邻苯二甲酸二丁酯降解菌L6关键基因扩增及代谢产物分析

目的通过扩增邻苯二甲酸二丁酯(DBP)降解菌L6 的关键基因并分析代谢产物,了解该菌株的降解机制。方法以DBP 降解菌L6 基因组为模板,PCR 扩增邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,PCR 产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测,再进行测序和分析;将DBP 降解菌L6 接种于含DBP 浓度为800 mg/L 的基础培养基中培养120 h,采用超高效液相色谱法(UPLC)和气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检测培养基中的残留物质,确定降解产物。结果通过PCR 扩增成功获得DBP 降解菌L6 的邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,经NCBI 比对发现,分别与甲基杆菌属菌株arboreus clone SY117 (Accession No. KM041246.1)的邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因具有较高的相似性。L6 培养基中尚残留部分DBP,浓度为135 mg/L;0.7 min 时出现一个新的色谱峰,浓度为95.6 mg/L,经GC-MS 确认该物质为邻苯二酚。结论DBP 降解菌L6 的基因组内存在邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,与同属菌株arboreus clone SY117 的基因有较高同源性,DBP 降解菌L6 降解DBP 的产物为邻苯二酚。