体分散液液微萃取结合高效液相色谱法检测人尿中5种邻苯二甲酸酯代谢物

将多功能离子液体与分散液液微萃取(DLLME)技术相结合,建立了测定尿液中5种邻苯二甲酸酯类(PAEs)物质代谢产物的高灵敏度新方法。对影响DLLME效率的各单因素进行了优化,包括萃取剂的种类及体积、分散剂的种类及体积、萃取温度、超声时间、冷却时间、离心时间和盐效应等条件,经过严格的优化,最佳的萃取条件分别为:萃取剂[C8MIM][PF6]35μL,分散剂[BSO3HMIm][OTf]30μL和[C4MIM][BF6]120μL,萃取温度为35℃,超声时间5 min,冷却时间5 min,离心时间5 min,盐析剂NH4PF60.1 g。在最佳的萃取条件下,5种PAEs代谢物在0.5~1000μg/L范围内具有良好的线性关系,决定系数(R2)均大于0.9955,方法检出限为0.16~0.19μg/L,尿液中添加低中高水平(5、20、100μg/L)的PAEs代谢物,其回收率为92.9%~105.0%,日内精密度及日间精密度的相对标准偏差(RSD)均小于5.96%,方法学验证各指标及稳定性均符合分析要求。对所采集的10份糖尿病患者的尿液进行检测,并对该人群PAEs代谢物的暴露水平进行评价。结果表明,各PAEs代谢物均有检出,其中邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)的检出率为100%。总之,该方法萃取过程中未添加有毒的有机试剂,均使用多功能离子液体作为萃取剂、分散剂和盐析剂,萃取过程绿色环保,简单高效;方法的灵敏度较高,稳定性较好,适用于人体尿液中痕量PAEs代谢物的检测。

邻苯二甲酸酯类暴露与糖代谢紊乱的相关性研究进展

邻苯二甲酸酯类作为内分泌干扰物之一,应用广泛,使人群普遍暴露,可影响人类及实验动物生殖系统、内分泌系统、呼吸系统等的正常功能。流行病学及动物实验研究证据表明,邻苯二甲酸酯类暴露与糖代谢紊乱密切相关。邻苯二甲酸酯类可通过影响胰岛素信号转导、抑制葡萄糖摄取及氧化、诱发氧化应激、干扰正常激素功能等机制妨碍正常糖代谢,导致人类及实验动物出现血糖升高、胰岛素水平下降、胰岛素抵抗等糖代谢异常。因此,深入研究邻苯二甲酸酯类暴露与糖代谢紊乱的相关性及具体机制将对临床预防及治疗糖尿病提供理论基础。

气相色谱-串联质谱法测定土壤中16种邻苯二甲酸酯和2种邻苯二甲酸酯单酯代谢物

土壤样品经丙酮与正己烷以体积比1∶2组成的混合液提取,采用PSA/Silica复合填料玻璃柱净化,收集洗脱液,洗脱液旋蒸近干,加入正己烷,采用气相色谱-串联质谱法测定稀释液中16种邻苯二甲酸酯(PAEs)的含量。在气相色谱分离中采用DB-5MS石英毛细管色谱柱,在串联质谱分析中采用选择离子监测模式。测定2种邻苯二甲酸酯单酯代谢物(MPEs)时,洗脱液旋蒸近干后,在14%(质量分数)三氟化硼-甲醇溶液中于60℃衍生30min。16种PAEs的线性范围均为0.02~0.80mg·L-1,检出限(3S/N)为1.357μg·kg-1;2种MPEs的线性范围均为0.05~1.00mg·L-1,检出限(3S/N)为0.217μg·kg-1。以空白土壤样品为基体进行加标回收试验,所得回收率为71.1%~105%,测定值的相对标准偏差(n=5)为0.10%~14%。

烟用水基胶中苯系物和邻苯二甲酸酯类化合物的GC-MS/MS同时测定

以极性DB-WAX毛细管柱为色谱柱、正己烷为萃取溶剂、正十四烷为内标物,建立了利用气相色谱-串联质谱仪(GC-MS/MS)同时测定烟用水基胶中的苯系物和邻苯二甲酸酯类化合物含量的方法,并对该方法的性能进行了考察.结果表明:在萃取时间为20 min时,采用MRM模式和最佳碰撞能量条件,实现了苯系物和邻苯二甲酸酯类化合物13种组分的完全分离.该方法的相关系数>0.999,苯系物的检出限为0.000 8~0.001 0 μg/mL,定量限为 0.002 5~ 0.003 0 μg/mL;邻苯二甲酸酯类化合物的检出限为0.003 0~ 0.008 0 μg/mL ,定量限为0.010 0~0.030 0 μg/mL;两类化合物各加标浓度水平下的回收率为83.2%~99.8%,相对标准偏差小于7.00%.这说明该方法重复性好,回收率高,可满足定量分析要求,且定量限低于行业标准.

