用基于邻苯二甲醛柱前衍生的高效液相色谱法测定稻米的γ-氨基丁酸含量

建立基于邻苯二甲醛（0-phthalaldehyde，OPA）柱前衍生的高效液相色谱法（highperformanceliquidchromato—graphy，HPLC），测定了稻米中Y-氨基丁酸（Y-aminobutyricacid，GABA）的含量。结果显示：用三氯乙酸作为提取溶剂的效果最好；检测限为0．5mg／L，提取回收率为79．1％-101．5％；巨胚糙米的GABA含量显著高于常规胚糙米的，发芽后巨胚糙米的GABA积累量也高于常规胚糙米的。

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定氨基酸类神经递质

以邻苯二甲醛柱前衍生,ODS(C_(18))柱分离,pH 6.0乙酸盐缓冲溶液与甲醇二元梯度洗脱,荧光检测,仅9min内分离测定了大鼠脑中5种氨基酸递质的含量。在1～10μmol·L^(-1)浓度范围内,氨基酸的峰面积与其浓度呈现良好的线性关系,相关系数在0.9978～0.9999之间。

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定氨基酸类神经介质

目的 建立测定神经中枢氨基酸类介质的方法。方法 邻苯二甲醛柱前衍生 ,ODS(C18)柱分离 ,pH6 0醋酸盐缓冲溶液与甲醇二元梯度洗脱 ,荧光检测。结果 仅在 9min内就分离测定了大鼠脑中 5种氨基酸介质的含量。在一定浓度范围内 ,氨基酸的峰面积与其浓度呈现良好的线性关系 ,相关系数在 0 .9978～ 0 .9999之间。

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定CHO细胞内氨基酸浓度

用邻苯二甲醛进行柱前衍生,HypersilAA-ODS柱分离,梯度洗脱,紫外检测,在17min内分离测定了中国仓鼠卵巢(CHO)细胞内19种氨基酸的浓度。紫外检测器的检出限为0.10～0.23μmol/L;12次连续测定25μmol/L氨基酸标准溶液的保留时间,精密度小于0.3%,面积精密度小于3%。在一定浓度范围内,氨基酸组分和内标物峰面积的比值与氨基酸浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.9979～0.9999。用内标工作曲线法对胞内氨基酸浓度进行了定量分析,氨基酸回收率为87%～106%。

邻苯二甲醛柱前衍生化时间对反相高效液相色谱法测定稻米氨基酸含量的影响

目的确定反相高效液相色谱法(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定稻米氨基酸含量最适柱前衍生化时间。方法以氨基酸标准品以及稻米氨基酸提取物为对象,对柱前衍生化时间与氨基酸检测结果之间的关系进行研究。结果邻苯二甲醛(O-phthalaldehyde,OPA)和3-巯基丙酸与氨基酸的衍生化反应进行到15 min时,氨基酸的峰面积达到最大值,不同OPA-氨基酸衍生化产物的稳定性存在很大的差异。在15~300min的衍生化反应中,酪氨酸和苯丙氨酸衍生物的峰面积保持在非常稳定的水平上;而侧链含有羟基的丝氨酸和苏氨酸对衍生化时间特别敏感,衍生化时间超过15min后,其衍生物的峰面积开始快速下降;当衍生化时间在15~60min之内时,15种氨基酸中,只有酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和丙氨酸9种氨基酸的衍生物峰的面积下降幅度小于5%。结论柱前衍生化时间对稻米氨基酸衍生物峰面积的检测值较为敏感,衍生化时间控制在15 min之内能有效减小实验误差。

邻苯二甲醛柱前在线衍生反相高效液相色谱法测定功能饮料中赖氨酸的含量

以邻苯二甲醛作为衍生试剂,结合柱前在线衍生–反相高效液相色谱技术,建立了一种快速检测功能饮料中赖氨酸含量的分析方法。对流动相梯度洗脱程序、DAD检测波长和在线衍生时间等参数进行了优化。赖氨酸在1~200 mg/L范围内与色谱峰面积有良好的线性关系,相关系数大于0.998,赖氨酸的检出限为0.3 mg/L,测定结果的相对标准偏差小于7%(n=5),加标回收率为96.43%~115.01%。该方法可应用于功能饮料中赖氨酸的快速检测。

