邻香草醛基席夫碱配体衍生物VALD-3对结直肠癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响及其作用机制

目的评价邻香草醛基席夫碱配体衍生物VALD-3对结直肠癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养HT-29和HCT116细胞,MTT法检测VALD-3(5、10、20、40 mg/L)对两种细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜观察VALD-3(10、20、40 mg/L)对两种细胞形态变化的影响;细胞划痕试验检测VALD-3(10、20、40 mg/L)对HT-29细胞迁移能力的影响;流式细胞术和Hoechst 33258荧光染色法检测VALD-3(10、20、40 mg/L)对HT-29细胞凋亡的影响;Western blot法检测VALD-3(5、10、20、40 mg/L)对HT-29细胞中凋亡相关蛋白表达水平的影响。实验均设阴性对照组(不加VALD-3)。结果与阴性对照组比较,10、20、40 mg/L VALD-3组HT-29和HCT116细胞存活率明显下降(t=7.717~2006.148,P均<0.05);10、20和40 mg/L VALD-3组HT-29和HCT116细胞随着VALD-3浓度增加,细胞数目明显减少,且细胞出现不规则形态,逐渐变圆、变小,细胞碎片增多;10、20和40 mg/L VALD-3组HT-29细胞划痕迁移率均明显降低(t=7.596~73.780,P均<0.01),凋亡率明显升高(t=7.092~8.057,P均<0.01),且凋亡细胞明显增多,产生强烈的亮蓝色荧光,染色质浓缩,细胞核碎裂;5、10、20、40 mg/L VALD-3组HT-29细胞中cleaved caspase-3和Bax蛋白水平明显升高(t=2.998~24.901,P均<0.05),40 mg/L VALD-3组Bcl-2蛋白水平明显降低(t=10.035,P<0.05),20、40 mg/L VALD-3组cleaved caspase-8明显升高(t分别为12.630和8.064,P均<0.01)。结论VALD-3可抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移,诱导细胞凋亡,这些作用是通过调节cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、Bax和Bcl-2蛋白表达实现的。