不明原因复发性流产患者尿中双酚A和邻苯二甲酸酯代谢物与氧化应激生物标志物的关联研究

目的探讨不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)患者尿中双酚A(BPA)和邻苯二甲酸酯代谢物(mPAEs)水平与氧化应激生物标志物水平的关联。方法采用横断面研究方法,招募2018年4月至10月在首都医科大学附属北京妇产医院就诊的URSA患者为调查对象。采用超高效液相色谱—三重四极杆质谱法测定调查对象尿液中BPA和mPAEs水平,采用酶联免疫吸附法测定尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)水平。采用多元线性回归模型和限制性立方样条函数评估尿BPA和mPAEs水平与8-OHdG和8-iso-PGF2α水平的关联。结果共纳入94名调查对象,年龄为(32.38±3.89)岁。多元线性回归结果表明,调整混杂因素后,URSA患者尿BPA和mPAEs水平均与尿8-OHdG和8-iso-PGF2α水平呈显著正向关联(P<0.05)。限制性立方样条函数分析结果显示,URSA患者尿8-OHdG水平与BPA水平呈正向关联(P_(总关联)=0.002),与邻苯二甲酸单(2-乙基-5-羟基己基)酯(MEHHP)、邻苯二甲酸单(2-乙基-5-氧己基)酯(MEOHP)和邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)水平均呈正向非线性关系(P_(非线性关联)=0.046,P_(非线性关联)=0.046,P_(非线性关联)=0.007),与邻苯二甲酸单甲酯(MMP)水平的关系呈“U”型(P_(非线性关联)=0.005);尿8-iso-PGF2α水平与BPA、邻苯二甲酸单异丁酯(MiBP)、MEHHP、MEOHP和MEHP水平均呈正向关联(P_(总关联)<0.05),与MMP水平的关系呈“U”型(P_(非线性关联)=0.006)。结论URSA患者尿BPA和mPAE水平与氧化应激生物标志物水平存在正向关联,但不同代谢产物的关联曲线特征不同。

气相色谱法同时测定指甲油中的苯系物和邻苯二甲酸酯类化合物

建立指甲油中苯系物、邻苯二甲酸酯类化合物(DMP,DEP,DBP,BBP,DEHP,DNOP)多种有毒有害成分同时检测技术:用毛细管柱气相色谱分离,外标法定量,苯系物的线性范围为1×10-2～100μg,邻苯二甲酸酯类为5×10-2～20μg;苯系物的回收率为90%～102%,相对标准偏差(RSD)的范围为0.13%～0.92%;邻苯二甲酸酯类的回收率为92%～109%,相对标准偏差(RSD)的范围为0.44%～2.54%。结果表明,该方法简便、快速、灵敏、精密度好。

GC-MS同时测定电子烟油中5种苯系物和17种邻苯二甲酸酯类化合物

以气相色谱-质谱联用分析方法同时测定电子烟油中5种致癌苯系物和17种致畸邻苯二甲酸酯类化合物。结果表明,该方法中5种苯系物和17种邻苯二甲酸酯类化合物的线性范围为0.05~1.00μg/mL,相关系数均大于0.995 0。目标化合物的检出限为0.001~0.010μg/mL,定量限为0.003~0.050μg/mL;加标回收率为81.64%~110.48%,RSD为0.55%~9.93%。与已报道和现有标准的方法相比,该方法具有前处理操作简单、检出限和定量限更低、使用试剂及耗材较少、减少分析目标化合物的时间等优点。

邻苯二甲酸酯类塑化剂的土壤生态毒理学研究进展

邻苯二甲酸酯类(PAEs)化合物的生产量和使用量不断增加,导致土壤环境的PAEs污染问题日益突显。一些种类PAEs具有雌激素效应和"三致"效应,因此,PAEs化合物对土壤生态系统各类生物体的生态毒性已引起广泛关注。文章在国内外现有文献研究基础上,综合论述PAEs的土壤污染现状及其对高等植物、土壤微生物和土壤无脊椎动物等的生态毒性研究进展,以期为PAEs污染土壤的生态毒理学深入研究和发展提供参考。研究发现,中国许多地区的农业土壤中均有PAEs被检出,部分土壤中PAEs总量可高达几十mg·kg^(-1),一些PAEs单体含量超出了美国环保局土壤PAEs控制标准。PAEs对植物体在个体、生理、细胞及分子水平上均具有生态毒性效应;PAEs对土壤微生物的群落结构、种群数量和活性均可产生影响,进而影响土壤的正常功能;PAEs对土壤无脊椎动物蚯蚓的生态毒性效应研究则刚刚起步,高浓度的PAEs对蚯蚓具有急性毒性和繁殖毒性,蚯蚓分子及基因水平毒理学指标研究有望为低浓度PAEs的生态毒性效应研究提供新的敏感的生物标记物。