罗丹明B酰肼柱前衍生—高效液相色谱—质谱联用法测定蜂蜜中的苯甲醛残留量

合成了新型化学衍生试剂罗丹明B酰肼(RBH),并建立了RBH柱前衍生—高效液相色谱—质谱联用法。样品经甲醇提取后用RBH衍生化,采用液相色谱—质谱联用法进行测定。结果显示:试剂RBH具有很好的质谱检测灵敏度,对苯甲醛的衍生化反应高效、专一。苯甲醛在0.05～6.00ng/mL时呈良好的线性关系,相关系数为0.996 2,该方法检测限和定量限分别为0.80×10^(-3),2.71×10^(-3) ng/mL,加标回收率为93.3%～104.0%,相对标准偏差为0.8%～2.6%。该方法选择性好、灵敏度高、检测限低,可满足蜂蜜中苯甲醛残留的测定。

反相高效液相色谱柱前衍生荧光检测法测定游离多胺

合成新型荧光试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-异丙基氯甲酸酯(BCIC)作为柱前衍生化试剂,在Eclipse XDB-C8色谱柱上,通过梯度洗脱对5种多胺进行了分离和在线质谱定性。在乙腈中,以硼酸钠缓冲液(pH9)为催化剂,40℃下衍生反应10min后获得稳定的荧光产物。激发和发射波长分别为λex=333nm,λem=390nm。采用大气压化学电离源(APCI)正离子模式,实现了人尿中游离多胺的定性及定量测定。多胺的线性相关系数大于0.9996,检出限为5.3～9.9fmol。

DNPH柱前衍生高效液相色谱法测定食品包装材料中的微量甲醛

目的建立2,4-二硝基苯肼(DNPH)柱前衍生高效液相色谱法测定食品包装材料中微量甲醛的方法。方法样品浸泡液经DNPH于60℃的水浴中衍生20 min,用环己烷提取,液相色谱仪测定。结果甲醛在0～8.00μg/mL浓度范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r=0.9998,相对标准偏差为0.9%～2.6%,加标回收率为91.0%～101.5%。结论本方法具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好、简便、快捷等优点。

柱前衍生反相高效液相色谱法测定小麦中氨基酸含量

以肌氨酸为内标物,邻苯二甲醛-9-芴甲基氯甲酸酯为柱前衍生剂,用ODS色谱柱在柱温40℃下,采用二元梯度洗脱,DAD检测器在338 nm波长处检测,建立了一种利用反相高效液相色谱同时测定小麦籽粒中17种氨基酸的方法.氨基酸浓度在5～800 μmol/L范围内,其峰面积与内标物峰面积的比值和氨基酸浓度的线性相关系数均大于0.996;17种氨基酸的加标回收率在97.5%～103.1%范围内.应用本方法对小麦籽粒中氨基酸含量进行测定,取得了较理想的结果.同时,本法还可应用于糙米和玉米等粮食中氨基酸含量的测定.

柱前衍生高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸及γ-氨基丁酸(英文)

对茶叶中的茶氨酸和γ-氨基丁酸(GABA)建立了柱前衍生方法,并利用高效液相色谱法(HPLC)对衍生物进行了测定。采用邻苯二甲醛(OPA)及N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)为衍生试剂,考察了脯氨酸(Pro)、茶多酚(Tp)及维生素C(Vc)等对衍生体系的影响,并对色谱分离条件进行了优化。结果表明,茶氨酸与GABA衍生物在色谱柱上的保留行为与分离效率主要受流动相pH及缓冲盐浓度的影响;Pro、Tp及Vc对茶氨酸的衍生产率影响较小。而Vc可以提高GABA检测的灵敏度,并能稳定衍生用储备液。GABA与茶氨酸衍生后的方法检出限(LOD)分别为3.01×10-5 mmol/L和7.98×10-5 mmol/L;定量限(LOQ)分别为9.99×10-5 mmol/L和2.658×10-4m m o l/L;线性范围分别为0.01～0.4 m m o l/L(相关系数为0.996)和0.05～0.8 m m o l/L(相关系数为0.995);方法的回收率分别为99.29%～119.60%和93.18%～141.06%(除本身含茶氨酸量高的绿茶中回收率为62.88%外)。这说明经优化的柱前衍生-高效液相色谱体系可用于茶叶中两种特征性氨基酸的测定。

柱前衍生-高效液相色谱法测定保健食品中16种氨基酸的含量

目的建立柱前衍生-高效液相色谱法测定保健食品中16种氨基酸的含量。方法优化GB/T5009.124-2003的前处理方法,样品经稀释或置于顶空瓶中直接酸水解;并采用OPA/FMOC柱前衍生法,色谱柱为Thermo ODS Hypersil,以醋酸钠缓冲液（含三乙胺、四氢呋喃）和醋酸钠缓冲液（含乙腈、甲醇）为流动相进行梯度洗脱,在338 nm和262 nm检测波长下进行高效液相色谱法检测。结果 16种氨基酸在4-250μg/mL范围内呈现良好线性关系,在10μg/mL水平下加标回收率为85.8%-115.2%,RSD为0.1%-9.1%（n=6）,检出限在0.2-4.6 ng范围内。结论本方法操作简便、灵敏度高,可应用于实际样品的测定。

柱前衍生-高效液相色谱法测定暗纹东方鲀肉中牛磺酸含量

运用柱前衍生-高效液相色谱法测定暗纹东方鲀肉中牛磺酸的含量,以邻苯二甲醛为衍生剂,样品液与衍生剂进行衍生反应的体积比为1∶1,反应时间为1 min,甲醇-乙腈-水(体积比10∶20∶70)为流动相,采用XbridgeTMC18色谱柱,波长为330 nm,流速1 mL/min,进样量20μL的条件下检测样品中的牛磺酸。结果表明:牛磺酸的线性范围为5～30μg/mL,相关系数R2为0.999 1,回收率范围95.35%～98.19%,变异系数(RSD)=2.03%～3.71%(n=3),样品6次重复测定的RSD=0.51%,最小检出限1.14μg/mL。

柱前在线衍生-高效液相色谱法测定保健食品纳豆胶囊中的牛磺酸

建立了检测保健食品中牛磺酸的柱前在线衍生-高效液相色谱方法。样品经过去离子水提取,与邻苯二甲醛在线衍生,以A相：0.02 mmol/L的乙酸钠（pH 7.2,0.018%三乙胺,0.3%的四氢呋喃）;B相：100 mmol/L的乙酸钠（pH 7.2）20%,乙腈40%,甲醇40%为流动相,梯度洗脱,采用Thermo HypersilODSC18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）分离,紫外线检测。方法检出限为0.51 mg/L;标准曲线的线性范围为0-1000.0mg/L,相关系数R2=0.9992,具有良好的线性关系,加标回收率为103.9%-105.0%,相对标准偏差为0.9%-2.9%。该方法的灵敏度高、准确性好、前处理操作简单,适用于保健食品纳豆胶囊中牛磺酸含量的检测。

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定N-甘氨酰-L-谷氨酰胺一水合物含量

目的:用反相高效液相色谱法测定N-甘氨酰-L-谷氨酰胺一水合物含量。方法:以2,4-二硝基氟苯作柱前衍生化试剂,在碱性条件下制得2,4-二硝基苯基-N-甘氨酰-L-谷氨酰胺,上ODS色谱柱,置日本岛津SCL-10AVP高效液相色谱仪上进行分析。流动相为0.05mol·L^(-1)醋酸钠水溶液(用冰醋酸调pH6.4)-乙腈(80:20),检测波长为360nm,进样量20μL,流速1mL·min^(-1)。结果:N-甘氨酰-L-谷氨酰胺-水合物在16～80μg·mL^(-1)范围内线性良好,r=0.994 3,回归方程Y=1.2436×10^(-4)X,重现性RSD=0.31％(n=5)。结论:本法可用于测定N-甘氨酰-L-谷氨酸胺-水合物的含量。

柱前衍生化-高效液相色谱法测定阿伦膦酸钠微乳中阿伦膦酸钠的含量

目的:建立一种柱前衍生化高效液相色谱法测定微乳中阿仑膦酸钠含量。方法:供试品经邻苯二甲醛衍生化后,采用Diamonsil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以乙腈-0.4%乙二胺四乙酸二钠的氢氧化钠溶液(取乙二胺四乙酸二钠0.4g 加水溶解并稀释至100 mL,用1 mol·L^(-1)氢氧化钠溶液调 pH 7.2)(27:73)为流动相,流速为1 mL·min^(-1),在336 nm 处检测阿仑膦酸钠衍生化产物。结果:阿仑膦酸钠进样量在36.8～368 ng 范围内与其峰面积有良好的线性关系(r=0.9999)。低、中、高3个浓度的回收率(n=3)分别为99.07%,102.1%,98.62%;RSD 分别为1.8%,1.O%,1.3%。结论:本方法灵敏度高,准确迅速,重现性好。

OPA柱前衍生反相高效液相色谱法测定脑组织中氨基酸类神经递质

目的:建立一种脑组织中氨基酸类神经递质测定的方法。方法:利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生反相高效液相色谱法结合荧光检测器测定标准品或脑组织中5种氨基酸(谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸)的含量。结果:5种氨基酸于15min内得到了很好的分离,在1～10μmol/L和10～100μmool/L浓度范围内与峰高有良好的线性关系。结论:本方法具有快速、准确、灵敏度高、稳定性好等优点,适用于脑组织中微量氨基酸类神经递质的测定。

反相高效液相色谱-柱前衍生化法测定复方板蓝根颗粒中氨基酸的含量

目的:建立复方板蓝根颗粒中指标性成分精氨酸和脯氨酸的RP-HPLC柱前衍生化法.方法:采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生化,将氨基酸在碱性条件下衍生后直接进样测定.Sinochrom ODS-BP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,醋酸钠缓冲溶液(pH6.4)-乙腈(850:150)为流动相,检测波长为360 nm,外标法计算含量.结果:精氨酸和脯氨酸的线性范围分别为0.627～5.016μg和0.874～7.000μg.精氨酸和脯氨酸的平均回收率分别为97.7%(RSD=2.0%)和97.7%(RSD=1.5%).结论:本法简便、准确、可靠,适用于复方板蓝根颗粒的质量控制.

柱前衍生-高效液相色谱法同时测定血清中氨基酸类及单胺类神经递质

以邻苯二甲醛(o-phthalaldehyde,OPA)为衍生试剂,建立了柱前衍生-高效液相色谱(HPLC)同时测定血清中氨基酸类神经递质牛磺酸(Tau)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(γ-GABA)和单胺类神经递质多巴胺(DA)含量的分析方法。血清与乙醇以1∶2的体积比混合,进行蛋白质沉淀后离心,取其上清液,氮吹至近干。前处理后的样品与OPA进行柱前衍生,衍生化产物采用Luna 5u C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以柠檬酸-乙酸钠缓冲溶液(pH 3.73)为流动相A、乙腈为流动相B进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为338 nm。5种神经递质在各自范围内线性关系良好(r2≥0.9866),检出限为0.10~0.40μmol/L,不同加标水平下目标物的加标回收率为87.57%~115.31%,相对标准偏差均低于7.80%。方法操作简单,灵敏度高,精密度、线性关系和回收率等方法学指标较好,可实现血清中氨基酸类及单胺类神经递质的同时检测。

OPA柱前衍生反相高效液相色谱法测定野木瓜发酵饮料中的游离氨基酸

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定野木瓜发酵饮料中的游离氨基酸,在35 min内分离测定了野木瓜发酵饮料中游离氨基酸的含量,方法准确可靠。结果表明,21种氨基酸在0.012 5～2.000 0μg/mL浓度范围内,线性关系良好,相关系数(R2)>0.99;保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.2%～0.7%和2.6%～7.1%范围内;野木瓜发酵液中含有16种氨基酸。